吳玉萍，彭 靜，方晏平

(湖北省武漢市江夏區(qū)第一人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，湖北 武漢 430200)

趨化因子在子宮內(nèi)膜異位癥患者中的表達(dá)及臨床意義

吳玉萍，彭 靜，方晏平

(湖北省武漢市江夏區(qū)第一人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，湖北 武漢 430200)

目的 探討調(diào)節(jié)活化正常T細(xì)胞表達(dá)與分泌的趨化因子(RANTES)在子宮內(nèi)膜異位癥患者血清、在位/異位內(nèi)膜組織中的表達(dá)水平及臨床意義。方法 選擇確診為盆腔子宮內(nèi)膜異位癥的患者89例為研究對(duì)象(觀察組)，以武漢市江夏區(qū)第一人民醫(yī)院婦產(chǎn)科同期取宮內(nèi)節(jié)育器且盆腔結(jié)構(gòu)正常的60例女性為對(duì)照組，收集所有患者臨床資料。采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測(cè)血清、異位/在位內(nèi)膜RANTES水平，并進(jìn)行分析。結(jié)果 觀察組血清RANTES水平顯著高于對(duì)照組(t=3.06，P<0.05)，且觀察組中Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期血清RANTES水平均顯著高于對(duì)照組(t值分別為2.68、4.13，均P<0.05)。在位內(nèi)膜組和異位內(nèi)膜組RANTES水平均較正常內(nèi)膜組顯著升高(t值分別為3.26、4.05，均P<0.05)；Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期異位內(nèi)膜組RANTES水平均較Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期在位內(nèi)膜組顯著升高(t值分別為3.15、4.23，均P<0.05)。子宮內(nèi)膜異位癥血清RANTES水平與盆腔粘連范圍評(píng)分呈顯著正相關(guān)(r=3.986，P<0.05)，與痛經(jīng)評(píng)分無顯著相關(guān)性(r=0.287，P>0.05)。結(jié)論 RANTES可能在子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。

調(diào)節(jié)活化正常T細(xì)胞表達(dá)與分泌的趨化因子；子宮內(nèi)膜異位；在位內(nèi)膜；異位內(nèi)膜

子宮內(nèi)膜異位癥是指具有生長功能的子宮內(nèi)膜異位于子宮內(nèi)膜外的組織，其多發(fā)于育齡期婦女，屬于婦科良性疾病。研究發(fā)現(xiàn)，子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病率逐年上升，生育期女性中約為10%～20%，不孕癥患者中可達(dá)30%～50%，此病因年輕化、易復(fù)發(fā)等特點(diǎn)而成為臨床上棘手的問題[1-2]。目前研究認(rèn)為，子宮內(nèi)膜異位癥與免疫異常密切相關(guān)，患者腹腔液、異位內(nèi)膜可觀察到大量巨噬細(xì)胞浸潤[3]。調(diào)節(jié)活化正常T細(xì)胞表達(dá)與分泌的趨化因子(regulated upon activation normal T cell expressed and secreted, RANTES)是巨噬細(xì)胞募集至子宮內(nèi)膜異位癥病灶部位的主要趨化因子。本研究旨在探討細(xì)胞因子RANTES在子宮內(nèi)膜異位癥患者血清、在位/異位內(nèi)膜組織中的表達(dá)水平及臨床意義。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

選擇2010年6月至2014年5月于武漢市江夏區(qū)第一人民醫(yī)院婦產(chǎn)科診治的盆腔子宮內(nèi)膜異位癥患者89例為研究對(duì)象(觀察組)，患者均經(jīng)陰道超聲、腹腔鏡及病理組織學(xué)確診。子宮內(nèi)膜異位癥Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者分別18、15、39、17例，由同一醫(yī)生對(duì)所有患者的手術(shù)前、中、后臨床資料進(jìn)行評(píng)估。以本院同期取宮內(nèi)節(jié)育器且盆腔結(jié)構(gòu)正常的60例女性為對(duì)照組。觀察組患者年齡20～47歲，平均年齡為36.49±6.03歲，對(duì)照組女性年齡19～45歲，平均年齡34.75±7.42歲，兩組研究對(duì)象的年齡、職業(yè)、月經(jīng)周期等均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(均P>0.05)。研究得到本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有患者均簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 子宮內(nèi)膜異位癥分期及痛經(jīng)評(píng)估

以美國生育協(xié)會(huì)(American Fertility Society, AFS)修正分期法，將子宮內(nèi)膜異位癥分期為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期。以視覺模擬評(píng)分法(visual analogue scale/score, VAS)法評(píng)估痛經(jīng)，①0分：無痛經(jīng)；②1分：喪失一定的工作效率；③2分：部分時(shí)間臥床并喪失工作效率；④3分：部分時(shí)間臥床，沒有工作能力。盆腔粘連范圍評(píng)價(jià)，①0分：無粘連；②1分：盆腔粘連范圍2～6cm；③2分：盆腔粘連范圍6～10cm；④3分：盆腔粘連范圍>10cm[4]。

1.2.2 細(xì)胞因子RANTES的測(cè)定

1.2.2.1 標(biāo)本的提取 空腹抽取5mL肘靜脈血，靜置1小時(shí)，3 000r/min離心5min，吸取血清于-80℃保存待測(cè)。在位及正常內(nèi)膜：將診刮術(shù)獲得的內(nèi)膜放入PBS液洗滌。異位內(nèi)膜：手術(shù)室無菌操作取3cm×2cm異位內(nèi)膜放入PBS液洗滌，待測(cè)內(nèi)膜均保存于液氮罐中。

1.2.2.2 標(biāo)本的測(cè)定 按試劑盒說明嚴(yán)格操作，用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)方法檢測(cè)血清、在位/異位內(nèi)膜及正常內(nèi)膜組織中的RANTES表達(dá)水平，試劑盒購自美國R&D公司。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用Epi Data 3.0進(jìn)行數(shù)據(jù)整理，采用SPSS 17.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)分析；計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)分析或方差分析；非參數(shù)檢驗(yàn)采用秩和檢驗(yàn)；相關(guān)分析采用Pearson法，以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清RANTES水平的比較

觀察組血清RANTES水平顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，且觀察組中Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期血清RANTES水平均顯著高于對(duì)照組(均P<0.05)，見表1。

組別例數(shù)(n)RANTES(ng/L)tP觀察組89728.57±158.98★3.06<0.05 Ⅰ～Ⅱ期33678.14±148.69★2.68<0.05 Ⅲ～Ⅳ期56764.43±124.94★4.13<0.05對(duì)照組60459.78±138.76

注：★為與對(duì)照組比較。

2.2 子宮內(nèi)膜異位癥患者在位/異位內(nèi)膜組織RANTES水平的比較

在位內(nèi)膜組和異位內(nèi)膜組RANTES水平均較正常內(nèi)膜組顯著升高(均P<0.05)；Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期異位內(nèi)膜組RANTES水平均較Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期在位內(nèi)膜組顯著升高(均P<0.05)，見表2。

Table 2 Comparison of RANTES levels between eutopic and ectopic endometrium

注：▲為與對(duì)照組比較，◆為與在位內(nèi)膜組比較。

2.3 子宮內(nèi)膜異位癥血清RANTES水平與痛經(jīng)程度及盆腔粘連范圍的關(guān)系

子宮內(nèi)膜異位癥血清RANTES水平與盆腔粘連范圍評(píng)分呈顯著正相關(guān)(P<0.05)，與痛經(jīng)評(píng)分無顯著相關(guān)性(P>0.05)，見表3。

表3 子宮內(nèi)膜異位癥血清RANTES與痛經(jīng)程度及盆腔粘連范圍相關(guān)分析

Table 3 Relationship between RANTES levels and pelvic adhesion and dysmenorrhea

3 討論

3.1 子宮內(nèi)膜異位癥免疫因素的研究

子宮內(nèi)膜異位癥是一種激素依賴性和免疫性疾病，免疫因素在其發(fā)病中的作用越來越受關(guān)注[5-7]。研究表明，其患者腹腔液嗜酸粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞活性和數(shù)量及RANTES濃度較對(duì)照組明顯升高，且其中70%左右的巨噬細(xì)胞聚集是因RANTES 的趨化作用。RANTES是CC家族成員，由多細(xì)胞產(chǎn)生的全能趨化因子，在機(jī)體多種感染和免疫疾病中可升高表達(dá)。

3.2 細(xì)胞因子RANTES與子宮內(nèi)膜異位癥的關(guān)系

本研究結(jié)果表明，子宮內(nèi)膜異位癥患者血清Ⅰ～Ⅱ期血清RANTES值及Ⅲ～Ⅳ期RANTES值均較對(duì)照組顯著升高(均P<0.05)，RANTES水平于在位內(nèi)膜組和異位內(nèi)膜組均較正常內(nèi)膜組升高[3, 8]。本研究指出子宮內(nèi)膜異位癥血清RANTES與痛經(jīng)評(píng)分無顯著相關(guān)性(P>0.05)，與國內(nèi)其他研究結(jié)果一致[1,9]，這可能與痛經(jīng)是由神經(jīng)系統(tǒng)、粘連、炎癥反應(yīng)、神經(jīng)纖維損傷/再生、雌激素及心理認(rèn)知等復(fù)雜因素參與的過程，其確切機(jī)制不十分清楚，與病變程度無明顯直接聯(lián)系等原因有關(guān)[10]。

國外研究指出舒林酸(非甾體抗炎藥)可改變RANTES堿基，下調(diào)因腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor，TNF-α)、白介素-1β(interleukin，IL-1β)引起的在位及異位內(nèi)膜RANTES的表達(dá)，這也許是其緩解盆腔疼痛的原因之一，本研究表明子宮內(nèi)膜異位癥血清RANTES與盆腔粘連范圍評(píng)分呈顯著正相關(guān)(P<0.05)，這為緩解子宮內(nèi)膜異位癥盆腔疼痛藥物的研究拓展了思路。

終上所述，RANTES可能在子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生發(fā)展中起重要作用，其將來可能作為子宮內(nèi)膜異位癥臨床分期、診治的生物標(biāo)志[9,11-12]。

[1]羅燕,羅明燕.子宮內(nèi)膜異位癥患者血清、腹腔液、在位/異位內(nèi)膜組織中RANTES的表達(dá)及意義[J].南昌大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2013,53(2): 21-25.

[2]周蕓,周明,曾秀華,等.宮腹腔鏡聯(lián)合診治子宮內(nèi)膜異位癥并不孕癥220例臨床分析[J].廣東醫(yī)學(xué),2011,32(15):1987-1989.

[3]Wang X Q, Yu J, Luo X Z,etal. The high level of RANTES in the ectopic milieu recruits macrophages and induces their tolerance in progression of endometriosis[J].J Mol Endocrinol,2010,45(5):291-299.

[4]閆玲,王靄明,張彥春.子宮內(nèi)膜異位癥患者血清CA125表達(dá)研究.武警醫(yī)學(xué),2011,22(4):320-322,325.

[5]郭靜,程忠平.GPR30在子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病機(jī)制中的研究進(jìn)展[J].中國婦幼健康研究,2014,25(6):1107-1109.

[6]楊洋, 徐曉玉.巨噬細(xì)胞在子宮內(nèi)膜異位癥中的作用研究進(jìn)展[J].重慶醫(yī)學(xué),2011,40(15): 1532-1534.

[7]郭蕊萌,尹利榮,王宇全,等.CD146在子宮內(nèi)膜異位癥患者在位及異位內(nèi)膜中的表達(dá)及意義[J].天津醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào).2013,19(3): 206-208,封3.

[8]張立星.IL-8和RANTES在二噁英暴露后子宮內(nèi)膜異位癥模型小鼠中的表達(dá)及意義[D].石家莊:河北醫(yī)科大學(xué), 2012.

[9]陳慧,黃林,王勇. 子宮內(nèi)膜異位癥腹腔液中調(diào)節(jié)活化因子及單核細(xì)胞趨化蛋白-1測(cè)定分析[J].中國實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志，2009,25(1): 49-51.

[10]范小斌,曹引麗,藺小賢,等.RANTES在子宮內(nèi)膜異位癥在位內(nèi)膜及異位內(nèi)膜的表達(dá)及其意義[J].實(shí)用婦產(chǎn)科雜志，2012,28(12): 1035-1038.

[11]李欣,曹保利.復(fù)方莪術(shù)散對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥患者RANTES表達(dá)的影響[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2012,21(20):2170-2172.

[12]王寧寧.應(yīng)重視對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥的早期診斷[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志,2010,26(2):169-171.

[專業(yè)責(zé)任編輯：張欣文]

Expression of RANTES level in women with endometriosis and its clinical significance

WU Yu-ping, PENG Jing, FANG Yan-ping

(DepartmentofObstetricsandGynecology,FirstPeople’sHospitalofJiangxiaDistrict,HubeiWuhan430200,China)

Objective To investigate the expression levels of regulated upon activation normal T cell expressed and secreted (RANTES) in serum and eutopic/ectopic endometrium in women with endometriosis and its clinical significance. Methods 89 Patients with endometriosis were selected as study objects (observation group), and 60 women with normal pelvic structure who underwent laparoscopic surgery for IUD extract in First People’s Hospital of Jiangxia District in the same period were recruited in control group. Clinical data of all cases were collected. RANTES levels in serum and eutopic/ectopic endometrium of two groups were detected and analyzed. Results The serum RANTES level in the observation group was significant higher than that in the control group (t=3.06,P<0.05), and that of patients in Ⅰ-Ⅱstage and Ⅲ-Ⅳ stage was significantly higher than that of the control group (tvalue was 2.68 and 4.13, respectively, bothP<0.05). The serum RANTES levels in eutopic endometrium and ectopic endometrium were significantly higher than normal endometrium (tvalue was 3.26 and 4.05, respectively, bothP<0.05), and those in eutopic endometrium of patients in Ⅰ-Ⅱstage and Ⅲ-Ⅳ stage were higher than in normal endometrium (tvalue was 3.15 and 4.23, respectively, bothP<0.05). The serum RANTES level was positively related with pelvic adhesion score (r=3.986,P<0.05), but not significantly correlated with dysmenorrhea score (r=0.287,P>0.05).Conclusion RANTES may play an important role in the pathogenesis of endometriosis.

regulated uponactivation normal T cell expressed and secreted (RANTES); endometriosis; eutopic endometrium; ectopic endometrium

2014-12-22

吳玉萍(1974-)，女，副主任醫(yī)師，碩士研究生，主要從事子宮內(nèi)膜異位癥、子宮肌瘤的研究。

10.3969/j.issn.1673-5293.2015.03.035

R711.7

A

1673-5293(2015)03-0501-03