王君明，代永霞，陳玉龍，苗明三，張?jiān)略?，李曉冰，崔瑛，屈凌?/p>

·中醫(yī)·中西醫(yī)結(jié)合研究·

雷公藤與金錢草配伍抗食管癌作用的組成配比及其劑量效應(yīng)關(guān)系研究

王君明，代永霞，陳玉龍，苗明三，張?jiān)略?，李曉冰，崔瑛，屈凌?/p>

背景中藥雷公藤與金錢草配伍具有中醫(yī)藥理論依據(jù)、應(yīng)用及現(xiàn)代研究基礎(chǔ)，但迄今為止二者配伍在抗食管癌作用方面的研究鮮有報(bào)道。目的考察雷公藤與金錢草配伍抗食管癌增效作用的最佳質(zhì)量配比及其劑量效應(yīng)關(guān)系。方法2013年12月選取人食管癌Eca9706細(xì)胞，分為對(duì)照組、雷公藤組、金錢草組、1∶4組、1∶2組、1∶1組、2∶1組、4∶1組，分別提取水提取物和醇提取物，采用MTT法測(cè)量各組人食管癌Eca9706細(xì)胞增殖抑制率，選取雷公藤與金錢草配伍抗食管癌增效作用的最佳質(zhì)量配比，進(jìn)一步分為對(duì)照組、5氟尿嘧啶(5－Fu)組、不同濃度醇提取物組(50、100、200、300、400μg/ml組)，測(cè)量人食管癌Eca9706細(xì)胞增殖抑制率。結(jié)果與對(duì)照組比較，雷公藤組、金錢草組、1∶4組、1∶2組、1∶1組、2∶1組、4∶1組水提取物人食管癌Eca9706細(xì)胞增殖抑制率升高(P＜0．05);與雷公藤組比較，金錢草組、1∶4組、1∶2組、1∶1組、2∶1組、4∶1組水提取物人Eca9706細(xì)胞增殖抑制率升高(P＜0．05);金錢草組、1∶4組、1∶2組、1∶1組、2∶1組、4∶1組水提取物人Eca9706細(xì)胞增殖抑制率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0．05)。與對(duì)照組比較，雷公藤組、金錢草組、1∶4組、1∶2組、1∶1組、2∶1組、4∶1組醇提取物人食管癌Eca9706細(xì)胞增殖抑制率升高(P＜0．05);與雷公藤組比較，金錢草組、1∶4組、1∶2組醇提取物人食管癌Eca9706細(xì)胞增殖抑制率降低，2∶1組、4∶1組醇提取物人食管癌Eca9706細(xì)胞增殖抑制率升高(P＜0．05);與金錢草組比較，1∶1組、2∶1組、4∶1組醇提物人食管癌Eca9706細(xì)胞增殖抑制率升高(P＜0．05);與2∶1組比較，4∶1組醇提取物人食管癌Eca9706細(xì)胞增殖抑制率降低(P＜0．05)。雷公藤與金錢草配伍抗食管癌增效作用的最佳質(zhì)量配比為2∶1。與對(duì)照組比較，5－Fu組、50μg/m l組、100μg/ml組、200μg/ml組、300μg/ml組、400μg/ml組人食管癌Eca9706細(xì)胞增殖抑制率升高(P＜0．05);與5－Fu組比較，50μg/ml組、100μg/ml組、200μg/ml組人食管癌Eca9706細(xì)胞增殖抑制率降低，300 μg/ml組、400μg/ml組人食管癌Eca9706細(xì)胞增殖抑制率升高(P＜0．05);50μg/ml組、100μg/ml組、200μg/ml組、300μg/m l組、400μg/ml組人食管癌Eca9706細(xì)胞增殖抑制率兩兩比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0．05)。半數(shù)抑制濃度(IC50值)為316μg/ml。結(jié)論雷公藤與金錢草配伍的醇提取物對(duì)人食管癌Eca9706細(xì)胞具有抗癌增效作用，二者最佳質(zhì)量配比2∶1，濃度為50～400μg/ml時(shí)對(duì)人食管癌Eca9706細(xì)胞的抗癌增效作用呈現(xiàn)出明顯的劑量效應(yīng)關(guān)系。

食管腫瘤;雷公藤;金錢草;中藥配伍;劑量效應(yīng)關(guān)系;藥物

王君明，代永霞，陳玉龍，等．雷公藤與金錢草配伍抗食管癌作用的組成配比及其劑量效應(yīng)關(guān)系研究［J］．中國(guó)全科醫(yī)學(xué)，2015，18(36):4496－4500．［www．chinagp．net］

Wang JM，Dai YX，Chen YL，et al．Component ratio and dose－response relationship of tripterygium wilfordii combined with lysimachia christinae in inhibiting esophageal cells［J］．Chinese General Practice，2015，18(36):4496－4500．

雷公藤為衛(wèi)矛科植物雷公藤(Tripterygium Wilfordii Hook．f．)的干燥根，性寒，味苦、辛，歸肝、腎經(jīng)，功效祛風(fēng)除濕、活血通絡(luò)、消腫止痛和殺蟲(chóng)解毒，具有廣譜抗癌活性，卻毒性較大［1－4］，限制了其療效發(fā)揮及應(yīng)用。雷公藤與金錢草配伍具有減毒增效作用，然而其減毒增效的科學(xué)內(nèi)涵依然未知。本研究旨在探討雷公藤與金錢草配伍對(duì)人食管癌Eca9706細(xì)胞抗癌增效作用的最佳質(zhì)量配比及其劑量效應(yīng)關(guān)系，為雷公藤與金錢草配伍在抗癌尤其是防治食管癌的聯(lián)合應(yīng)用提供臨床前初步實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1材料與方法

1．1細(xì)胞株2013年12月選取人食管癌Eca9706細(xì)胞，由河南中醫(yī)學(xué)院分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中心提供。

1．2試劑5氟尿嘧啶(5－Fu)購(gòu)于上海伊卡生物技術(shù)有限公司，純度≥99%〔高效液相色譜法(HPLC)〕，批號(hào): EK140319。雷公藤:產(chǎn)地廣西，批號(hào):121101，經(jīng)河南中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院生藥學(xué)科陳隨清教授鑒定為衛(wèi)矛科植物雷公藤的干燥根。金錢草:產(chǎn)地廣東，批號(hào):130912，經(jīng)河南中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院生藥學(xué)科陳隨清教授鑒定為報(bào)春花科植物過(guò)路黃(Lysimachia Christinae Hance)的干燥全草。RPMI1640培養(yǎng)基(Gibco公司)、胎牛血清(HyClone公司)、MTT(Amresco公司)、二甲基亞砜(DMSO)(Amresco公司)、胰蛋白酶－乙二胺四乙酸(EDTA)消化液(0．25%)含酚紅(Solarbio公司)。

1．3主要儀器酶標(biāo)儀(BioTek ELx800uv)，Heraeus細(xì)胞培養(yǎng)箱(德國(guó)Kendro)，倒置顯微鏡(ZESS)，SG－603生物安全柜(Bake)，Milli－Q Advantage A10型超純水機(jī)(Millipore)，3－18K高速冷凍離心機(jī)(Sigma)，DL5B臺(tái)式離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠)，XK96－B渦流混合器(姜堰市新康醫(yī)療器械有限公司)，BS210S型電子天平(北京塞多利斯天平有限公司)，DZF－6020真空干燥箱(上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司)，RE－52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠)，HH6數(shù)顯恒溫水浴鍋(上海比朗儀器有限公司)。

1．4提取物的制備

1．4．1水提取物分別取雷公藤、金錢草、雷公藤與金錢草不同質(zhì)量配比(1∶4、1∶2、1∶1、2∶1、4∶1)的飲片，加10倍量水(W/V=1∶10)，浸泡1 h后，回流提取3次，2 h/次，以4 000 r/min離心10 min(離心半徑9 cm)，合并離心上清液，回收水，減壓干燥得干浸膏，稱重。其中，雷公藤、金錢草、雷公藤與金錢草不同質(zhì)量配比(1∶4、1∶2、1∶1、2∶1、4∶1)的水提取物得率依次為9．9%、27．7%、36．5%、23．0%、29．3%、16．6%、12．5%。

1．4．2醇提取物分別取雷公藤、金錢草、雷公藤與金錢草不同質(zhì)量配比(1∶4、1∶2、1∶1、2∶1、4∶1)的飲片，加10倍量75%乙醇(W/V=1∶10)，浸泡1 h后，回流提取3次，2 h/次，以4 000 r/min離心10min(離心半徑9 cm)，合并離心上清液，回收乙醇，減壓干燥得干浸膏，稱重。其中，雷公藤、金錢草、雷公藤與金錢草不同質(zhì)量配比(1∶4、1∶2、1∶1、2∶1、4∶1)的醇提取物得率依次為9．8%、23．8%、16．0%、15．3%、14．6%、14．1%、13．8%。

1．5分組人食管癌Eca9706細(xì)胞，配比篩選試驗(yàn)的水提取物和醇提取物各分8組，即對(duì)照組、雷公藤組、金錢草組、雷公藤與金錢草各配伍組(1∶4組、1∶2組、1∶1組、2∶1組、4∶1組)，各給藥組劑量均為200μg/ml;選取雷公藤與金錢草配伍抗食管癌增效作用的最佳質(zhì)量配比，固定質(zhì)量配比劑量效應(yīng)關(guān)系實(shí)驗(yàn)分7組，即對(duì)照組、5－Fu組、不同濃度醇提取物組(50μg/ml組、100μg/ml組、200μg/ml組、300μg/ml組、400μg/m l組)。水提取物配比篩選試驗(yàn)以雙蒸水作為對(duì)照組，醇提取物配比篩選試驗(yàn)和固定質(zhì)量配比劑量效應(yīng)關(guān)系試驗(yàn)均以0．4%DMSO作為對(duì)照組，水提取物各藥物組均用雙蒸水溶解，5－Fu組和不同濃度醇提取物組均用DMSO溶解并使作用于細(xì)胞的DMSO終濃度不高于0．4%。

1．6 MTT法測(cè)定細(xì)胞增殖抑制率細(xì)胞培養(yǎng):細(xì)胞置于含10%胎牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)基中，于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每間隔48 h更換1次培養(yǎng)基，實(shí)驗(yàn)時(shí)細(xì)胞用消化液(0．02%EDTA和0．25%胰蛋白酶以1∶1比例配制)進(jìn)行消化，并以1×104/孔接種于96孔培養(yǎng)板，于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)24 h。每組設(shè)3個(gè)復(fù)孔，繼續(xù)培養(yǎng)48 h，去除培養(yǎng)基上清液，每孔加入0．5mg/ml的MTT 100μl，繼續(xù)培養(yǎng)4 h，小心吸去上清液，并加入150μl DMSO溶解紫色沉淀，用酶標(biāo)儀在波長(zhǎng)為570 nm/630 nm處測(cè)定吸光度〔D(λ)值〕。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。按以下公式計(jì)算細(xì)胞增殖抑制率:細(xì)胞增殖抑制率采用SPSS 11．5統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件計(jì)算半數(shù)抑制濃度(IC50值)。

1．7統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 11．5統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以(x±s)表示，多組間比較采用單因素方差分析(One－Way ANOVA)，組間兩兩比較采用最小顯著差法(LSD－t)檢驗(yàn)。以P＜0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2．1水提取物人食管癌Eca9706細(xì)胞增殖抑制率比較對(duì)照組、雷公藤組、金錢草組、1∶4組、1∶2組、1∶1組、2∶1組、4∶1組水提取物人食管癌Eca9706細(xì)胞增殖抑制率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0．05);與對(duì)照組比較，雷公藤組、金錢草組、1∶4組、1∶2組、1∶1組、2∶1組、4∶1組水提取物人食管癌Eca9706細(xì)胞增殖抑制率升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0．05);與雷公藤組比較，金錢草組、1∶4組、1∶2組、1∶1組、2∶1組、4∶1組水提取物人Eca9706細(xì)胞增殖抑制率升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0．05);金錢草組、1∶4組、1∶2組、1∶1組、2∶1組、4∶1組水提取物人Eca9706細(xì)胞增殖抑制率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0．05，見(jiàn)表1)。

表1對(duì)照組、雷公藤組、金錢草組及不同濃度水提取物組人食管癌Eca9706細(xì)胞增殖抑制率比較(x±s，%)Table 1 Comparison of Eca9706 cell inhibition rate of water extract among the eight groups

2．2醇提取物人食管癌Eca9706細(xì)胞增殖抑制率比較對(duì)照組、雷公藤組、金錢草組、1∶4組、1∶2組、1∶1組、2∶1組、4∶1組醇提取物人食管癌Eca9706細(xì)胞增殖抑制率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0．05);與對(duì)照組比較，雷公藤組、金錢草組、1∶4組、1∶2組、1∶1組、2∶1組、4∶1組醇提取物人食管癌Eca9706細(xì)胞增殖抑制率升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0．05);與雷公藤組比較，金錢草組、1∶4組、1∶2組醇提取物人食管癌Eca9706細(xì)胞增殖抑制率降低，2∶1組、4∶1組醇提取物人食管癌Eca9706細(xì)胞增殖抑制率升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0．05);與金錢草組比較，1∶1組、2∶1組、4∶1組醇提

本研究創(chuàng)新點(diǎn):

食管癌是我國(guó)及世界上最常見(jiàn)的消化道惡性腫瘤之一，由于早期診斷率低，即使手術(shù)切除，預(yù)后仍較差，全世界每年約有30萬(wàn)人死于此類疾病。隨著新化療藥物的不斷出現(xiàn)，以氟尿嘧啶和順鉑為基礎(chǔ)的聯(lián)合化療使約50%的食管癌患者得以緩解，然而80%的患者就診時(shí)已發(fā)生了廣泛的轉(zhuǎn)移，因此目前5年生存率仍低于30%。西醫(yī)治療在縮小瘤體方面有一定的優(yōu)勢(shì)，而中醫(yī)治療除具有直接抗腫瘤作用外，還可以配合放療和化療，起到減毒增效的作用，增強(qiáng)患者對(duì)放療和化療的耐受性，提高生存質(zhì)量，延長(zhǎng)生存期，因此，從中醫(yī)藥中尋找新的腫瘤防治藥物及方式(如聯(lián)合用藥)是近年來(lái)研究的熱點(diǎn)。雷公藤與金錢草聯(lián)合用藥具有中醫(yī)藥理論及臨床應(yīng)用依據(jù)，但二者配伍是否有抗癌增效作用及其劑量效應(yīng)關(guān)系如何，迄今為止依然未知。本研究考察雷公藤與金錢草配伍的抗癌增效作用，明確其最佳質(zhì)量配比及其劑量效應(yīng)關(guān)系，為二者配伍在抗癌尤其是防治食管癌方面的應(yīng)用提供了臨床前實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。物人食管癌Eca9706細(xì)胞增殖抑制率升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0．05);與2∶1組比較，4∶1組醇提取物人食管癌Eca9706細(xì)胞增殖抑制率降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0．05，見(jiàn)表2)。雷公藤與金錢草配伍抗食管癌增效作用的最佳質(zhì)量配比為2∶1。

2．3雷公藤與金錢草最佳質(zhì)量配比的醇提取物對(duì)人食管癌Eca9706細(xì)胞抗癌增效作用的劑量效應(yīng)關(guān)系對(duì)照組、5－Fu組、50μg/ml組、100μg/ml組、200μg/ml組、300μg/ml組、400μg/m l組人食管癌Eca9706細(xì)胞增殖抑制率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0．05);與對(duì)照組比較，5－Fu組、50 μg/m l組、100μg/ml組、200μg/ml組、300μg/ml組、400 μg/ml組人食管癌Eca9706細(xì)胞增殖抑制率升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0．05);與5－Fu組比較，50μg/ml組、100 μg/m l組、200μg/ml組人食管癌Eca9706細(xì)胞增殖抑制率降低，300μg/m l組、400μg/ml組人食管癌Eca9706細(xì)胞增殖抑制率升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0．05);50μg/ml組、100μg/m l組、200μg/ml組、300μg/ml組、400μg/ml組人食管癌Eca9706細(xì)胞增殖抑制率兩兩比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0．05，見(jiàn)表3)。IC50值為316μg/ml。

3討論

雷公藤與金錢草聯(lián)合用藥屬于中藥相殺配伍的范疇［5］，其中來(lái)自雷公藤的二萜、三萜類成分和金錢草所含的黃酮類成分均具有抗腫瘤作用［6－8］。然而，迄今為止，有關(guān)雷公藤與金錢草配伍在抗腫瘤活性上增效作用的研究鮮有報(bào)道，限制了雷公藤與金錢草配伍的科學(xué)合理應(yīng)用。為了探索雷公藤與金錢草配伍的抗癌增效作用，本研究制備不同質(zhì)量配比雷公藤與金錢草，選取人食管癌Eca9706細(xì)胞，通過(guò)體外MTT法觀測(cè)雷公藤與金錢草配伍對(duì)人食管癌Eca9706細(xì)胞抗癌增效作用的質(zhì)量配比，結(jié)果顯示，雷公藤與金錢草配伍的醇提取物對(duì)體外人食管癌Eca9706細(xì)胞具有抗癌增效作用，二者質(zhì)量配比應(yīng)在2∶1～4∶1，且尤以在2∶1作用為佳，提示通過(guò)聯(lián)合金錢草用藥一方面可以對(duì)雷公藤起到抗癌增效作用，另一方面還可起到降低雷公藤用量從而以降低其中毒風(fēng)險(xiǎn)。此外，本研究通過(guò)體外MTT法觀測(cè)了雷公藤與金錢草配伍抗癌增效作用的劑量效應(yīng)關(guān)系，結(jié)果顯示，雷公藤與金錢草質(zhì)量配比為2∶1的醇提取物，在濃度為50～400μg/ml對(duì)人食管癌Eca9706細(xì)胞的抗癌增效作用具有良好的劑量效應(yīng)關(guān)系，其IC50值為316μg/ml;進(jìn)一步分析顯示，雷公藤與金錢草配伍醇提取物濃度為300～400 μg/m l比5－Fu對(duì)人食管癌Eca9706細(xì)胞的抗癌增效作用強(qiáng)。本研究將為雷公藤與金錢草配伍抗癌尤其在防治食管癌的應(yīng)用提供臨床前初步實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

本研究采用MTT法從體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)角度觀察了雷公藤與金錢草配伍抗癌增效作用的最佳質(zhì)量配比及其劑量效應(yīng)關(guān)系，證實(shí)了雷公藤與金錢草配伍的抗癌增效作用，方法正確，結(jié)果可靠。眾所周知，藥物經(jīng)體外實(shí)驗(yàn)取得的結(jié)果并不能完全反映其體內(nèi)過(guò)程，而本文尚未考察雷公藤與金錢草配伍體內(nèi)抗癌增效作用，是本研究的不足之一;進(jìn)一步探討二者配伍的體內(nèi)抗癌增效作用及其機(jī)制，將是下階段重要的研究方向之一。此外，下階段深入研究不同質(zhì)量配比的化學(xué)基礎(chǔ)變化與抗癌增效作用的相關(guān)性及差異，從化學(xué)角度揭示雷公藤與金錢草配伍抗癌增效作用的科學(xué)內(nèi)涵，將會(huì)推動(dòng)雷公藤與金錢草配伍的應(yīng)用進(jìn)程。

利益沖突聲明:本課題未涉及任何廠家及相關(guān)雇主或其他經(jīng)濟(jì)組織直接或間接的經(jīng)濟(jì)或利益的贊助。無(wú)利益沖突。

表2對(duì)照組、雷公藤組、金錢草組及不同濃度醇提取物組人食管癌Eca9706細(xì)胞增殖抑制率比較(x±s，%)Table 2 Comparison of Eca9706 cell inhibition rate of ethanol extract among the eight groups

表3對(duì)照組、5－Fu組、不同濃度醇提取物組人食管癌Eca9706細(xì)胞增殖抑制率比較(x±s，%)Table 3 Comparison of Eca9706 cell inhibition rate among control group，5－Fu group and groups of different concentrations of ethanol extract

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Com ponent Ratio and Dose－response Relationship of Tripterygium W ilfordii Combined W ith Lysimachia Christinae in Inhibiting Esophageal Cells

WANG Jun－ming，DAIYong－xia，CHEN Yu－long，et al．Collaborative Innovation Center for Respiratory Disease Diagnosis and Treatment＆Chinese Medicine Development of Henan Province，Henan University of TCM，Zhengzhou 450046，China

【Abstract】BackgroundTripterygium wilfordii(LGT)/Lysimachia Christina(JQC)compatibility has bases in the theory of traditional Chinesemedicine(TCM)，clinical application and modern research．However，until now，research on their anti－esophageal cancer efficiency has been rarely reported．Objective To investigate the of optimal component ratio and doseresponse relationship of LGT combined with JQC in inhibiting esophageal cells．M ethods In December 2013，human Eca9706 esophageal cancer cells were selected and were divided into eight groups including control，LGT，JQC，1∶4，1∶2，1∶1，2∶1 and 4∶1 groups，and thewater extracts and ethanol extractswere prepared．MTT assay was used to determine the inhibition rate of cell proliferation，and thus the optimal component ratio of LGT combined with JQC in inhibiting Eca9706 cells was determined．The group with the optimal ratio was further divided into control group，5－Fu group and groups with different concentrations of ethanol extracts(50，100，200，300 and 400μg/ml group)．Results Compared with control group，LGT group，JQC group，1∶4 group，1∶2 group，1∶1 group，2∶1 group and 4∶1 group were higher in the Eca9706 cell inhibition rate ofwater extract(P＜0．05);compared with LGT group，JQC group，1∶4 group，1∶2 group，1∶1 group，2∶1 group and 4∶1 group were higher in the Eca9706 cell inhibition rate of water extract(P＜0．05);JQC group，1∶4 group，1∶2 group，1∶1 group，2∶1 group and 4∶1 group were not significantly different in Eca9706 cell inhibition rate of water extract(P＞0．05)．Compared with control group，LGT group，JQC group，1∶4 group，1∶2 group，1∶1 group，2∶1 group and 4∶1 group were higher in the Eca9706 cell inhibition rate of ethanol extract(P＜0．05);compared with LGT group，JQC group，1∶4 group and 1∶2 group were lower in Eca9706 cell inhibition rate of ethanol extract(P＜0．05)，and 2∶1 group and 4∶1 group were higher in the Eca9706 cell inhibition rate of ethanol extract(P＜0．05);compared with JQC group，1∶1 group，2∶1group and 4∶1 group were higher in the Eca9706 cell in hibition rate of ethanol extract(P＞0．05);compared with 2∶1 group，4∶1 group was lower in the Eca9706 cell inhibition rate of ethanol extract(P＜0．05)．The optimal component ratio of of LGT combined with JQC in inhibiting Eca9706 cellswas2∶1．Compared with control group，5－Fu group，50μg/ml group，100μg/ml group，200μg/m l group，300μg/m l group and 400μg/ml group were higher in Eca9706 cell inhibition rate(P＜0．05);compared with 5－Fu group，50μg/m l group，100μg/ml group and 200μg/ml group were lower in Eca9706 cell inhibition rate(P＜0．05)，and 300μg/ml group and 400μg/ml group were higher in Eca9706 cell inhibition rate(P＜0．05);50μg/ml group，100μg/ml group，200μg/ml group，300μg/ml group and 400μg/ml group were significantly different in Eca9706 cell inhibition rate(P＜0．05)．IC50value was 316μg/ml．Conclusion The ethanol extract of LGT－JQC compatibility has synergistic effect on Eca9706 cell proliferation，The ethanol extract of LGT－JQC with the optimal component ratio of 2∶1 and a concentration of 50－400μg/ml shows obvious dose－response relationship in inhibiting the proliferation of Eca9706 cells．

Esophageal neoplasms;Tripterygium wilfordii;Lysimachia christinae;Compatibility(TCD);Doseresponse relationship;Drug

R 735．1

A

10．3969/j．issn．1007－9572．2015．36．020

2015－04－15;

2015－08－27)

(本文編輯:陳素芳)

國(guó)家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金項(xiàng)目(81503269);中國(guó)博士后科學(xué)基金(2012M521412);河南中醫(yī)學(xué)院省屬高?；究蒲袠I(yè)務(wù)專項(xiàng)人才培養(yǎng)項(xiàng)目(2014KYYWF－QN01);河南省高等學(xué)校青年骨干教師資助計(jì)劃(2014GGJS－072);河南中醫(yī)學(xué)院博士科研基金(BSJJ2010－22)

450046河南省鄭州市，河南中醫(yī)學(xué)院呼吸疾病診療與新藥研發(fā)河南省協(xié)同創(chuàng)新中心(王君明，苗明三，張?jiān)略?，崔?，藥學(xué)院(王君明，張?jiān)略拢掮?，分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中心(陳玉龍)，基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院(李曉冰);鄭州澍青醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)?；A(chǔ)醫(yī)學(xué)部(代永霞);鄭州大學(xué)化學(xué)與分子工程學(xué)院(屈凌波)

王君明，450046河南省鄭州市，河南中醫(yī)學(xué)院呼吸疾病診療與新藥研發(fā)河南省協(xié)同創(chuàng)新中心＆藥學(xué)院;

E－mail:mjw98_2010@163．com

屈凌波，450001河南省鄭州市，鄭州大學(xué)化學(xué)與分子工程學(xué)院;E－mail:qulingbo@zzu．edu．cn