畢樹立 劉斌 成曉華 高海英 李世英

司來(lái)吉蘭對(duì)帕金森病模型大鼠結(jié)腸α-突觸核蛋白和神經(jīng)元型一氧化氮合酶表達(dá)的影響

畢樹立 劉斌 成曉華 高海英 李世英

目的 觀察司來(lái)吉蘭(selegiline)對(duì)帕金森病(Parkinson disease，PD)模型大鼠結(jié)腸功能障礙及結(jié)腸α-突觸核蛋白(α-Synuclein,α-Syn)及神經(jīng)元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase，nNOS)表達(dá)的影響，探討司來(lái)吉蘭對(duì)PD患者結(jié)腸功能障礙的治療作用及可能機(jī)制。方法 將72只健康SD大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、PD模型組和司來(lái)吉蘭治療組，后兩組采用頸背部皮下注射魚藤酮方法制備PD模型。模型組每天給予生理鹽水灌胃，治療組每天給予司來(lái)吉蘭0.5 mg/kg灌胃。分別于治療后4 d、8 d測(cè)定大鼠1 h糞便排出量及含水量，并采用免疫組化法和蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)結(jié)腸α-Syn和nNOS的表達(dá)。結(jié)果 (1)與對(duì)照組比較，模型組各時(shí)間點(diǎn)1 h糞便排出量及含水量均減少 (均P<0.01)；與模型組相比較，治療組各時(shí)間點(diǎn)1 h糞便排出量及含水量均增加(均P<0.05)，且治療8 d亞組高于治療4 d亞組(均P<0.05)。(2)與對(duì)照組比較，模型組各時(shí)間點(diǎn)結(jié)腸α-Syn、nNOS表達(dá)均增加(均P<0.01)；與模型組比較，治療組各時(shí)間點(diǎn)結(jié)腸α-Syn、nNOS表達(dá)均降低(均P<0.05)。與治療4 d亞組比較，治療8 d亞組的α-Syn、nNOS表達(dá)含量降低(均P<0.05)。結(jié)論 司來(lái)吉蘭能夠改善PD大鼠結(jié)腸功能障礙，其作用機(jī)制可能與其抑制α-Syn、nNOS表達(dá)有關(guān)。

帕金森?。沪镣挥|核蛋白；一氧化氮合酶；結(jié)腸；司來(lái)吉蘭

帕金森病(Parkinsondisease，PD)患者常伴便秘等腸道功能障礙[1]。PD典型的病理改變是黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)形成路易體(Lewybody，LB) ，而α-突觸核蛋白(α-Synuclein,α-Syn)是LB的主要成分，其能減少多巴胺的釋放，同時(shí)在肌間及黏膜下神經(jīng)叢神經(jīng)元也存在相同的改變[2]。Drolet等[3]研究發(fā)現(xiàn), 隨著便秘等腸道功能紊亂癥狀的出現(xiàn)，PD大鼠腸神經(jīng)系統(tǒng)會(huì)出現(xiàn)α-Syn的聚集，提示α-Syn的聚集與便秘相關(guān)。一氧化氮(NO)是腸神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)最主要的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)之一，在體內(nèi)由一氧化氮合酶(NOS)催化產(chǎn)生，介導(dǎo)平滑肌的松弛效應(yīng)。在PD大鼠的腸肌叢，特別是在NO能神經(jīng)元中發(fā)現(xiàn)存在α-Syn陽(yáng)性包涵體，證實(shí)NO能神經(jīng)元受損可能與PD腸功能障礙有關(guān)[4]。司來(lái)吉蘭是一種單胺氧化酶B抑制劑，具有抗氧化應(yīng)激、保護(hù)線粒體功能、減少炎性反應(yīng)及減少興奮性毒性等神經(jīng)保護(hù)作用，可延緩PD的進(jìn)展，但其對(duì)PD模型大鼠結(jié)腸功能障礙有何影響尚不明確[5]。本研究采用頸背部皮下注射魚藤酮制備PD大鼠模型，觀察司來(lái)吉蘭對(duì)PD模型大鼠結(jié)腸α-Syn和nNOS表達(dá)的影響，探討司來(lái)吉蘭對(duì)PD患者結(jié)腸功能障礙的治療機(jī)制。

1 材料和方法

1.1 主要試劑與儀器 司來(lái)吉蘭(批號(hào)H20040400，規(guī)格5mg/片)，購(gòu)自O(shè)rionCorporationEspoo(Finland)；魚藤酮(批號(hào)201212，粉劑，1g/瓶)購(gòu)自北京博奧森生物工程有限公司；市售葵花油；SP-0023免疫組化試劑盒(批號(hào)201302)、兔抗大鼠α-Syn抗體(批號(hào)：130926，0.1mL/支)和兔抗大鼠nNOS抗體(批號(hào)：909086W，0.1mL/支)均購(gòu)自北京博奧森生物工程有限公司；DAB顯色試劑盒(批號(hào)：375230AJ，3mL/支)購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司；SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳低分子量標(biāo)準(zhǔn)蛋白購(gòu)自華美生物工程有限公司；奧林巴斯BX63全自動(dòng)顯微鏡掃描系統(tǒng)由日本奧林巴斯公司提供。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康雄性SD大鼠72只，體質(zhì)量250～300g，3～4月齡，由北京華阜康生物科技股份有限公司供給，合格證號(hào)：SCXK(京)2013-0013。在河北聯(lián)合大學(xué)屏障環(huán)境動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)，室溫控制在(23±2)℃，自然光照，自由進(jìn)食。適應(yīng)飼養(yǎng)2周后，將大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、PD模型組和司來(lái)吉蘭治療組，并根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果將各組隨機(jī)分為模型制備成功后4d、8d兩亞組。每組各12只大鼠，其中6只用于免疫組織化學(xué)法檢測(cè)，6只用于Westernblotting法檢測(cè)。

1.3 方法

1.3.1PD模型制備：采用頸背部皮下注射魚藤酮制備PD模型[6]。以出現(xiàn)行為學(xué)改變作為判定模型成功的指標(biāo)[7]。以行為學(xué)檢測(cè)評(píng)分2～6分的大鼠為PD造模成功標(biāo)準(zhǔn)。

1.3.2 干預(yù)處理：模型制備成功后，對(duì)照組和模型組每天給生理鹽水灌胃，治療組每天給予司來(lái)吉蘭0.5mg/kg灌胃，分別連續(xù)給藥4d和8d。

1.3.3 1h糞便排出量及含水量測(cè)定：參照朱紅燦等[4]方法檢測(cè)。

1.3.4 免疫組化法檢測(cè)α-Syn和nNOS表達(dá)：按試劑說(shuō)明書操作要求檢測(cè)各組α-Syn和nNOS陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)。各組分別取6只大鼠，用10%(質(zhì)量濃度)水合氯醛(3mL/kg)腹腔麻醉動(dòng)物，麻醉后經(jīng)4%(質(zhì)量濃度)多聚甲醛灌流固定，剖腹后取大鼠結(jié)腸1.5～2.0cm，清洗干凈結(jié)腸內(nèi)容物，剪去結(jié)腸周圍的脂肪和結(jié)締組織，用4%(質(zhì)量濃度)多聚甲醛固定24h。常規(guī)包埋、切片、脫蠟、水化、抗原修復(fù)；置0.3%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))過(guò)氧化氫20min，分別加入α-Syn抗體、nNOS抗體，4℃孵育過(guò)夜；PBS浸洗 5min×3 次，加入HRP標(biāo)記二抗，37℃孵育 60min；PBS浸洗 5min×3 次。DAB顯色，選取位置相近，結(jié)構(gòu)相似的結(jié)腸部位，并于400倍鏡下選取互不重疊的6個(gè)視野，觀察每個(gè)視野中每100個(gè)細(xì)胞中α-Syn或nNOS陽(yáng)性細(xì)胞的個(gè)數(shù)，取其平均值。

1.3.5 蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)α-Syn和nNOS蛋白表達(dá)：各組分別取6只大鼠，用10%(質(zhì)量濃度)水合氯醛(3mL/kg)腹腔麻醉動(dòng)物，取結(jié)腸1.5～2.0cm，清洗干凈結(jié)腸內(nèi)容物，剪去結(jié)腸周圍的脂肪和結(jié)締組織，即刻投入液氮，然后放入EP管中-80℃保存。取上述保存的冷凍結(jié)腸，提取結(jié)腸組織蛋白80μg，15%(質(zhì)量濃度)SDS-PAGE電泳分離，以濕轉(zhuǎn)法電轉(zhuǎn)移至PVDF膜上，封閉液中封閉1h，然后分別加入稀釋好的Ⅰ抗α-Syn(1∶1000)、nNOS(1∶1000)，4℃孵育過(guò)夜，PBS洗膜，加入相應(yīng)稀釋好的二抗(羊抗兔1∶2000)，37℃反應(yīng)1h，洗膜，以ECL顯色，膠片曝光顯影，結(jié)果用ImageJ圖像程序分析軟件分析目的蛋白條帶及內(nèi)參的吸光度值，以兩者的比值反映目的蛋白相對(duì)表達(dá)量。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠1h糞便排出量及含水率 模型組大鼠各時(shí)間點(diǎn)1h糞便排出量及含水率均低于對(duì)照組(均P<0.01)；治療組大鼠各時(shí)間點(diǎn)1h糞便排出量及含水率均高于模型組(P<0.05)，且治療后8d亞組大鼠1h糞便排出量及含水率高于治療4d亞組(P<0.05)(表1)。

2.2 各組大鼠結(jié)腸α-Syn和nNOS免疫組化檢測(cè) 對(duì)照組大鼠各時(shí)間點(diǎn)結(jié)腸可見少量α-Syn和nNOS陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)。與對(duì)照組比較，模型組各時(shí)間點(diǎn)結(jié)腸α-Syn和nNOS陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)均明顯增加(均P<0.01)；與模型組比較，治療組各時(shí)間點(diǎn)結(jié)腸α-Syn和nNOS陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)均明顯減少(均P<0.01)；與治療4d組比較，治療8d組大鼠各時(shí)間點(diǎn)結(jié)腸α-Syn和nNOS陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)降低(P<0.05)(表2)。

2.3 各組大鼠結(jié)腸α-Syn和nNOS蛋白表達(dá) 對(duì)照組大鼠各時(shí)間點(diǎn)結(jié)腸可見少量α-Syn和nNOS蛋白表達(dá)。與對(duì)照組比較，模型組各時(shí)間點(diǎn)結(jié)腸α-Syn和nNOS蛋白表達(dá)均明顯增加(均P<0.01)；與模型組比較，治療組各時(shí)間點(diǎn)結(jié)腸α-Syn和nNOS蛋白表達(dá)均明顯減少(均P<0.01)；與治療4d組比較，治療8d組大鼠各時(shí)間點(diǎn)結(jié)腸α-Syn和nNOS蛋白表達(dá)降低(均P<0.05)(表3，圖1～2)。

表 1 各組大鼠1 h糞便排出量及含水率的比較

注:與對(duì)照組比，*P<0. 01；與模型組比，△P<0.05， △△P<0.01；與治療4天組比，▲P<0.05。表2、3同

表 2 各組大鼠結(jié)腸α-Syn、nNOS陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)比較,個(gè)/高倍視野)

表 3 各組大鼠結(jié)腸α-Syn和nNOS蛋白表達(dá)檢測(cè)(Western blot)結(jié)果

圖1 各組大鼠結(jié)腸α-Syn蛋白 Western blotting結(jié)果

圖2 各組大鼠結(jié)腸nNOS蛋白Western blotting結(jié)果

3 討論

PD是一種常見中老年人的神經(jīng)系統(tǒng)慢性退行性疾病，靜止性震顫、肌強(qiáng)直、運(yùn)動(dòng)遲緩及姿勢(shì)步態(tài)異常是其主要臨床癥狀[8]，但常伴便秘等腸道功能障礙[1]。PD的腸功能紊亂等非運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)癥狀越來(lái)越受到臨床關(guān)注[9]，而便秘是PD患者腸功能紊亂的常見主訴[10]。研究表明，便秘的發(fā)生甚至早于PD運(yùn)動(dòng)障礙癥狀的出現(xiàn)[11]，更有甚者，PD患者便秘早于錐體外系癥狀出現(xiàn)前10～20年[12]。本研究結(jié)果表明PD模型組大鼠1 h糞便排出量及含水量顯著低于對(duì)照組，表明PD模型組大鼠結(jié)腸排空速度明顯減慢，PD可引起結(jié)腸功能障礙。這與Greene等[10]報(bào)道的結(jié)果相一致。

中腦黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元的變性丟失是PD 的主要病理改變，但PD腸功能障礙的發(fā)生機(jī)制目前尚不清楚。Lebouvier等[13]通過(guò)結(jié)腸鏡取黏膜下叢組織活檢證實(shí)PD患者黏膜下叢存在α-Syn，并且黏膜下叢存在α-Syn的患者便秘的發(fā)生率明顯高于對(duì)照組。研究[2]發(fā)現(xiàn)，大腦和黏膜下神經(jīng)叢都存在LB和α-Syn免疫反應(yīng)的包涵體，認(rèn)為PD病理改變可能開始于腸神經(jīng)系統(tǒng)，并通過(guò)分布到腸道的迷走神經(jīng)節(jié)前纖維逆行傳入到中樞。朱紅燦等[4]研究發(fā)現(xiàn)，6-羥基多巴胺(6-OHDA)組大鼠結(jié)腸肌間神經(jīng)叢α-Syn表達(dá)顯著增強(qiáng)，過(guò)度表達(dá)會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞氧化應(yīng)激增強(qiáng)，影響細(xì)胞的功能，從而引起腸功能障礙，進(jìn)而推測(cè)PD患者便秘可能部分是由于直接損害腸神經(jīng)系統(tǒng)所造成。NO是一種自由基性質(zhì)的氣體，NO可通過(guò)提高胃腸平滑肌內(nèi)環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)的濃度而導(dǎo)致平滑肌松弛，引起胃腸運(yùn)動(dòng)減弱；NO的半衰期短而難以控制，而NOS則相對(duì)穩(wěn)定，NOS廣泛分布于神經(jīng)元中，并在神經(jīng)系統(tǒng)損傷中的表達(dá)變化成為研究熱點(diǎn)。一般將 NOS 分為神經(jīng)元型(nNOS)、內(nèi)皮型(eNOS)和誘導(dǎo)型(iNOS)。有報(bào)道[14]PD患者出現(xiàn)的便秘可能是由于nNOS在胃腸道蠕動(dòng)反射中介導(dǎo)的下行性抑制作用受損所造成；另有學(xué)者報(bào)道，在采用 6-OHDA制備的PD模型的研究中，PD組nNOS陽(yáng)性神經(jīng)元和 nNOSmRNA 表達(dá)明顯升高[15]，而另一項(xiàng)研究結(jié)果則與之相反[16]。本研究的免疫組化法和蛋白質(zhì)印跡檢測(cè)結(jié)果均顯示，模型組大鼠結(jié)腸α-Syn和nNOS的陽(yáng)性細(xì)胞和蛋白表達(dá)均明顯增多，表明結(jié)腸α-Syn和nNOS在PD的腸功能障礙發(fā)病中起重要作用。

司來(lái)吉蘭(Selegiline)是一種常用的單胺氧化酶B抑制劑，它能選擇性地抑制紋狀體內(nèi)促使多巴胺降解為高香草酸的單胺氧化酶(MAO-B)，增加多巴胺的蓄積濃度；同時(shí)也減少多巴胺能神經(jīng)元突觸前膜對(duì)多巴胺的再攝取，促進(jìn)了多巴胺的釋放，延長(zhǎng)外源性及內(nèi)源性多巴胺的作用時(shí)間，使PD患者的臨床癥狀得以改善[17]，可用于PD 早期單藥治療及出現(xiàn)癥狀波動(dòng)后的輔助治療，司來(lái)吉蘭具有神經(jīng)保護(hù)作用[18]，能夠減慢和延緩疾病的進(jìn)展，從而阻止PD進(jìn)展。本研究各組大鼠1 h糞便排出量及含水量比較的結(jié)果顯示，經(jīng)司來(lái)吉蘭治療后，PD模型大鼠結(jié)腸排空速度明顯增快，同時(shí)，本研究的免疫組化法和蛋白質(zhì)印跡檢測(cè)結(jié)果均顯示，司來(lái)吉蘭組大鼠結(jié)腸α-Syn和nNOS的表達(dá)含量均明顯減少，并且隨著時(shí)間的進(jìn)展減少更明顯，表明司來(lái)吉蘭可能通過(guò)抑制PD大鼠α-Syn和nNOS的表達(dá)，發(fā)揮對(duì)結(jié)腸的保護(hù)作用，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，作用更明顯。由此可知，司來(lái)吉蘭能夠改善PD患者的結(jié)腸功能障礙，其作用機(jī)制可能與其抑制PD模型大鼠結(jié)腸α-Syn和nNOS的表達(dá)有關(guān)。這可能為PD患者結(jié)腸功能障礙的防治提供了一定的理論依據(jù)。

[1]Pfeiffer RF. Gastrointestinal dysfunction in Parkinson’s disease [J]. Parkinsonism Relat Disord, 2011, 17(1): 10-15.

[2]Braak H, de Vos RA, Bohl J, et al. Gastric alpha-synuclein immunoreactive inclusions in Meissner’s and Auerbach’s plexuses in cases staged for Parkinson’s disease-related brain pathology [J]. Neurosci Lett, 2006, 396(1): 67-72.

[3]Drolet RE, Cannon JR, Montero L, et al. Chronic rotenone exposure reproduces Parkinson’s disease gastrointe-stinal neuropathology [J]. Neurobiol Dis, 2009, 36(1): 96-102.

[4]朱紅燦, 趙靜, 張華, 等. 帕金森病大鼠胃腸功能障礙的機(jī)制[J]. 臨床神經(jīng)病學(xué)雜志, 2011, 24(3): 202-205.

[5]Zhao Q, Cai D, Bai Y. Selegiline rescues gait deficits and the loss of dopaminergic neurons in a subacute MPTP mouse model of Parkinson’s disease[J]. Int J Mol Med, 2013, 32(4): 883-891.

[6]常宇濤, 羅小光, 任艷, 等. 魚藤酮損傷大鼠黑質(zhì)至行為學(xué)及黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元損傷[J]. 解剖科學(xué)進(jìn)展, 2011, 17(1): 60-62.

[7]陳忻, 張楠, 趙暉, 等. 魚藤酮致帕金森病大鼠行為學(xué)與黑質(zhì)病理?yè)p傷的關(guān)系[J]. 中國(guó)神經(jīng)精神疾病雜志, 2008, 34: 232-234.

[8]劉斌, 孫靜, 張晉霞, 等. 自噬及自噬相關(guān)蛋白在帕金森病模型大鼠黑質(zhì)紋狀體中的表達(dá)及意義[J]. 中國(guó)神經(jīng)免疫學(xué)和神經(jīng)病學(xué)雜志, 2014, 21(3): 187-191.

[9]Jost WH. Gastrointestinal dysfunction in Parkinson’s disease [J]. J Neurol Sci, 2010, 289(1-2): 69-73.

[10]Greene JG, Noorian AR, Srinivasan S. Delayed gastric emptying and enteric nervous system dysfunction in the rotenone model of Parkinson’s disease [J]. Exp Neurol, 2009, 218(1): 154-161.

[11]Abbott RD, Ross GW, Petrovitch H, et al. Bowel movement frequency in late-life and incidental Lewy bodies [J]. Mov Disord, 2007, 22 (11): 1581-1586.

[12]Ueki A, Otsuka M. Life style risks of Parkinson’s disease: Association between decreased water intake and constipation [J]. Neurol, 2004, 251(Suppl7): vII18-23.

[13]Lebouvier T, Neunlist M, Stanislas Bruley des Varannes, et al. Colonic biopsies to assess the neuropathology of Parkinson’s disease and it’s relationship with symptoms [J]. PLoS One, 2010, 5(9): e12728．

[14]Boeckxstaens GE, Pelckmans PA, Bogers JJ, et al. Release of nitric oxide upon stimulation of nonadrenergic noncholinergic nerves in the rat gastric fundus [J]. Pharmacol Exp Ther, 2009, 256(2): 441-447.

[15]朱紅燦, 李倩倩, 趙靜, 等. 左旋多巴對(duì)帕金森病大鼠結(jié)腸神經(jīng)遞質(zhì)的影響[J]. 中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志, 2011, 21(20): 2365-2369.

[16]王偉, 張麗娟, 李燕, 等. 金森病模型大鼠結(jié)腸電機(jī)械活動(dòng)的改變[J].首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào), 2009, 30(4): 486- 493.

[17]楊新玲, 賈叢康, 張晨, 等.司來(lái)吉蘭治療帕金森病新進(jìn)展[J].中國(guó)臨床神經(jīng)科學(xué), 2008, 16(4): 407-410.

[18]Naoi M, aruyama W. Monoamine oxidase inhibitors as neuroprotective agents in age-dependent neurodegenerative disorders [J]. Curr Pharm Des, 2010, 16( 25) : 2799-2817.

(本文編輯：時(shí)秋寬)

Effects of selegiline on the expression of α-synuclein and neuronal nitric oxide synthase in colon of Parkinson’s disease model rats

BIShuli,LIUBin*,CHENGXiaohua,GAOHaiying,LIShiying.

*First Department of Neurology, the Affiliated Hospital of Hebei United University, Tangshan Hebei 063000, China

LIUBin,Email:liubintsh@126.com

ObjectiveToobservetheeffectsofselegilineoncolonicdysfunction,α-synuclein(α-Syn)andneuronalnitricoxidesynthase(nNOS)expressionsincolonofratmodelofParkinson’sdisease(PD),thentoinvestigatethetherapeuticaleffectandmechanismofselegilineoncolonicdysfunctionofPDpatients.MethodsSeventy-twoSDratswererandomlydividedintonormalcontrolgroup,PDmodelgroup,andselegilinetreatmentgroup.PDratsmodelwereestablishedbysubcutaneousrotenoneinjection.Afterthesuccessofmodelpreparation,PDgroupwasgivennormalsalinedaily,andtherapygroupwasgivenselegiline0.5mg/kgbyintragastricadministration.Atthetimepointof4dand8daftertherapy, 1hfecalexcretionandwatercontentwasassessed,andtheexpressionofα-SynandnNOSweredetectedbyimmunohistochemistryandwesternblotting.Results(1)Comparedwithcontrolgroup,modelgrouphadlower1hfecalexcretionandwatercontentateachtimepoint,andthedifferenceswerestatisticallysignificant(allP<0.01).Comparedwithmodelgroup, 1hfecalexcretionandwatercontentwereallincreasedintherapygroupateachtimepoint(allP<0.05),andintreatment8dsubgroup1hfecalexcretionandwatercontentwerehigherthanthoseoftreatment4dsubgroup(allP<0.05). (2)Comparedwithcontrolgroup,inmodelgroupateachtimepoint,theexpressionsofα-SynandnNOSweresignificantlyincreased(allP<0.01).Comparedwithmodelgroup,intreatmentgroupateachtimepoint,theexpressionsofα-SynandnNOSpositivewerealldecreased(allP<0.05);comparedwithtreatment4dsubgroup,theexpressionsofα-SynandnNOSweredecreasedintreatment8daysubgroup(allP<0.05).ConclusionsSelegilinecanimprovecolonicdysfunctioninPDrats,anditsmechanismmayberelatedtotheinhibitionofα-SynandnNOSexpressionsincolonofPDmodelrats.

Parkinson’sdisease;alpha-synuclein;nitricoxidesynthase;colon;selegiline

10.3969/j.issn.1006-2963.2015.01.007

唐山市科學(xué)技術(shù)研究與發(fā)展指導(dǎo)計(jì)劃資助項(xiàng)目(項(xiàng)目編號(hào): 13130292a)

063000 河北聯(lián)合大學(xué)附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)一科〔畢樹立(現(xiàn)工作于開平區(qū)醫(yī)院急診科)、劉斌、成曉華、李世英〕；063300 唐山市豐南區(qū)醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科 (高海英)

劉斌，Email:liubintsh@126.com

R742.5

A

1006-2963 (2015)01-0025-05

2014-07-27)