翟凱齊,張麗娜,張漢濤

1.開(kāi)封市兒童醫(yī)院檢驗(yàn)科,河南開(kāi)封 475000;2.河南宏力醫(yī)院檢驗(yàn)科,河南新鄉(xiāng) 453400;3.濮陽(yáng)市油田總院超聲科,河南濮陽(yáng) 457000

新生兒溶血?。℉DN）一般指母嬰血型不合，孕婦體內(nèi)產(chǎn)生的相應(yīng)的IgG類(lèi)抗體由胎盤(pán)進(jìn)入嬰兒血液循環(huán)，導(dǎo)致新生兒紅細(xì)胞破壞而引起的溶血性疾病[1-2]。以母親血為O型,嬰兒血為A或B型的ABO溶血病,在臨床上最為多見(jiàn),約占新生兒溶血癥的80%[3],該研究整群選取2011年1月—2014年12月開(kāi)封市兒童醫(yī)院879例因黃疸住院疑似HDN的新生兒做血清學(xué)檢測(cè)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

整群選取2011年1月—2014年12月期間收治于該院新生兒科，疑似HDN的新生兒,男476例,女403例,男女比例為1.18:1，病歷資料顯示，日齡為生后 4 h~7 d,平均日齡(2.5±0.4)d,主要臨床表現(xiàn)為黃疸、發(fā)熱、納差、驚厥;分別進(jìn)行ABO、RbD血型鑒定及新生兒溶血三項(xiàng)檢測(cè)，收集試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。

1.2 儀器及試劑

卡式微柱凝膠檢測(cè)系統(tǒng)(含專(zhuān)用離心機(jī)、37℃恒溫孵育箱、微凝膠檢測(cè)卡)由中國(guó)長(zhǎng)春博迅生物技術(shù)有限公司提供；ABO血型正定型試劑由中國(guó)河北醫(yī)科大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程中心提供，RhD（IgM）血型定型試劑、生理鹽水、ABO血型反定型紅細(xì)胞試劑均由中國(guó)上海血液生物醫(yī)藥有限公司提供。

1.3 檢測(cè)方法

1.3.1 標(biāo)本收集 清晨空腹抽取新生兒3 mL靜脈血,分別加入無(wú)抗凝真空采血管和乙二胺四乙酸抗凝真空采血管(河南省山山醫(yī)療用品有限公司提供),標(biāo)注姓名混勻后及時(shí)送檢。

1.3.2 標(biāo)本處理 未抗凝標(biāo)本,37℃水浴20 min后，3 000 r/min,離心半徑10 cm,離心5 min分離血清備用，抗凝標(biāo)本取底層紅細(xì)胞用生理鹽水洗滌后備用。

1.3.3 樣本檢測(cè) ABO正定型法檢測(cè)新生兒ABO血型及RH-D血型，采取微柱凝膠檢測(cè)法對(duì)新生兒標(biāo)本進(jìn)行溶血三項(xiàng)檢測(cè),必要時(shí)手工經(jīng)典酶法復(fù)核。使用儀器設(shè)備均處于穩(wěn)定的狀態(tài)下,實(shí)驗(yàn)步驟嚴(yán)格照《臨床輸血檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程》及廠家試劑使用說(shuō)明進(jìn)行。

1.3.4 結(jié)果判定 溶血三項(xiàng)試驗(yàn)完成前期試驗(yàn)步驟后，使用專(zhuān)用離心機(jī)離心 5 min，900 rpm 2 min，1500 rpm 3 min，取出肉眼觀察結(jié)果，若紅細(xì)胞若沉積在底部，實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陰性（-）；若紅細(xì)胞聚集在上部，表明紅細(xì)胞發(fā)生凝集，實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性（+）；直接抗人球蛋白試驗(yàn)、血清游離抗體試驗(yàn)、抗體釋放試驗(yàn)三項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果判讀模式，見(jiàn)表1。

表1 溶血三項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果七種判讀模式

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS17.0軟件包對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，各血型HDN檢出率HDN陽(yáng)性分布的比較采用χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 AB0-HDN血型鑒定結(jié)果與溶血3項(xiàng)試驗(yàn)陽(yáng)性率比較

由表2可以看出，897例送檢血清學(xué)標(biāo)本中，AB0-HDN的檢出率為13.88%，Rh-HDN的檢出率為2.16%，AB0-HDN組、Rh-HDN組、AB0-HDN可疑組各組間血性分布的陽(yáng)性率比較χ2分別為19.65、7.31、12.38，組間血型HDN陽(yáng)性率不相同，各血型的分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），由此可見(jiàn)，HDN臨床上最為常見(jiàn)是以AB0血型不合引起的HDN為主，Rh-HDN較為少見(jiàn)；見(jiàn)表2。

表2 AB0、RhD血型鑒定結(jié)果與溶血3項(xiàng)試驗(yàn)陽(yáng)性率[n(%)]

2.2 HDN患兒各血型分布情況比較

AB0-HDN陽(yáng)性標(biāo)本中以A和B型血的患兒最為多見(jiàn)，Rh-HDN中則以O(shè)型血患兒最為常見(jiàn)，組中各血型的陽(yáng)性率比較χ2分別為16.22、23.47、20.38。HDN患兒中各血型分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05 ）。 見(jiàn)表 3。

表3 HDN患兒各血型分布情況[n(%)]

3 討論

該研究顯示ABO-HDN（13.88%）顯著多于Rh-HDN（2.16%），這與國(guó)內(nèi)報(bào)道[4]中顯示A型或B型血的新生兒發(fā)生HDN最為多見(jiàn)相一致；所有檢測(cè)樣本中A型血比例略高于B型血，這與國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)[5]報(bào)道有所不同，這可能與各地區(qū)血型分布情況存在一定差異性有關(guān)；此外，ABO-HDN中A型和B型血患兒占HDN陽(yáng)性患兒比例高達(dá)98.36%,Rh-HDN僅為2.16%。與國(guó)內(nèi)多地報(bào)道一致，再一次印證了AB0-HDN的發(fā)生在臨床上最為多見(jiàn)；此外，HDN的診斷主要包括產(chǎn)前診斷和新生兒檢測(cè)兩部分，產(chǎn)前檢查主要包括孕婦的血清學(xué)檢查、羊水檢測(cè)、影像學(xué)檢查等，患兒的實(shí)驗(yàn)室診斷則主要依靠溶血3項(xiàng)血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果作為依據(jù)[6],而且在某些情況下，患兒母親可能未做產(chǎn)前篩查或留取血樣，因此，新生兒溶血3項(xiàng)試驗(yàn)?zāi)壳耙呀?jīng)成為疑似HDN患兒的主要篩查指標(biāo)；新生兒溶血病3項(xiàng)試驗(yàn)包括直接抗人球蛋白試驗(yàn)、游離抗體試驗(yàn)、抗體釋放試驗(yàn)。其中直接抗人球蛋白試驗(yàn)是檢查新生兒紅細(xì)胞是否致敏，但由于新生兒紅細(xì)胞上血型抗原相對(duì)較少，吸附抗體能力弱，所以該實(shí)驗(yàn)反應(yīng)常常呈弱陽(yáng)性或陰性，因此該實(shí)驗(yàn)只起參考作用[7]。游離抗體和抗體釋放試驗(yàn)則是直接檢查抗體的存在和分布，對(duì)于HDN的診斷更具特異性和敏感性；國(guó)內(nèi)目前大多報(bào)道均為已知母嬰血型不合而導(dǎo)致HDN的發(fā)病率調(diào)查，該報(bào)告中的879例患兒溶血3項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果顯示HDN的陽(yáng)性率較文獻(xiàn)[8]報(bào)道偏低，原因可能為鑒于本報(bào)告所做研究均為母親血型未知下進(jìn)行，在所有的檢測(cè)患兒中存在一些母嬰血型相符的情況，此外，臨床上引起黃疸的誘因很多，一部分疑似患兒可能不屬于溶血引起，而被納入篩查，在所有確診的HDN中，無(wú)論是ABO-HDN還是Rh-HDN，其發(fā)生率和主要的血性分布與國(guó)內(nèi)相關(guān)報(bào)道大致相同[9]。

對(duì)妊娠前和妊娠早期夫婦雙方進(jìn)行血型及血型抗體效價(jià)的檢測(cè)對(duì)于預(yù)防和減少HDN的發(fā)生具有重要的臨床意義，在新生兒期，實(shí)驗(yàn)研究[10]顯示越早進(jìn)行新生兒溶血三項(xiàng)的篩查，其陽(yáng)性率越高，這是因?yàn)殡S著病程的推移，患兒血液中游離抗體及致敏紅細(xì)胞數(shù)目逐漸消耗所致，而大部分IgG抗體以抗原抗體復(fù)合物形式存在，失去反應(yīng)原性。因此，對(duì)于疑似HDN的溶血三項(xiàng)檢查，應(yīng)盡早進(jìn)行，以提高HDN篩查檢驗(yàn)的陽(yáng)性率，減少誤診、漏診。

綜上所述，及早對(duì)疑似HDN的患兒進(jìn)行溶血三項(xiàng)血清學(xué)檢測(cè)，為臨床新生兒溶血病的診斷提供數(shù)據(jù)支持，對(duì)評(píng)估疾病的程度以及治療方案的選擇都有重要的指導(dǎo)意義。

[1]林峰如,王艷,李石磊.新生溶血病診治進(jìn)展[J].中國(guó)實(shí)用內(nèi)科學(xué)雜志,2012,32（5）:335-337.

[2]林秀妹,王丹.1092例新生兒溶血三項(xiàng)試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果的回顧分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2012,9（23）:2979-2980.

[3]甘志遠(yuǎn),蘇國(guó)紅,伍煥秀.ABO溶血病新生兒178例血清學(xué)檢測(cè)及其意義探討[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)刊,2013,15（6）:1047-1048.

[4]劉郁.新生兒溶血病發(fā)生率與溶血三項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果的相關(guān)性分析[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2011,20(28):3606,3610.

[5]黃柳梅.890例新生兒ABO溶血三項(xiàng)試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果分析[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2015,36(1):113-115.

[6]李京.臨床輸血與檢驗(yàn)技術(shù)[M].天津:天津科學(xué)技術(shù)出版社,2008:139-142.

[7]劉毅,劉衍春,劉洪莉,等.微柱凝膠技術(shù)在新生兒溶血病血清學(xué)檢查中的運(yùn)用[J].臨床檢驗(yàn)雜志,2005，23（1）:43-45.

[8]董雪芹,范金元,李玉華,等.哈密地區(qū)新生兒溶血病發(fā)病及檢測(cè)情況調(diào)查[J].中國(guó)輸血雜志，2011，24(8)：693-695.

[9]李保才,黎海瀾.母嬰血型不合引起新生兒溶血病的實(shí)驗(yàn)室診斷[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2011，8(23)：2886-2887.

[10]曹文武,劉渝霞.153份母嬰ABO血型不合新生兒溶血樣本檢測(cè)結(jié)果分析[J].中國(guó)輸血雜志，2005,18(6)：494-495.