楊月+呂婷婷+唐曉清+李艷+張毅+王康才

摘要：采用盆栽試驗研究不同濃度酰胺態(tài)氮對菘藍(lán)生長及活性成分積累的影響，為菘藍(lán)合理施用有機(jī)氮肥提供理論依據(jù)。結(jié)果表明：（1）葉面噴施2次和1次酰胺態(tài)氮，隨著濃度的增大，菘藍(lán)單株干質(zhì)量先增加后降低，葉面噴施3次酰胺態(tài)氮，隨著濃度增大，單株干質(zhì)量增加;葉面噴施酰胺態(tài)氮對葉片的促生長作用大于對根的作用。（2）葉面噴施2次5 g/L的酰胺態(tài)氮有利于葉內(nèi)靛藍(lán)的積累，噴施1次10 g/L利于靛玉紅的積累。（3）葉面噴施3次10 g/L的酰胺態(tài)氮利于根中（R，S）-告依春含量的積累。研究結(jié)果說明酰胺態(tài)氮對菘藍(lán)葉中靛藍(lán)、靛玉紅與根中（R，S）-告依春含量的動態(tài)積累影響不一致。結(jié)合酰胺態(tài)氮對菘藍(lán)生長的影響，為獲得高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的大青葉與板藍(lán)根，應(yīng)在菘藍(lán)苗期葉面噴施質(zhì)量濃度為15 g/L的酰胺態(tài)氮2次。

關(guān)鍵詞：菘藍(lán);酰胺態(tài)氮;靛藍(lán);靛玉紅;（R，S）-告依春

中圖分類號： S567.901 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

文章編號：1002-1302（2015）04-0241-04

收稿日期：2014-04-17

基金項目：國家自然科學(xué)基金（編號：31171486）;國家級大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計劃（編號：201310307026）。

作者簡介：楊 月（1992—），女，河南三門峽人，從事藥用植物栽培生理與中藥質(zhì)量研究。E-mail： 14411110@njau.edu.cn。

通信作者：唐曉清，博士，副教授，從事藥用植物栽培與中藥質(zhì)量控制研究。E-mail：xqtang@njau.edu.cn。

十字花科植物菘藍(lán)（Isatis indigotica Fort.）的干燥根入藥為板藍(lán)根，葉入藥為大青葉[1]，為我國常用的大宗中藥材。板藍(lán)根具有抗病毒、抗活性氧、抗炎抗菌以及抗內(nèi)毒素的作用[2-5]，是公認(rèn)的有較好抗病毒效果的中藥之一，在臨床配方中應(yīng)用較多，廣泛用于治療流感、腮腺炎、乙腦、肝炎等多種疾病。板藍(lán)根中的（R，S）-告依春與大青葉中的靛玉紅為其活性成分[1]，靛玉紅及其衍生物可用于治療慢性粒細(xì)胞白血病[6-7]。作為常用中藥來源的菘藍(lán)，在其栽培生產(chǎn)中，如何采取適宜的措施提高其產(chǎn)量與質(zhì)量是值得研究的課題。而氮是植物重要的營養(yǎng)元素，植物體吸收的氮素形態(tài)主要有無機(jī)態(tài)氮如硝態(tài)氮（NO-3-N）和銨態(tài)氮（NH+4-N）、有機(jī)態(tài)氮如尿素[CO（NH2）2]等，各種形態(tài)氮吸收利用的形式不同[8]。關(guān)于硝態(tài)氮和銨態(tài)氮對菘藍(lán)品質(zhì)和產(chǎn)量的影響已有報道[9]，菘藍(lán)生物量隨著銨硝比的降低先增加后下降，全銨營養(yǎng)下最小，銨硝比為50 ∶ 50時最大。單用酰胺態(tài)氮對植物產(chǎn)量和品質(zhì)影響的研究已有報道[10-13]。肖云華等研究表明，不同的氮素形態(tài)和濃度對菘藍(lán)生物量和活性成分含量的影響存在很大差異，酰胺態(tài)氮對菘藍(lán)生物量的影響最大，其次是銨態(tài)氮，影響最小的是硝態(tài)氮，生物量并不隨著總氮量提高而增加，而與氮素形態(tài)有關(guān)[14]。在不同形態(tài)氮素中酰胺態(tài)氮顯著影響了菘藍(lán)的氣孔導(dǎo)度與蒸騰速率[15]。但不同濃度酰胺態(tài)氮對菘藍(lán)生長量及活性成分動態(tài)積累的影響尚未見報道。本研究采用盆栽試驗，研究不同濃度下酰胺態(tài)氮對菘藍(lán)的生長及藥材品質(zhì)的影響，以期為提高菘藍(lán)產(chǎn)量和品質(zhì)合理施用有機(jī)氮肥提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

材料來自于山西栽培居群的菘藍(lán)果實，采用盆缽（外口徑44 cm，底直徑30 cm，高35 cm），栽培基質(zhì)為蛭石和珍珠巖按2 ∶ 1的比例混合而成，2013年5月2日播種，適時間苗，選擇長勢一致、真葉4～5張的菘藍(lán)幼苗，每盆8株。

基本營養(yǎng)液配方中大量元素和微量元素都采用霍格蘭營養(yǎng)液配方，基本營養(yǎng)液pH值 6.0。處理液為不同濃度的酰胺態(tài)氮，由純脲[CO（NH2）2]提供，磷、鉀（P、K）由磷酸二氫鉀（KH2PO4）提供，所用試劑為分析純（AR）。

1.2 試驗方法

1.2.1 試驗設(shè)計 試驗設(shè)4個質(zhì)量濃度，分別為0.5%（5 g/L）、1.0%（10 g/L）、1.5%（15 g/L）、2.0%（20 g/L），各以N0.5%、N1.0%、N1.5%、N2.0%表示，各處理重復(fù)5次，隨機(jī)排列;以清水為對照，記為NCK處理，正常供給P、K。材料出苗15 d后，每隔 10 d 澆灌1次基本營養(yǎng)液，每次1 000 mL。播種 85 d 后開始處理，葉面噴施有機(jī)氮純脲[CO（NH2）2]溶液，第1次處理A組，第2次處理A與B組，第3次處理A、B與C 3組，即A處理3次，B組處理2次，C組處理1次。每次處理后間隔30 d處理1次，最后一次處理后10 d開始第1次采樣，之后間隔15 d采樣1次，共采樣4次。

1.2.2 生物量測定 每個處理隨機(jī)采收6株，清洗干凈，按地上部（大青葉）、地下部（板藍(lán)根）2個部位分開，準(zhǔn)確稱取質(zhì)量，105 ℃殺青15 min后60 ℃烘干至恒質(zhì)量，準(zhǔn)確稱取干質(zhì)量，粉碎，葉過60目篩備用，根過100目篩備用。

1.2.3 葉中靛藍(lán)、靛玉紅的測定 參照《中國藥典》（2010版）高效液相色譜法測定大青葉中靛藍(lán)、靛玉紅含量的條件[1]，略作修改。超高效液相色譜（UPLC）條件：采用Acclaim RSLC120 C18 （3.0×100 mm，2.2 μm）分析柱;以甲醇-水（72 ∶ 28）為流動相，流速0.40 mL/min;柱溫30 ℃;檢測波長為289 nm;進(jìn)樣體積5 μL。

1.2.4 根中（R，S）-告依春測定 參照《中國藥典》（2010版）高效液相色譜法測定根中（R，S）-告依春含量的條件[1]，略作修改。UPLC色譜條件：分析柱同“1.2.3”節(jié)，以甲醇-0.02%磷酸溶液（7 ∶ 93）為流動相;流速0.40 mL/min;柱溫30 ℃;檢測波長為245 nm;進(jìn)樣體積5 μL。endprint

1.2.4 線性關(guān)系 精密配制質(zhì)量濃度為0.2、0.4、1、2、3、4、8 μg/mL 的靛藍(lán)標(biāo)準(zhǔn)溶液，質(zhì)量濃度分別為0.4、0.8、2、4、6、8、10 μg/mL 的靛玉紅標(biāo)準(zhǔn)溶液，質(zhì)量濃度為1、2.5、5、10、20、30、40 μg/mL的（R，S）-告依春標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)樣5 μL，用UPLC進(jìn)行測定，以色譜峰面積（Y）和對應(yīng)的質(zhì)量濃度（X，μg/mL）作標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算回歸方程。靛藍(lán)的回歸方程：Y1=0.117 9X1-0.037 3，r=0.999 1（n=3）;靛玉紅的回歸方程：Y2=0.184 4X2-0.135 1，r=0.999 9（n=3）;（R，S）-告依春的回歸方程：Y3=2.266 8X3-0.884 2，r=0.999 5（n=3）。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

采用Excel 2010和SAS 9.2統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，數(shù)據(jù)間比較采用LSD最小顯著差數(shù)法。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同濃度酰胺態(tài)氮對菘藍(lán)生長的影響

2.1.1 不同濃度酰胺態(tài)氮對菘藍(lán)單株葉與根干質(zhì)量的影響 不同濃度酰胺態(tài)氮處理不同次數(shù)后，隨著菘藍(lán)生長時間的延長，菘藍(lán)單株葉與根的干質(zhì)量積累基本趨于一致，均呈現(xiàn)依次遞增的動態(tài)規(guī)律（表1）。第4次采樣與前3次采樣差異顯著。對于單株葉干質(zhì)量，第1次采樣，處理C組N1.5%葉干質(zhì)量最高（1.66 g），隨著酰胺態(tài)氮濃度的增大，A組葉干質(zhì)量先減小再增大而后減小，濃度為N0.5%時葉干質(zhì)量最高，B組葉干質(zhì)量先增大后減小，濃度為N1.0%時葉干質(zhì)量最高，C組先增大后減小，濃度為N1.5%時葉干質(zhì)量最高;第2次采樣，C組對照NCK葉干質(zhì)量最高（5.01 g），隨著處理濃度的增大，A組葉干質(zhì)量先增大后減小，濃度為N1.0%時最高，B組葉干質(zhì)量先減小后增大，濃度為N0.5%時最高，C組先減小后增大，對照葉干質(zhì)量最高;第3次采樣，處理均高于對照，處理B組N0.5%最高（4.76 g），隨著處理濃度的增大，A組葉干質(zhì)量先增大再減小而后增大，濃度為N2.0%時最高，B組葉干質(zhì)量先減小后增大，濃度為N0.5%時最高，C組先減小后增大，濃度為N0.5%時最高;第4次采樣，處理C組N1.0%最高（9.79 g），隨著處理濃度增大，A組葉干質(zhì)量增大，濃度為N2.0%時最高，B組葉干質(zhì)量先增大后減小，濃度為N1.5%時最高，C組先增大后減小，濃度為N1.5%時最高。

表1 不同濃度酰胺態(tài)氮對菘藍(lán)單株葉與根干質(zhì)量的影響

組別 質(zhì)量

濃度

單株葉干質(zhì)量（g） 單株根干質(zhì)量（g）

10月6日 10月21日 11月5日 11月20日 10月6日 10月21日 11月5日 11月20日

A NCK 1.33±0.11bab 3.38±0.29abab 3.11±0.11aba 4.90±0.97acde 0.81±0.22bbc 0.92±0.26bb 2.39±0.29aab 3.15±0.28abc

N0.5% 1.62±0.50ba 1.82±0.24bb 3.34±0.16aba 4.37±0.57ade 1.51±0.24ba 0.54±0.03bb 1.14±0.37bab 3.99±0.67aabc

N1.0% 1.22±0.35bab 3.48±0.37abab 3.48±0.42aba 4.38±0.18ade 0.75±0.12bbc 2.46±0.34ba 2.56±0.43ba 2.31±0.59ac

N11.5% 1.35±0.14cab 2.90±0.41bcab 3.27±0.36ba 7.44±0.06aabcde 0.81±0.09bbc 0.84±0.13bb 1.20±0.34bab 3.97±0.48abc

N2.0% 0.96±0.18cab 2.39±0.64bcb 3.97±0.36ba 9.14±1.97aab 0.81±0.13bbc 1.35±0.22bb 2.09±0.75bab 5.49±1.18aabc

B NCK 1.18±0.04bab 2.86±0.28bab 3.36±0.20ba 6.46±0.79aabcde 0.64±0.05bbc 1.28±0.25bb 1.33±0.39bab 4.03±0.91aabc

N0.5% 1.37±0.13aab 3.68±0.70aab 4.76±0.58aa 3.97±0.22ae 0.57±0.02abc 1.01±0.20ab 2.61±0.23aa 2.29±0.75ac

N1.0% 1.44±0.28bab 3.07±0.28bab 4.21±0.79aba 7.93±0.85aabcde 0.90±0.13babc 1.34±0.37bb 1.61±0.30bab 7.74±1.30aa

N1.5% 1.31±0.29bab 1.79±0.10bb 3.69±0.70ba 8.50±1.88aabcde 0.78±0.13bbc 0.64±0.12bb 1.71±0.43bab 6.34±0.92aab

N2.0% 1.26±0.13cab 2.54±0.15bcb 4.01±0.86ba 6.87±0.46aabcde 0.66±0.17bbc 1.04±0.25bb 1.06±0.38bab 3.69±0.56abc

C NCK 1.38±0.18cab 5.01±0.93aba 2.20±0.62bca 6.33±1.30aabcde 1.20±0.12bab 1.36±0.33abb 0.89±0.39bb 4.65±0.22aabc

N0.5% 1.06±0.15bab 2.81±0.34bab 4.15±0.48aba 8.29±1.20aabcd 0.99±0.16babc 1.01±0.31bb 2.12±0.61bab 5.55±0.16aabcendprint

N1.0% 1.65±0.25ba 2.69±0.15bab 3.08±0.52ba 9.79±1.42aa 1.13±0.25babc 1.09±0.27bb 1.88±0.54bab 5.57±0.61aabc

N1.5% 1.66±0.50ba 1.39±0.17bb 2.99±0.15ba 5.53±0.16abcde 0.93±0.14babc 0.80±0.17bb 1.10±0.71bab 2.67±0.39abc

N2.0% 0.62±0.04cb 2.47±0.22bb 3.65±0.37aba 5.23±0.20abcde 0.55±0.08bc 0.86±0.29bb 1.43±0.82bab 3.82±0.55abc

注：不同字母表示處理間差異達(dá)到5%顯著水平，上標(biāo)為橫向同指標(biāo)不同日期比較，下標(biāo)為縱向不同處理比較。

對于單株根干質(zhì)量，第1次采樣，處理A組N0.5%最高（151 g），隨著酰胺態(tài)氮濃度增大，A組根干質(zhì)量先減小再增大而后持平，濃度為N0.5%時最高，B組先增大后減小，濃度為N1.0%時最高，C組先增大后減小，對照根干質(zhì)量最高;第2次采樣，A組N1.0%最高（2.46 g），隨著處理濃度增大，A組根干質(zhì)量先增大再減小而后增大，濃度為N1.0%時最高，B組先增大再減小而后增大，濃度為N1.0%時最高，C組先增大再減小而后增大，對照根干質(zhì)量最高;第3次采樣，處理B組N0.5%最高（2.61 g），隨著處理濃度增大，A組根干質(zhì)量先增大再減小而后增大，濃度為N1.0%時最高，B組根干質(zhì)量先減小后增大而后減小，濃度為N0.5%時最高，C組先減小后增大，但均高于對照，濃度為N0.5%時最高;第4次采樣，處理B組N1.0%最高（774 g），隨著處理濃度增大，A組根干質(zhì)量先減小后增大，濃度為N2.0%時最高，B組根干質(zhì)量先增大后減小，濃度為N1.0%時最高，C組先增大后減小而后增大，濃度為N1.0%時最高。說明不同濃度酰胺態(tài)氮處理不同次數(shù)對菘藍(lán)地上部分和地下部分的影響不同，菘藍(lán)葉與根并不是在酰胺態(tài)氮濃度最大時干質(zhì)量最高，說明高濃度酰胺態(tài)氮不利于菘藍(lán)葉與根干質(zhì)量的積累，葉面噴施1次質(zhì)量濃度為10 g/L的酰胺態(tài)氮有利于菘藍(lán)葉干質(zhì)量的積累，葉面噴施2次質(zhì)量濃度為10 g/L的酰胺態(tài)氮有利于菘藍(lán)根干質(zhì)量的積累。

2.1.2 不同濃度酰胺態(tài)氮對菘藍(lán)生物量和根冠比的影響 不同濃度的酰胺態(tài)氮處理不同次數(shù)后，隨生長時間延長，菘藍(lán)植株總干質(zhì)量整體呈現(xiàn)增加的趨勢;同一采樣時期，不同濃度酰胺態(tài)氮對菘藍(lán)植株生長有不同的影響，A組隨著處理濃度增大，單株菘藍(lán)干質(zhì)量前3次采樣基本呈先增大后減小趨勢，第3次采樣呈增大趨勢，而B組、C組隨濃度的增大，單株菘藍(lán)干質(zhì)量均先增大后降低;處理間差異顯著（P<0.05）（表2）;第4次采樣，處理B組N1.0%（14.49 g）單株干質(zhì)量最大，顯著高于對照（P<0.05），說明葉面噴施2次10 g/L的酰胺態(tài)氮更有助于菘藍(lán)生物量的積累;不同濃度的酰胺態(tài)氮處理不同次數(shù)對菘藍(lán)不同采樣時期的根冠比影響不同（表2）;第1次采樣，除B組N2.0%、C組N1.5%，其他各處理均高于對照，隨著處理濃度增大，A組、C組根冠比呈降低的趨勢，高濃度N2.0%處理增大，B組根冠比先減小后增加，高濃度N2.0%處理下降低;第2次采樣，除B組N0.5%、C組N0.5%，其他各處理均高于或等于對照，隨著濃度增大，A組根冠比先增大后減小，高濃度N2.0%處理下增大，B組、C組根冠比先增大后減小，高濃度處理下N2.0%持平;第3次采樣，除A組N1.0%、B組N1.5%，其他各處理均低于對照，隨著濃度增大，A組根冠比先增大后減小，高濃度N2.0%處理下增大，B組根冠比先減小后增大，高濃度N2.0%處理下降低，C組根冠比先增大后減小，高濃度N2.0%處理下仍降低;第4次采樣，A組處理N0.5%高于對照，其他各處理均低于對照，B組各處理均高于對照，C組處理N1.5%低于對照，其他各處理均高于對照，A組、C組根冠比呈降低的趨勢，高濃度N2.0%處理下增大，B組根冠比先增大后減小，在高濃度處理下N2.0%增大。整體分析，酰胺態(tài)氮對菘藍(lán)生長前期對地上部分的促進(jìn)作用大于地下部分，后期則反之。

表2 不同濃度酰胺態(tài)氮對菘藍(lán)生物量和根冠比的影響

組別 質(zhì)量

濃度

單株總干質(zhì)量（g） 根冠比

10月6日 10月21日 11月5日 11月20日 10月6日 10月21日 11月5日 11月20日

A NCK 2.27±0.13bbcd 3.26±0.87bcdef 4.69±0.51abbcd 7.04±0.43agh 0.33±0.04abcd 0.18±0.06bc 0.28±0.10aab 0.31±0.07aabcd

N0.5% 2.65±0.52bab 2.27±0.37abef 3.01±0.54abgh 6.46±0.32ah 0.53±0.20aa 0.18±0.04bc 0.19±0.06bbcd 0.41±0.05aa

N1.0% 1.57±0.30bfgh 4.04±0.68babc 5.10±0.56bab 6.07±0.76ah 0.40±0.16aabcd 0.33±0.13aba 0.30±0.10aba 0.25±0.01bcd

N1.5% 2.13±0.37bcde 3.78±0.88babcd 3.72±0.50befgh 12.71±0.26abc 0.33±0.12acd 0.18±0.02bc 0.17±0.05bcd 0.22±0.04bd

N2.0% 1.11±0.23bh 3.17±0.43bcdef 3.93±0.80abdefg 13.38±0.34aab 0.51±0.12aab 0.24±0.05bbc 0.22±0.04babcd 0.25±0.08bcdendprint

B NCK 1.69±0.02befg 3.73±0.59babcd 4.61±0.29bbcde 9.90±0.72ae 0.32±0.10acd 0.21±0.08abc 0.22±0.15aabcd 0.24±0.11acd

N0.5% 2.39±0.05aabc 5.00±0.45aab 2.98±0.19agh 6.44±0.56ah 0.39±0.32aabcd 0.18±0.07ac 0.24±0.08aabc 0.25±0.08acd

N1.0% 2.17±0.46bbcde 4.02±0.81babc 6.02±0.19ba 14.79±0.57aa 0.33±0.08abbcd 0.26±0.06bab 0.18±0.05cbcd 0.36±0.08aab

N1.5% 1.92±0.21bcdef 2.54±0.46bdef 4.57±0.74bbcde 12.84±0.48abc 0.41±0.16aabcd 0.21±0.05bbc 0.21±0.04babcd 0.29±0.08bbcd

N2.0% 1.47±0.28cfgh 2.79±0.08bccdef 5.00±0.62bbc 11.08±0.62ad 0.27±0.05ad 0.21±0.06abbc 0.13±0.01bd 0.31±0.17abcd

C NCK 1.86±0.33bdef 5.13±1.04aba 2.92±0.80bh 8.34±0.53af 0.39±0.14aabcd 0.24±0.09abc 0.30±0.20aa 0.24±0.09acd

N0.5% 1.67±0.27befg 3.38±0.58bcdef 5.24±0.25bab 9.78±0.62ae 0.52±0.19aa 0.21±0.04bbc 0.25±0.08babc 0.30±0.05bbcd

N1.0% 2.87±0.52ba 2.64±0.25bcdef 4.57±0.10bbcde 14.04±1.22aa 0.41±0.15aabcd 0.25±0.06bbc 0.27±0.05bab 0.26±0.08bcd

N1.5% 2.39±0.05babd 1.99±0.30bf 3.51±0.10bfgh 7.93±0.77afg 0.33±0.15acd 0.22±0.05abbc 0.21±0.08babcd 0.22±0.04abd

N2.0% 1.19±0.12cgh 3.65±0.39bcbcde 4.11±0.36bcdef 8.86±0.93aef 0.48±0.07aabc 0.22±0.05cbc 0.19±0.08cbcd 0.34±0.08babc

注同表1。

2.2 不同濃度酰胺態(tài)氮對菘藍(lán)活性成分積累的影響

2.2.1 不同濃度酰胺態(tài)氮對菘藍(lán)葉內(nèi)靛藍(lán)與靛玉紅積累的影響 不同濃度的酰胺態(tài)氮處理不同次數(shù)后，隨生長時間延長，菘藍(lán)葉中靛藍(lán)與靛玉紅的含量整體上明顯呈下降趨勢（圖1、圖2）;不同酰胺態(tài)氮處理靛藍(lán)的含量在 0.067～0.313 mg/g之間，靛玉紅含量在0.035～0.572 mg/g之間。整體比較，第1次采樣菘藍(lán)葉片中的靛藍(lán)、靛玉紅含量已達(dá)或接近藥典的標(biāo)準(zhǔn)含量0.02%，第2次之后采樣，菘藍(lán)葉片內(nèi)靛藍(lán)、靛玉紅含量則低于藥典的標(biāo)準(zhǔn)含量002%，說明大青葉的采收最佳時期為10月上旬;靛藍(lán)含量最高的是第1次采樣處理2次的N0.5%（0.313 mg/g），說明葉面噴施2次5 g/L的酰胺態(tài)氮最有助于菘藍(lán)葉中靛藍(lán)的積累;靛玉紅含量最高的是第1次采樣處理C組N1.0%（0.572 mg/g），說明葉面噴施1次10 g/L的酰胺態(tài)氮有助于菘藍(lán)葉內(nèi)靛玉紅含量的積累。結(jié)合酰胺態(tài)氮對菘藍(lán)葉干質(zhì)量的影響，葉面噴施2次質(zhì)量濃度為15 g/L的酰胺態(tài)氮有助于獲得高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的大青葉。

2.2.2 不同濃度酰胺態(tài)氮對菘藍(lán)根中（R，S）-告依春的影響 不同濃度的酰胺態(tài)氮處理不同次數(shù)后，隨著菘藍(lán)生長時間的延長，菘藍(lán)根中（R，S）-告依春含量整體上明顯呈上升趨勢（圖3）;不同酰胺態(tài)氮處理的（R，S）-告依春含量在 0.266～2.056 mg/g之間，均已達(dá)藥典的標(biāo)準(zhǔn)含量0.02%，并且在后期采樣有增加的趨勢，說明板藍(lán)根的最佳采收時期為11月中下旬。（R，S）-告依春含量最高的是第4次采樣處理A組N1.0%（2.056 mg/g），說明葉面噴施3次質(zhì)量濃度為

10 g/L 的酰胺態(tài)氮有助于菘藍(lán)根中（R，S）-告依春含量的積累。結(jié)合酰胺態(tài)氮對菘藍(lán)根干質(zhì)量的影響，葉面噴施2次質(zhì)量度為 15 g/L 的酰胺態(tài)氮有助于獲得高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的板藍(lán)根。

3 討論

3.1 酰胺態(tài)氮對菘藍(lán)生長的影響

由于不同濃度的酰胺態(tài)氮對作物生長的營養(yǎng)供給不同，因而對作物的植株整體以及地上部分、地下部分的影響存在差異。研究結(jié)果顯示酰胺態(tài)氮對菘藍(lán)根與葉干質(zhì)量的影響不同，高濃度酰胺態(tài)氮不利于菘藍(lán)根與葉干質(zhì)量的積累;不同濃度酰胺態(tài)氮對菘藍(lán)植株單株總干質(zhì)量影響差異顯著，葉面噴施2次和1次酰胺態(tài)氮，隨著濃度的增大，單株菘藍(lán)干質(zhì)量先增大后降低或呈降低趨勢，這與樊新華等研究在低濃度范圍內(nèi)，隨著酰胺態(tài)氮施用量增加，豬毛菜的產(chǎn)量、氨基酸、維生素C含量均有不同程度的上升，達(dá)到一定施用量時則呈下降趨勢的結(jié)果[10]基本一致。而葉面噴施3次酰胺態(tài)氮，隨著酰胺態(tài)氮濃度的增大，單株菘藍(lán)干質(zhì)量前3次采樣基本呈先增大后降低的趨勢，第4次采樣呈增大趨勢，但整體低于葉面噴施2次和1次酰胺態(tài)氮，可能是葉面噴施多次酰胺態(tài)氮導(dǎo)致酰胺態(tài)氮過量積累，從而影響菘藍(lán)植株正常的氮代謝，使植株正常生長發(fā)育受阻，單株總干質(zhì)量下降，第4次采樣菘藍(lán)單株干質(zhì)量增大可能是在菘藍(lán)植株的生長過程中，多次噴施酰胺態(tài)氮導(dǎo)致菘藍(lán)部分葉片死亡，而再次生長的菘藍(lán)葉片內(nèi)酰胺態(tài)氮含量降低，使得菘藍(lán)植株正常生長。此外隨著酰胺態(tài)氮濃度的增大，菘藍(lán)根冠比呈降低的趨勢，說明葉面噴施酰胺態(tài)氮對菘藍(lán)地上葉片的促生長效應(yīng)更加明顯，對地下根的促進(jìn)作用小于對地上葉片的促進(jìn)作用，這與肖云華等研究追施氮肥對菘藍(lán)地上部的促進(jìn)效應(yīng)明顯高于地下部的結(jié)果[16]基本一致。隨著菘藍(lán)生長時間的延長，根冠比也有降低的趨勢，說明葉面噴施酰胺態(tài)氮前期更有助于促進(jìn)菘藍(lán)地上部分的生長，后期則更利于促進(jìn)根的生長。endprint

3.2 酰胺態(tài)氮對菘藍(lán)體內(nèi)活性成分積累的影響

酰胺態(tài)氮對菘藍(lán)葉中靛藍(lán)、靛玉紅和根中（R，S）-告依春含量的動態(tài)積累影響不一致。菘藍(lán)葉中靛藍(lán)、靛玉紅含量在10月上旬達(dá)最大，如以靛藍(lán)、靛玉紅為藥用指標(biāo)成分，則大青葉的采收可在10月上旬，這與陳宇航等的研究結(jié)果[17]基本一致。處理后菘藍(lán)根中（R，S）-告依春含量在11月下旬達(dá)最大，如以（R，S）-告依春為藥用指標(biāo)成分，則板藍(lán)根的收獲可在11月下旬進(jìn)行，與陳宇航等的研究結(jié)果[17]基本一致，同時與《中國藥典》（2010年版）對板藍(lán)根采收期規(guī)定基本一致。此外葉面噴施2次質(zhì)量濃度為5 g/L的酰胺態(tài)氮有助于葉中靛藍(lán)的積累，而葉面噴施1次質(zhì)量濃度為10 g/L的酰胺態(tài)氮有助于葉內(nèi)靛玉紅含量的積累，結(jié)合酰胺態(tài)氮對菘藍(lán)葉干質(zhì)量的影響，葉面噴施2次質(zhì)量濃度為15 g/L的酰胺態(tài)氮有助于獲得高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的大青葉。葉面噴施3次質(zhì)量濃度為10 g/L的酰胺態(tài)氮有助于根中（R，S）-告依春含量的積累;盡管多次噴施酰胺態(tài)氮有助于菘藍(lán)根中（R，S）-告依春含量的積累，但過量酰胺態(tài)氮積累不利于菘藍(lán)植株根干質(zhì)量的積累，因此為獲得高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的板藍(lán)根，建議葉面噴施2次質(zhì)量濃度為15 g/L的酰胺態(tài)氮。因此為提高菘藍(lán)的產(chǎn)量和品質(zhì)，合理施用有機(jī)氮肥，建議在菘藍(lán)生長約110 d后葉面噴施2次質(zhì)量濃度為15 g/L的酰胺態(tài)氮，間隔30 d處理。

菘藍(lán)葉中的靛藍(lán)、靛玉紅與根中的（R，S）-告依春是生長過程中的次生代謝產(chǎn)物，植物次生代謝的正常進(jìn)行是藥材質(zhì)量的保證及臨床用藥有效性的基礎(chǔ)，而植物的氮代謝和氮積累勢必影響植物的次生代謝，因此酰胺態(tài)氮對菘藍(lán)次生代謝影響的具體機(jī)制還有待于進(jìn)一步研究。

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