李佳+袁洪水+王偉+郝志敏+朱寶成

摘要：利用前期試驗(yàn)成果制備的脫酚棉籽餅粉飼料產(chǎn)品，采用國(guó)標(biāo)法測(cè)定其棉酚含量，并考察其在肉鵝飼養(yǎng)過程中的應(yīng)用效果。試驗(yàn)結(jié)果表明：本實(shí)驗(yàn)室制備的脫酚棉籽餅粉飼料中棉酚殘存量低于10 mg/kg，符合我國(guó)規(guī)定的安全標(biāo)準(zhǔn)。以之代替常規(guī)飼料對(duì)肉鵝進(jìn)行飼喂，所飼肉鵝與對(duì)照組相比，其生長(zhǎng)發(fā)育、器官發(fā)育、血液指標(biāo)等均未發(fā)現(xiàn)異常，說明采用本實(shí)驗(yàn)室制備的脫酚棉籽餅粉飼料飼喂肉鵝并未發(fā)現(xiàn)棉酚中毒現(xiàn)象。上述結(jié)果初步認(rèn)定該飼料脫酚效果良好，符合應(yīng)用于肉鵝養(yǎng)殖的飼用安全標(biāo)準(zhǔn)。

關(guān)鍵詞：棉籽餅;游離棉酚;脫毒;飼料;肉鵝

中圖分類號(hào)： S816.43 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

文章編號(hào)：1002-1302（2015）04-0217-03

收稿日期：2014-06-09

基金項(xiàng)目：保定市科學(xué)研究與發(fā)展計(jì)劃（編號(hào)：12ZN003、13ZN028）。

作者簡(jiǎn)介：李 佳（1982—），女，山西山陰人，碩士，講師，研究方向?yàn)檗r(nóng)牧微生物學(xué)。E-mail：qilan82@126.com。

通信作者：朱寶成，教授，博士生導(dǎo)師，主要從事農(nóng)牧微生物學(xué)研究。E-mail：zhu2222@126.com。

鵝是一種經(jīng)濟(jì)價(jià)值很高的食草水禽，耐粗飼，適應(yīng)性強(qiáng)，生長(zhǎng)快，飼料報(bào)酬率高。通常，農(nóng)民養(yǎng)1羽肉用仔鵝可盈利 10～15元[1]。因此，肉鵝養(yǎng)殖作為一項(xiàng)投入少、產(chǎn)出多、效益好、產(chǎn)品綠色、安全的致富項(xiàng)目，近年來在我國(guó)發(fā)展迅速，目前我國(guó)已成為世界上養(yǎng)鵝最多的國(guó)家之一。 然而，隨著我國(guó)畜牧業(yè)的發(fā)展，蛋白質(zhì)飼料資源不足的問題日益突出。利用各種餅粕類物質(zhì)代替原有蛋白質(zhì)飼料資源，成為新的畜牧業(yè)飼料蛋白質(zhì)來源逐漸成為解決上述問題的理想方法[2]。其中棉籽餅因其所含氨基酸種類豐富、比例合理而成為目前的研究熱點(diǎn)之一[3-4]，然而棉籽餅中含有具有毒性的游離棉酚，制約了其在畜牧業(yè)中的應(yīng)用[5]。 生物發(fā)酵法因其在脫毒的同時(shí)還可提高棉籽餅營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和適口性，被普遍認(rèn)為是目前成本較低、效果較好的脫毒方法[6-8]。在前期研究中，我們已成功制備棉籽餅粉脫毒飼料產(chǎn)品，在本試驗(yàn)中我們將研究該產(chǎn)品在肉鵝飼養(yǎng)過程中的實(shí)際應(yīng)用效果，旨在為棉籽餅這一豐富優(yōu)質(zhì)的蛋白資源能早日高效安全地應(yīng)用于肉鵝養(yǎng)殖業(yè)生產(chǎn)中提供參考。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 菌種來源 本課題組篩選得到的枯草芽孢菌（Bacillus subtilis）菌株L-9和酵母菌（Saccharomyces cerevisiae）菌株C-4。

1.1.2 棉籽餅粉來源 普通壓榨棉籽油餅：購(gòu)自河北省保定市某榨油廠。棉籽餅粉：由上述棉籽油餅粉碎加工成為粒度為10～12目的顆粒，酚含量約為2 200 mg/kg。

1.1.3 試驗(yàn)動(dòng)物 肉鵝：孵化5 d的獅頭鵝鵝苗，購(gòu)自河北省保定市某孵化場(chǎng)。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 棉籽餅脫酚飼料產(chǎn)品的制備 在經(jīng)粉碎、過篩等工序加工成的棉籽餅粉中加入3%的蔗糖，按1 ∶ 0.7的料水比加水充分?jǐn)嚢杈鶆?，混入菌粉，酵母菌菌株C-4與芽胞桿菌菌株L-9的比例為1 ∶ 3，物料充分?jǐn)嚢?。常溫發(fā)酵15 d。

1.2.2 脫酚棉籽餅飼料棉酚殘余量的測(cè)定 取發(fā)酵前后的飼料樣品，采用國(guó)標(biāo)法測(cè)定其中棉酚含量。

1.2.3 肉鵝飼喂試驗(yàn) （1）雛鵝的選擇與分組：選擇5日齡體重相近的健康雛鵝120羽。按每小組20羽，公母各半，隨機(jī)分組，每3組組成個(gè)大組，即設(shè)3個(gè)平行。第一大組為試驗(yàn)組，第二大組為對(duì)照組。試驗(yàn)組飼料：發(fā)酵棉籽餅粉飼料與常規(guī)飼料比例為2 ∶ 3;對(duì)照組飼喂常規(guī)飼料。

（2）飼喂期管理：預(yù)飼期為5 d，飼喂期為75 d。預(yù)飼期各組雛鵝均飼喂常規(guī)飼料，使試驗(yàn)雛鵝適應(yīng)環(huán)境。日常管理則按照農(nóng)場(chǎng)常規(guī)管理模式對(duì)試驗(yàn)雛鵝進(jìn)行管理[9-10]。

（3）測(cè)定指標(biāo)。分別對(duì)不同組所飼肉鵝的生長(zhǎng)性能指標(biāo)、內(nèi)臟發(fā)育指標(biāo)、血液指標(biāo)和飼料中粗蛋白質(zhì)與粗脂肪等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率進(jìn)行測(cè)定。生長(zhǎng)性能指標(biāo)：在飼喂期記錄各組飼料消耗量，每5 d對(duì)各組肉鵝早晨空腹體質(zhì)量分別進(jìn)行測(cè)定，觀察各組肉鵝生長(zhǎng)發(fā)育情況。內(nèi)臟發(fā)育指標(biāo)：飼喂期結(jié)束時(shí)在每小組肉鵝中選擇3羽進(jìn)行內(nèi)臟發(fā)育指標(biāo)測(cè)定，所選肉鵝要求禁食12 h以上，保證飲水。之后稱體質(zhì)量、編號(hào)并屠宰取其心臟、肝臟和脾臟稱質(zhì)量，觀察其色澤、縱切剖面。血液指標(biāo)：飼喂期結(jié)束時(shí)在每小組肉鵝中選擇3羽分別取血清、血漿，測(cè)定相應(yīng)指標(biāo)。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)利用率：飼喂期結(jié)束時(shí)取各組鵝糞便，測(cè)定粗蛋白質(zhì)與粗脂肪含量，計(jì)算利用率。

2 結(jié)果與分析

2.1 脫酚棉籽餅飼料的棉酚殘余量

經(jīng)測(cè)定，其中游離棉酚的含量降至9.63 mg/kg（表1），達(dá)到我國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》（GB 13078—2001）的相關(guān)規(guī)定：飼料原料棉籽餅中游離棉酚含量≤1 200 mg/kg;家禽配合飼料中游離棉酚標(biāo)準(zhǔn)為≤100 mg/kg。脫酚后的棉籽餅粉飼料無味道和顏色的變化，且餅粕質(zhì)地松軟，與原始餅粕相比，棉籽餅的質(zhì)量明顯提高，可作為一種優(yōu)良的蛋白質(zhì)飼料原料。

2.2 所飼肉鵝的各項(xiàng)指標(biāo)測(cè)定與分析

2.2.1 生長(zhǎng)性能指標(biāo) 經(jīng)過75 d的飼喂，試驗(yàn)組與對(duì)照組肉鵝生長(zhǎng)狀態(tài)均良好，體質(zhì)量增幅非常相近，沒有明顯差異（圖1）。由此可見，常規(guī)飼料相比，我們所研制的棉籽餅粉脫

表1 發(fā)酵前后棉籽餅的棉酚含量

時(shí)間 棉酚含量（mg/kg）

發(fā)酵前 1 348

發(fā)酵10 d后 9.63

酚飼料對(duì)肉鵝體質(zhì)量并未見副作用。

另外，試驗(yàn)組肉鵝料肉比也低于對(duì)照組，且脫酚棉籽餅粉成本低于常規(guī)肉鵝飼料成本，蛋白質(zhì)含量則約為常規(guī)飼料的13倍（表2）。因此，以脫酚棉籽餅粉飼料代替部分常規(guī)飼料飼喂肉鵝，可在保證肉鵝正常生長(zhǎng)發(fā)育的基礎(chǔ)上，為廣大養(yǎng)殖農(nóng)戶節(jié)約成本，創(chuàng)造效益。endprint

表2 肉鵝的生產(chǎn)性能指標(biāo)

組別 平均初質(zhì)量

（g） 平均末質(zhì)量

（g） 增質(zhì)量

（g） 常規(guī)飼料消耗量

（g） 棉籽餅發(fā)酵

飼料消耗量（g） 常規(guī)飼料日

消耗量（g） 棉籽餅發(fā)酵

飼料日消耗量（g） 料肉比

試驗(yàn)組 108 5 939 5 831 14 533 4 968 193.77 66.25 3.3

對(duì)照組 109 5 922 5 813 22 090 0 294.53 0 3.8

2.2.2 內(nèi)臟發(fā)育指標(biāo) 家禽或家畜攝入過量棉酚通常會(huì)影響到其臟器發(fā)育，會(huì)造成心、肝、脾等臟器發(fā)育不良或異常腫大。因此，比較試驗(yàn)組與對(duì)照組動(dòng)物臟器發(fā)育相關(guān)指標(biāo)，可以從一個(gè)方面反映出試驗(yàn)動(dòng)物中毒與否。從表3數(shù)據(jù)可以看出，試驗(yàn)組肉鵝的心、肝、脾等內(nèi)臟發(fā)育正常，未表現(xiàn)出發(fā)育不良或異常腫大等現(xiàn)象，說明我們所研制的棉籽餅粉脫酚飼料對(duì)肉鵝內(nèi)臟發(fā)育沒有副作用。

表3 肉鵝內(nèi)臟發(fā)育指標(biāo)

組別 總質(zhì)量

凈膛質(zhì)量 心臟 脾臟 肝臟 腎臟 胰臟

質(zhì)量

（g） 占總質(zhì)量

（%） 質(zhì)量

（g） 占總質(zhì)量

（%） 質(zhì)量

（g） 占總質(zhì)量

（%） 質(zhì)量

（g） 占總質(zhì)量

（%） 質(zhì)量

（g） 占總質(zhì)量

（%） 質(zhì)量

（g） 占總質(zhì)量

（%）

對(duì)照組 5 930 4 186 70.59 45.66 0.77 7.71 0.13 175.53 2.96 0.26 0.004 4 28.46 0.48

試驗(yàn)組 5 950 4 570 76.81 52.36 0.88 8.33 0.14 179.69 3.02 0.27 0.004 5 30.35 0.51

2.2.3 血液指標(biāo) 過量攝入棉酚可使家禽白細(xì)胞和紅細(xì)胞受到損害，進(jìn)而使血紅蛋白和紅細(xì)胞及血漿蛋白降低，過量攝入棉酚亦可因之與肉鵝體內(nèi)蛋白質(zhì)、鐵等結(jié)合引起酶失活，造成缺鐵性貧血。同時(shí)，棉酚中毒造成臟器發(fā)育異常會(huì)反映在血液指標(biāo)中，造成相應(yīng)指標(biāo)的異常。由表4、表5可知，與對(duì)照組肉鵝相比，試驗(yàn)組肉鵝相關(guān)血液指標(biāo)均屬正常，說明我們所研制的棉籽餅粉脫酚飼料對(duì)肉鵝健康沒有產(chǎn)生副作用。

2.2.4 飼料利用率測(cè)定 飼料中棉酚含量超標(biāo)會(huì)降低飼料蛋白質(zhì)的利用率，這是由于游離棉酚的酚基或酚基氧化產(chǎn)物醌基可以和飼料中蛋白氨基酸殘基的活性基團(tuán)結(jié)合生成不溶性復(fù)合物，還可以與消化道中的蛋白質(zhì)水解酶結(jié)合，抑制其活性。因此，肉鵝對(duì)飼料營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)利用情況也是反映其中毒與

表4 肉鵝血液指標(biāo)

組別 白細(xì)胞

計(jì)數(shù)

（×1012/L） 紅細(xì)胞

計(jì)數(shù)

（×1012/L） 血紅蛋白

濃度

（g/L） 紅細(xì)胞

壓積

（%） 平均紅細(xì)胞

體積

（fL） 平均紅細(xì)胞

血紅蛋白

含量（pg） 平均紅細(xì)胞

血紅蛋白

濃度（g/L） 血小板

計(jì)數(shù)

（×109/L） 紅細(xì)胞

分布寬度

（fL） 紅細(xì)胞寬度

變異系數(shù)

對(duì)照組 261.43 1.66 79.4 0.26 158.44 47.64 300.4 1.3 69.74 0.11

試驗(yàn)組 261.53 1.85 82.4 0.30 163.84 44.34 271.4 1.3 88.34 0.13

表5 發(fā)酵棉籽餅粉飼料對(duì)肉鵝肝腎等臟器功能的影響

組別 谷丙轉(zhuǎn)氨酶

GPT

（U/L） 天冬氨酸

氨基轉(zhuǎn)移酶 乳酸脫

氫酶

（U/L） 總膽紅素

TBIL

（μmol/L） 直接膽紅素

DBIL

（μmol/L） 間接膽紅

素IBIL

（Umol/L） 總蛋白

TP（g/L） 白蛋白

ALB

（g/L） 球蛋白

GLOB

（g/L） 白球比

（ALB/GLB）

對(duì)照組 18.1 40 1 580.3 10 6 4 42.3 11.9 30.4 0.39

試驗(yàn)組 19.2 43 1 562.9 10 6 4 41.6 11.7 29.9 0.39

對(duì)應(yīng)異常內(nèi)臟

心、肝

心、肝、腎

心、肝、腎

肝、貧血

肝、貧血

肝、貧血

骨髓、肝、腎

肝、腎

肝、免疫

淋巴系統(tǒng) 肝、免疫

淋巴系統(tǒng)

否的一個(gè)指標(biāo)，本試驗(yàn)中，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組肉鵝對(duì)飼料營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)利用情況良好，并未發(fā)現(xiàn)包括蛋白質(zhì)在內(nèi)的各種主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率出現(xiàn)異常（表6）。

表6 糞便中殘存營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量的測(cè)定

%

組別 淀粉含量 粗脂肪含量 粗蛋白質(zhì)含量

對(duì)照組 0.79 3.1 18.9

試驗(yàn)組 0.73 3.3 17.3endprint

根據(jù)以上試驗(yàn)數(shù)據(jù)可知，我們研制的脫酚棉籽餅粉飼料成本低于常規(guī)肉鵝飼料，蛋白質(zhì)含量則高于常規(guī)飼料。與對(duì)照組肉鵝相比，試驗(yàn)組肉鵝的生長(zhǎng)發(fā)育、主要臟器發(fā)育、相應(yīng)血液指標(biāo)及飼料利用情況均未發(fā)現(xiàn)異常，即未發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)組肉鵝出現(xiàn)棉酚中毒現(xiàn)象。因此，我們研制的脫酚棉籽餅粉飼料代替常規(guī)飼料對(duì)肉鵝進(jìn)行飼喂，不僅安全，而且經(jīng)濟(jì)。

3 討論

生物發(fā)酵脫毒法是目前棉籽餅脫毒處理的熱門方法之一，在脫毒的同時(shí)，還具備以下優(yōu)點(diǎn)：一是通過微生物菌株合成菌體蛋白，以提高飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、增加適口性。另外，因發(fā)酵產(chǎn)生的大量生物酶，可提高禽畜對(duì)飼料中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收率[7-8，11-13]。

本實(shí)驗(yàn)室選擇枯草芽孢桿菌菌株L-9和釀酒酵母菌株C-4作為脫毒菌株，一方面因上述菌株均屬于2003年我國(guó)農(nóng)業(yè)部公布的能夠用于生產(chǎn)微生態(tài)制劑的菌種，保證了菌株安全性;另一方面，芽孢桿菌和酵母菌在菌劑工業(yè)化生產(chǎn)可行性方面具有一定優(yōu)勢(shì)。通過上述菌株制備的棉粕脫毒飼料產(chǎn)品棉酚殘存量低于10 mg/kg，符合我國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》（GB 13078—2001）的相關(guān)規(guī)定：飼料原料棉籽餅中游離棉酚含量≤1 200 mg/kg;家禽配合飼料中游離棉酚標(biāo)準(zhǔn)為≤100 mg/kg。

鵝是一種草食性家禽，生活力強(qiáng)，早期生長(zhǎng)快，耐粗飼，消化率高，能消化粗飼料中的纖維成分，充分利用青粗飼料。養(yǎng)鵝產(chǎn)業(yè)耗料省、投資少、周轉(zhuǎn)快、風(fēng)險(xiǎn)小且效益高，是我國(guó)農(nóng)民增加收入的支柱性產(chǎn)業(yè)之一[1，14]。將棉籽餅等榨油工業(yè)副產(chǎn)物制成的成本較低、蛋白及氨基酸等營(yíng)養(yǎng)成分豐富的飼料利用于養(yǎng)鵝產(chǎn)業(yè)中，可進(jìn)一步降低其養(yǎng)殖成本，為我國(guó)農(nóng)民增加收益。

通常，肉鵝等家禽棉酚中毒的影響主要表現(xiàn)在對(duì)其生長(zhǎng)發(fā)育、器官發(fā)育、血液指標(biāo)及飼料中營(yíng)養(yǎng)成分利用率等4個(gè)方面[15-17]。本研究通過對(duì)試驗(yàn)組及對(duì)照組肉鵝生長(zhǎng)發(fā)育情況、器官發(fā)育情況、血液指標(biāo)、飼料中營(yíng)養(yǎng)成分利用情況4個(gè)方面的比較，證實(shí)以我們制備的棉籽餅發(fā)酵脫毒飼料對(duì)肉鵝進(jìn)行飼喂，不會(huì)引起肉鵝棉酚中毒，說明我們研制的棉籽餅發(fā)酵脫毒飼料用于肉鵝養(yǎng)殖可行、安全且經(jīng)濟(jì)，在養(yǎng)鵝產(chǎn)業(yè)中具有良好的市場(chǎng)前景。

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