孟建玉+張長(zhǎng)禹+陸寧+商勝華

摘要：采用浸漬法測(cè)定了貴州省9個(gè)地區(qū)34個(gè)縣市的煙蚜種群對(duì)吡蟲(chóng)啉的抗藥性。結(jié)果表明，9個(gè)地區(qū)的煙蚜對(duì)吡蟲(chóng)啉的平均抗性倍數(shù)在2.03～9.29之間;銅仁和畢節(jié)2個(gè)地區(qū)煙蚜對(duì)吡蟲(chóng)啉的平均抗性達(dá)到低抗水平，安順、遵義、六盤水、黔西南和黔南5個(gè)地區(qū)的煙蚜對(duì)該藥處于敏感性下降階段，黔東南和貴陽(yáng)2個(gè)地區(qū)煙蚜的平均抗性仍處于敏感水平;34個(gè)縣市中，煙蚜對(duì)吡蟲(chóng)啉的抗性倍數(shù)分布在1.61～12.77之間，銅仁地區(qū)的松桃縣、畢節(jié)地區(qū)的赫章縣和威寧縣的煙蚜種群對(duì)吡蟲(chóng)啉達(dá)到中抗水平，德江、石阡、思南、金沙、黔西、西秀、鳳岡、安龍、貴定和凱里10個(gè)縣市的煙蚜種群對(duì)吡蟲(chóng)啉達(dá)到低抗水平，其余縣市的煙蚜處于敏感或敏感下降水平。

關(guān)鍵詞：煙蚜;吡蟲(chóng)啉;抗藥性;貴州;浸漬法

中圖分類號(hào)： S482.3 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

文章編號(hào)：1002-1302（2015）04-0162-02

收稿日期：2014-05-20

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金（編號(hào)：31460483）;貴州省科學(xué)技術(shù)基金（編號(hào)：黔科合J字[2011]2336號(hào)、黔科合J字[2011]2135號(hào)）;貴州省煙草公司科技計(jì)劃（編號(hào)：200916、201022）。

作者簡(jiǎn)介：孟建玉（1981—），女，山西懷仁人，博士，副研究員，主要從事煙草植物保護(hù)研究。Tel：（0851）4116972;E-mail：mengjy0417@163.com。

通信作者：商勝華，副研究員，主要從事煙草植物保護(hù)研究。Tel：（0851）4116929;E-mail：ssh6688@sina.com。

煙蚜[Myzus persicae （Sulzer）]別稱桃蚜，屬同翅目蚜科，是危害煙草最嚴(yán)重的害蟲(chóng)之一，在全國(guó)各煙區(qū)均有發(fā)生。煙蚜不僅吸食植株汁液造成煙葉產(chǎn)量和品質(zhì)下降，還可傳播多種植物病毒病，如馬鈴薯Y病毒、黃瓜花葉病毒、煙草蝕紋病毒、煙草線條病毒等，常常造成農(nóng)作物大面積絕收[1-3]。由于煙蚜寄主范圍十分廣泛，可在多種植物上轉(zhuǎn)移危害，長(zhǎng)期以來(lái)化學(xué)農(nóng)藥一直是控制煙蚜及其傳播病毒病的主要手段[4-5]。

吡蟲(chóng)啉是近年來(lái)發(fā)展最快的新煙堿類殺蟲(chóng)劑，又稱為氯化煙堿類殺蟲(chóng)劑[6]，因其具有超高效、速效和長(zhǎng)效兼?zhèn)涞忍攸c(diǎn)，已迅速成為防治煙蚜的首選農(nóng)藥品種[7-8]。然而，與其他常規(guī)殺蟲(chóng)劑類似，在生產(chǎn)中存在吡蟲(chóng)啉的過(guò)量使用問(wèn)題，長(zhǎng)此以往勢(shì)必會(huì)因?yàn)楦哌x擇壓而使害蟲(chóng)產(chǎn)生抗性問(wèn)題[3，9-10]。目前煙蚜的抗性問(wèn)題因其日趨突出和嚴(yán)重已引起世界各地研究者的關(guān)注[11]。貴州是我國(guó)重要的煙葉產(chǎn)地，煙蚜發(fā)生一直比較嚴(yán)重，是造成煙葉生產(chǎn)損失的首要害蟲(chóng)。在貴州，吡蟲(chóng)啉已使用多年，一旦煙蚜普遍對(duì)吡蟲(chóng)啉產(chǎn)生抗性，將對(duì)煙葉產(chǎn)業(yè)造成嚴(yán)重影響。目前關(guān)于貴州全省煙蚜對(duì)吡蟲(chóng)啉的抗性水平尚未明確，為此，本研究檢測(cè)了覆蓋貴州省9個(gè)地州市34個(gè)煙葉主產(chǎn)縣市的煙蚜種群對(duì)吡蟲(chóng)啉的抗性水平，以期為指導(dǎo)煙蚜的防治及田間抗藥性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

供試?yán)ハx(chóng)：敏感種群采自貴州省煙草科學(xué)研究院福泉試驗(yàn)基地的煙株上，在室內(nèi)以不接觸任何藥劑的情況下用盆栽煙株進(jìn)行飼養(yǎng)繁殖，通過(guò)連續(xù)飼養(yǎng)3年以上獲得煙蚜的相對(duì)敏感品系;田間種群采自貴州銅仁、畢節(jié)、安順、遵義、六盤水、黔西南、黔南、黔東南、貴陽(yáng)9個(gè)地州市34個(gè)縣市的煙田，飼養(yǎng)1代后進(jìn)行試驗(yàn)。

供試藥劑：95%吡蟲(chóng)啉原藥，由江蘇克勝股份有限公司生產(chǎn)。供試原藥以丙酮為溶劑配制成濃度為10 000 mg/L的母液備用。

1.2 方法

采用聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織推薦的浸漬法進(jìn)行毒力測(cè)定[12-13]。根據(jù)預(yù)備試驗(yàn)，將供試藥劑稀釋成5個(gè)濃度梯度，將有一定數(shù)量煙蚜的煙葉放入配制好的藥液中浸泡10 s，取出后迅速用吸水紙將煙葉上的藥液吸干，并用細(xì)毛筆挑取個(gè)體均一的無(wú)翅成蚜30頭，放在未接觸過(guò)殺蟲(chóng)劑的煙葉背面，置于直徑為15 cm的鋪有濕濾紙的培養(yǎng)皿中。每處理重復(fù)3次，蒸餾水為對(duì)照。24 h后檢查死亡蟲(chóng)數(shù)，以細(xì)毛筆輕輕觸動(dòng)蟲(chóng)體，完全不動(dòng)者視為死亡。根據(jù)實(shí)際死亡率，用Abbott公式計(jì)算校正死亡率，按Finney概率分析法用DPS統(tǒng)計(jì)軟件求毒力回歸方程、致死中濃度（LC50）、置信限及抗性倍數(shù)。抗性倍數(shù)=田間種群LC50/敏感種群LC50[14]。按照我國(guó)對(duì)棉蚜的抗性程度分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)田間煙蚜種群進(jìn)行抗性分級(jí)[15]：抗性倍數(shù) ≤3.0 為敏感，3.1～5.0為敏感性下降，5.1～10.0為低抗，101～40.0為中抗，40.1～160.0為高抗，大于160.0為極高抗。

2 結(jié)果與分析

2.1 煙蚜對(duì)吡蟲(chóng)啉的敏感性

煙蚜敏感品系的建立是抗藥性研究的重要試驗(yàn)材料，其毒力基線是評(píng)價(jià)田間煙蚜種群對(duì)殺蟲(chóng)劑抗性水平的重要依據(jù)。通過(guò)吡蟲(chóng)啉對(duì)煙蚜相對(duì)敏感品系的毒力測(cè)定，得到吡蟲(chóng)啉的毒力方程和致死中濃度（LC50）。從表1可以看出，吡蟲(chóng)啉對(duì)煙蚜相對(duì)敏感品系種群的LC50為15.19 mg/L。

貴州省9個(gè)地區(qū)34個(gè)縣市的煙蚜種群對(duì)吡蟲(chóng)啉的敏感性差異很大，LC50值在24.51～194.03 mg/L之間，最大LC50值和最小LC50值之間相差7.92倍，其中，鎮(zhèn)遠(yuǎn)煙蚜對(duì)吡蟲(chóng)啉的敏感性最高，松桃煙蚜的敏感性最低。在銅仁、畢節(jié)、安順、遵義、六盤水、黔西南、黔南和黔東南8個(gè)地區(qū)，敏感性最高的分別來(lái)自思南、大方、紫云、余慶、盤縣、興義、長(zhǎng)順和鎮(zhèn)遠(yuǎn)縣，LC50分別為105.36、55.89、29.93、29.11、37.91、29.98、3007、24.51 mg/L，敏感性最低的分別來(lái)自松桃、赫章、西秀、鳳岡、水城、安龍、貴定和凱里縣，LC50分別為194.03、183.05、93.47、87.33、76.09、118.68、81.12、85.75 mg/L，貴陽(yáng)地區(qū)清鎮(zhèn)市煙蚜種群的LC50為30.78 mg/L（表1）。endprint

表1 貴州省主要煙區(qū)煙蚜對(duì)吡蟲(chóng)啉的抗性

地區(qū) 種群 斜率±標(biāo)準(zhǔn)誤 LC50及其95%置信限

（mg/L） 抗性

倍數(shù)

敏感 1.63 ± 0.06 15.19（11.66～19.79） 1.00

銅仁 松桃 0.46 ± 0.26 194.03（58.78～640.44） 12.77

德江 0.46 ± 0.23 150.93（53.57～425.20） 9.93

石阡 0.49 ± 0.20 114.42（47.28～276.88） 7.53

思南 0.60 ± 0.12 105.36（61.54～180.38） 6.93

畢節(jié) 赫章 0.91 ± 0.08 183.05（126.62～264.62） 12.05

威寧 0.60 ± 0.11 155.59（96.28～251.45） 10.24

金沙 1.21 ± 0.05 103.62（81.38～131.94） 6.82

黔西 1.06 ± 0.06 93.22（71.95～120.79） 6.14

畢節(jié) 1.52 ± 0.05 58.38（45.80～74.42） 3.84

大方 1.71 ± 0.04 55.89（46.33～67.42） 3.68

安順 西秀 0.70 ± 0.09 93.47（63.11～138.42） 6.15

紫云 1.40 ± 0.09 29.93（20.08～44.63） 1.97

遵義 鳳岡 1.20 ± 0.05 87.33（69.19～110.23） 5.75

務(wù)川 1.27 ± 0.05 76.01（60.99～94.71） 5.00

湄潭 1.47 ± 0.05 64.39（52.34～79.21） 4.24

道真 1.06 ± 0.06 54.62（41.00～72.78） 3.60

遵義 1.78 ± 0.06 47.26（35.31～63.25） 3.11

余慶 1.53 ± 0.08 29.11（20.25～41.84） 1.92

六盤水 水城 0.59 ± 0.13 76.09（42.53～136.13） 5.01

盤縣 1.49 ± 0.06 37.91（29.49～48.73） 2.49

黔西南 安龍 1.01 ± 0.06 118.68（90.66～155.37） 7.81

貞豐 0.95 ± 0.08 43.33（30.21～62.15） 2.85

興仁 1.57 ± 0.06 34.53（25.95～45.94） 2.27

興義 1.33 ± 0.07 29.98（21.74～41.33） 1.97

黔南 貴定 1.05 ± 0.06 81.12（62.93～104.58） 5.34

平塘 0.63 ± 0.11 49.43（29.81～81.97） 3.25

福泉 1.39 ± 0.05 45.91（35.97～58.60） 3.02

甕安 1.67 ± 0.07 40.59（29.12～56.56） 2.67

長(zhǎng)順 1.86 ± 0.06 30.07（23.32～38.76） 1.98

黔東南 凱里 1.01 ± 0.06 85.75（65.09～112.96） 5.64

天柱 1.61 ± 0.06 30.82（23.36～40.66） 2.03

施秉 1.34 ± 0.08 26.15（18.14～37.72） 1.72

鎮(zhèn)遠(yuǎn) 1.58 ± 0.09 24.51（16.63～36.14） 1.61

貴陽(yáng) 清鎮(zhèn) 1.64 ± 0.06 30.78（23.80～39.80） 2.03

2.2 煙蚜對(duì)吡蟲(chóng)啉的抗性水平

9個(gè)地區(qū)的煙蚜對(duì)吡蟲(chóng)啉的平均抗性倍數(shù)在2.03～9.29之間，平均抗性最高的為銅仁地區(qū)，最低的為貴陽(yáng)地區(qū)，其中，銅仁和畢節(jié)2個(gè)地區(qū)的煙蚜種群對(duì)吡蟲(chóng)啉的平均抗性達(dá)到低抗水平，安順、遵義、六盤水、黔西南和黔南5個(gè)地區(qū)的煙蚜種群對(duì)該藥處于敏感性下降階段，黔東南和貴陽(yáng)2個(gè)地區(qū)煙蚜種群的平均抗性仍處于敏感水平（圖1）。34個(gè)縣市的煙蚜種群中，抗性倍數(shù)最高為12.77，最低為1.61，其中，松桃、赫章和威寧3個(gè)縣市的煙蚜對(duì)吡蟲(chóng)啉達(dá)到中抗水平，抗性倍數(shù)分別達(dá)到12.77、12.05和10.24;德江、石阡、思南、金沙、黔西、西秀、鳳岡、安龍、貴定和凱里10個(gè)縣市的煙蚜處于低抗水平，抗性倍數(shù)分別為9.93、7.53、6.93、6.82、6.14、6.15、5.75、7.81、5.34和5.64;其余縣市的煙蚜處于敏感或敏感下降水平（表1）。

3 結(jié)論與討論

吡蟲(chóng)啉屬于硝基亞甲基類化合物，是一種新型的高效內(nèi)吸性殺蟲(chóng)劑，同時(shí)兼有觸殺和胃毒作用[16]。在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上，吡蟲(chóng)啉主要防治同翅目害蟲(chóng)，因其具有超高效、速效和長(zhǎng)效兼?zhèn)涞忍攸c(diǎn)，已迅速成為防治煙蚜的主要農(nóng)藥品種[7-8]。隨著吡蟲(chóng)啉的大量使用，其害蟲(chóng)抗性已成為生產(chǎn)上不容忽視的問(wèn)題。在我國(guó)，局部地區(qū)煙蚜已對(duì)吡蟲(chóng)啉產(chǎn)生了抗性，如云南、河南、山東、福建等地，且在連續(xù)應(yīng)用后，抗性發(fā)展迅速[4-5，17-18]。本研究結(jié)果表明，貴州省9個(gè)地區(qū)34個(gè)縣市的煙蚜種群對(duì)吡蟲(chóng)啉的敏感性差異很大，這可能與各地?zé)熝涟l(fā)生程度及用藥程度不同有關(guān)。就不同地區(qū)的平均抗性水平來(lái)看，銅仁和畢節(jié)2個(gè)地區(qū)的煙蚜處于低抗水平，其余7個(gè)地區(qū)的煙蚜仍處于敏感或敏感下降水平。但是，銅仁地區(qū)的松桃縣、畢節(jié)地區(qū)的赫章縣和威寧縣的煙蚜種群對(duì)吡蟲(chóng)啉已表現(xiàn)出中抗水平，抗性倍數(shù)分別達(dá)到12.77、12.05和10.24。與顧春波等研究的西南煙區(qū)煙蚜對(duì)吡蟲(chóng)啉的抗藥性[5]相比，貴州省部分縣市的煙蚜種群對(duì)吡蟲(chóng)啉的抗性水平較高。因此，各煙區(qū)除了要定期做好抗性監(jiān)測(cè)工作外，在大田生產(chǎn)中要將吡蟲(chóng)啉與其他殺蟲(chóng)劑輪換使用，以延緩煙蚜抗藥性的產(chǎn)生。endprint

參考文獻(xiàn)：

[1]秦?zé)ň?，王桂? 我國(guó)煙田蚜蟲(chóng)與病毒病害[J]. 中國(guó)煙草學(xué)報(bào)，1996，3（2）：75-78.

[2]Blackman R L，Eastop V F. Aphids on the world′s crops：an identification and information guide[M]. 2nd ed. New York：John Wiley & Sons，2000：466.

[3]van Toor R F，Drayton G M，Lister R A，et al. Targeted insecticide regimes perform as well as a calendar regime for control of aphids that vector viruses in seed potatoes in New Zealand[J]. Crop Protection，2009，28（7）：599-607.

[4]顧春波，王開(kāi)運(yùn)，辛海軍，等. 山東主要煙區(qū)煙蚜的抗藥性研究[J]. 中國(guó)煙草學(xué)報(bào)，2005，11（4）：21-23.

[5]顧春波，王 剛，王開(kāi)運(yùn)，等. 我國(guó)西南煙區(qū)桃蚜Myzus persicae（Sulzer）的抗藥性水平[J]. 植物保護(hù)學(xué)報(bào)，2006，33（1）：77-80.

[6]Juraske R，Castells F，Vijay A，et al. Uptake and persistence of pesticides in plants：Measurements and model estimates for imidacloprid after foliar and soil application[J]. Journal of Hazardous Materials，2009，165（1/2/3）：683-689.

[7]Liu Z W，Han Z J. Fitness costs of laboratory-selected imidacloprid resistance in the brown planthopper，Nilaparvata lugens Stal[J]. Pest Management Science，2006，62（3）：279-282.

[8]Jeschke P，Nauen R，Schindler M，et al. Overview of the status and global strategy for neonicotinoids[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry，2011，59（7）：2897-2908.

[9]李 菁，韓召軍. 棉蚜對(duì)吡蟲(chóng)啉抗性的初步研究[J]. 農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào)，2007，9（3）：257-262.

[10]Slater R，Paul V L，Andrews M，et al. Identifying the presence of neonicotinoidresistant peach-potato aphid（Myzus persicae）in the peach-growing regions of southern France and northern Spain[J]. Pest Management Science，2012，68（4）：634-638.

[11]Silva A X，Jander G，Samaniego H，et al. Insecticide resistance mechanisms in the green peach aphid Myzus persicae（Hemiptera：Aphididae）Ⅰ：A transcriptomic survey[J]. PLoS One，2012，7（6）：e36366.

[12]Busvine J R. FAO plant production and protection paper 21：recommended methods for measurement of resistant to pesticides[R]. Rome：FAO，1980：49-51.

[13]宋春滿，吳興富，鄧建華，等. 云南主要煙區(qū)煙蚜抗藥性的監(jiān)測(cè)[J]. 昆蟲(chóng)知識(shí)，2006，43（4）：500-503.

[14]唐小鳳，王少麗，張友軍，等. 二斑葉螨對(duì)阿維菌素的抗藥性及抗性基因的PASA檢測(cè)技術(shù)[J]. 植物保護(hù)學(xué)報(bào)，2014，41（1）：67-73.

[15]戚仁德，丁建成，高智謀，等. 北京地區(qū)蔬菜煙粉虱種群動(dòng)態(tài)及其對(duì)煙堿類殺蟲(chóng)劑的抗藥性監(jiān)測(cè)[J]. 植物保護(hù)，2012，38（5）：154-157.

[16]Tomizawa M，Millar N S，Casida J E. Pharmacological profiles of recombinant and native insect nicotinic acetylcholine receptors[J]. Insect Biochemistry and Molecular Biology，2005，35（12）：1347-1355.

[17]顧春波，王開(kāi)運(yùn)，辛海軍，等. 我國(guó)中部煙區(qū)煙蚜的抗藥性研究[J]. 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，38（1）：11-14.

[18]王智卿，劉長(zhǎng)明. 福建主要煙區(qū)抗藥性及煙蚜體內(nèi)酶的活性[J]. 華東昆蟲(chóng)學(xué)報(bào)，2010，19（4）：245-254.endprint