高 清 徐 波 郭漢城 劉俊蘭 關天俊

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脂肪酸結(jié)合蛋白3對足細胞脂肪代謝的影響

高 清 徐 波 郭漢城 劉俊蘭 關天俊

目的：觀察脂肪酸結(jié)合蛋白3(FABP3)過度增加對足細胞脂肪代謝的影響。 方法：慢病毒載體轉(zhuǎn)染小鼠永生化足細胞系(HSMPs)以構(gòu)建穩(wěn)定過表達FABP3的細胞系。將FABP3-siRNA轉(zhuǎn)染至HSMPs中沉默F(xiàn)ABP3，篩選干擾效率最大的FABP3-siRNA片段進行后續(xù)干擾實驗。實驗分組：(1)正常足細胞組;(2)NC-siRNA足細胞組;(3)FABP3-siRNA足細胞組;(4)NC足細胞組;(5)FABP3過表達足細胞組;(6)正常足細胞+棕櫚酸(PA)組;(7)NC-siRNA足細胞+PA組;(8)FABP3-siRNA足細胞+PA組;(9)NC足細胞+PA組;(10)FABP3過表達足細胞+PA組。比色法測定細胞內(nèi) TG和游離脂肪酸的含量。定量PCR法檢測各組細胞中過氧化物酶增殖激活受體α(PPARα)、?；o酶A氧化酶3(ACOX3)mRNA的表達。Western Blot法檢測PPARα、ACOX3蛋白表達水平。 結(jié)果：與正常足細胞組相比，F(xiàn)ABP3過表達足細胞組細胞內(nèi)三酰甘油(TG)和游離脂肪酸水平增加(P<0.05)，而FABP3-siRNA足細胞組TG和游離脂肪酸水平下降(P<0.05)。不論在正常環(huán)境還是PA環(huán)境下，與正常足細胞組相比，F(xiàn)ABP3過表達足細胞組PPARα mRNA和蛋白表達均下調(diào)(P<0.05)，而ACOX3 mRNA和蛋白表達均上調(diào)(P<0.05)； FABP3-siRNA足細胞組PPARα mRNA和蛋白表達均上調(diào)(P<0.05)，而ACOX3 mRNA和蛋白表達均下調(diào)(P<0.05)。與FABP3過表達足細胞組相比，F(xiàn)ABP3-siRNA足細胞組PPARα mRNA和蛋白表達上調(diào)(P<0.05)，ACOX3 mRNA和蛋白表達下調(diào)(P<0.05)；加入PA后，F(xiàn)ABP3過表達足細胞+PA組和FABP3-siRNA 足細胞+PA組之間PPARα mRNA和蛋白表達、ACOX3 mRNA和蛋白表達統(tǒng)計學差異顯著(P<0.01)。 結(jié)論：FABP3過度增加可導致足細胞脂肪代謝紊亂，抑制FABP3過度增加可糾正足細胞脂肪代謝紊亂狀態(tài)。該研究結(jié)果提示抑制FABP3表達可能對代謝因素如糖尿病、肥胖、高脂血癥所致的足細胞損傷有一定防御和治療作用。

脂肪酸結(jié)合蛋白3 過氧化物酶增殖激活受體α ?；o酶A氧化酶3 足細胞

足細胞是腎小球濾過屏障的重要組成部分，除參與維持毛細血管袢正常結(jié)構(gòu)、腎小球基膜的更新和修復外，在腎小球固有細胞功能調(diào)節(jié)及機體免疫應答中，足細胞也起著重要作用。既往大量研究認為，足細胞損傷是腎小球損傷的中心環(huán)節(jié)，多種損傷因素(如代謝、免疫、炎癥、毒物、感染、環(huán)境、遺傳背景等)都能直接或間接影響足細胞，導致足細胞損傷、蛋白尿形成、腎小球硬化或間質(zhì)纖維化等。脂毒性-足突細胞中心觀點認為 podocin 和 nephrin附著于足突細胞間裂孔隔膜的類固醇(脂質(zhì)閥)上，促進了podocin-nephrin 和 podocin 轉(zhuǎn)運受體與陽離子通道6(TRPC-6)的交互作用，進而維持了足突細胞的功能。如果脂肪酸氧化出現(xiàn)異常，可能影響podocin蛋白的棕櫚化作用、膜的嵌入及脂質(zhì)閥的脂質(zhì)構(gòu)成，從而促進腎小球高濾過而產(chǎn)生白蛋白尿。仇麗茹等[1]的實驗結(jié)果表明，脂肪酸可導致足細胞內(nèi)脂滴增加，Caspase3/7明顯增高，誘導足細胞凋亡。因此提出脂肪是維持腎臟細胞功能的必要物質(zhì)，但也可導致腎臟炎性反應、纖維化作用甚至壞死[2-3]。

脂肪酸結(jié)合蛋白3(FABP3)是FABP超家族成員之一，其又稱為心型FABP，既往認為它主要分布于心肌和骨骼肌。近期Chen等[4]研究發(fā)現(xiàn)腎小球足細胞中也存在FABP3，并且在肥胖相關性腎病患者腎組織足細胞中表達異常增高，與蛋白尿水平呈正相關。但FABP3對足細胞脂肪代謝的影響極其機制尚不清楚。

RNA干擾技術是一種新興的基因治療技術，是發(fā)生于mRNA水平的轉(zhuǎn)錄后基因沉默技術?？稍诓溉閯游锛毎M織內(nèi)起基因封閉作用，其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，無須像反義寡核苷酸那樣進行廣泛的化學修飾才能提高其半衰期，而且干擾RNA(siRNA)能在低于反義寡核苷酸幾個數(shù)量級的濃度下，使靶基因降至低水平甚至完全“敲除”，從而產(chǎn)生缺失突變型[5-6]。因此，我們采用小鼠永生化足細胞系(HSMPs細胞)，利用LV5(含EGF和puro)質(zhì)粒為骨架，將FABP3構(gòu)建進質(zhì)粒，感染HSMPs細胞建立穩(wěn)定表達FABP3的HSMPs細胞系。將siRNA轉(zhuǎn)染至HSMPs細胞系中干擾FABP3，篩選最佳FABP3-siRNA序列并利用最佳的siRNA沉默F(xiàn)ABP3。重點觀察穩(wěn)定表達FABP3的HSMPs細胞系和沉默F(xiàn)ABP3的HSMPs細胞系脂質(zhì)代謝與正常HSMPs細胞系之間的不同。探討FABP3在足細胞中的作用，為治療各種可能導致足細胞脂質(zhì)代謝紊亂的慢性腎臟病提供新的可能性思路。

材料和方法

藥品和試劑 棕櫚酸(sigma公司)，F(xiàn)ugene Xtreme transfection reagent(Roche公司)，逆轉(zhuǎn)錄試劑盒(日本takara公司)，F(xiàn)ABP3、PPARα抗體(美國abcam公司)，ACOX3抗體(美國pierce公司)、FABP3 siRNA(上海吉瑪生物公司)、三酰甘油(TG)測定試劑盒(浙江伊利康生物技術有限公司)、游離脂肪酸和考馬斯亮藍蛋白測定試劑盒(南京建成生物工程研究所)。

穩(wěn)定表達FABP3的HSMPs細胞系 過表達FABP3慢病毒訂購自上海吉瑪生物公司，綠色熒光蛋白(GFP)標記。種1×105個HSMPs細胞(由美國Shankland教授授權(quán)，南京軍區(qū)南京總醫(yī)院腎臟科劉志紅院士饋贈)于六孔板中，加入MOI=1×107滴度的病毒培養(yǎng)，觀察綠色熒光表達情況。加入 1 μg/ml的嘌呤霉素篩選細胞，2周后通過實時定量PCR(RT-PCR)及Western Blot法檢測FABP3表達情況。

FABP3-siRNA瞬時轉(zhuǎn)染 將8%FABP3-siRNA轉(zhuǎn)染液加入種有1×105個HSMPs細胞的六孔板中，24h后取出細胞，用RT-PCR、Western Blot法檢測FABP3表達情況。

細胞分組處理 根據(jù)每組需求，六孔板每個孔種2×105個所需細胞，轉(zhuǎn)染siRNA和(或)者加入30 μmol/L棕櫚酸(PA)即不飽和脂肪酸，由此將細胞分組為：(1)正常足細胞組;(2)NC-siRNA足細胞組;(3)FABP3-siRNA足細胞組;(4)NC足細胞組;(5)FABP3過表達足細胞組;(6)正常足細胞+PA組;(7)NC-siRNA足細胞+PA組;(8)FABP3-siRNA足細胞+PA組;(9)NC足細胞+PA組;(10)FABP3過表達足細胞+PA組。其中NC為轉(zhuǎn)染一個錯配序列的陰性對照(negative control)。處理48h后，收集細胞提取RNA和蛋白。

比色法檢測細胞內(nèi)TG和游離脂肪酸含量 收獲細胞后，用PBS重復洗 3 次，加入PBS 500 μl后放入-70℃冰箱反復凍融3次，然后按照試劑盒說明書上提供的比色法測定細胞內(nèi)TG和游離脂肪酸的含量。

RT-PCR法檢測mRNA表達水平 提取各組細胞RNA，檢測濃度后按照逆轉(zhuǎn)錄試劑盒說明書進行逆轉(zhuǎn)錄反應(表1)。采用RT-PCR儀以20μl反應體系進行PCR擴增。PCR熱循環(huán)參數(shù)：37℃ 15 min→85℃ 5 s→95.0 ℃10 min→(95.0 ℃5 s→60.0 ℃1 min)×40。樣本擴增結(jié)果用GADPH濃度校正。

表1 實時熒光定量PCR引物分析

PPARα：過氧化物酶增殖激活受體α；ACOX3：?；o酶A氧化酶3；FABP3：脂肪酸結(jié)合蛋白3Western Blot法檢測蛋白表達水平 收集細胞后加入蛋白裂解液獲取總蛋白，用BCA法測蛋白濃度。每孔30 μg蛋白上樣，經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE)電泳分離后轉(zhuǎn)至聚偏氟乙烯(PVDF)膜上，5%脫脂牛奶，室溫下封閉1h，洗滌后加入兔抗小鼠PPARα多克隆抗體(1∶ 1 000)、兔抗小鼠ACOX3多克隆抗體(1∶ 1 000)4℃孵育過夜，洗滌后加入HRP偶聯(lián)羊抗兔IgG(1∶ 5 000)室溫孵育1h，洗滌后加入millipore ECL顯色液曝光。Chremi DOC XRS凝膠成像儀照相，以Quantity One圖像分析軟件測定條帶的吸光度值，以目的蛋白條帶與β-actin條帶吸光度的比值作為目的蛋白的相對表達量。

結(jié) 果

最佳FABP3-siRNA序列的篩選 我們設計了兩組FABP3的siRNA片段，片段信息如下：Fabp3-Mus-298 GCAGGAGACAACACUAACUTT；Fabp3-Mus-369 GTGAGCACTCGGACTTAT。轉(zhuǎn)染至目的細胞后24h RT-PCR檢測FABP3的表達變化，篩選出干擾效果更強的為Fabp3-Mus-298片段用于下游實驗。

FABP3 siRNA以及過表達mRNA水平和蛋白水平檢測 mRNA水平和蛋白水平檢測結(jié)果顯示，過表達FABP3慢病毒感染足細胞后，足細胞穩(wěn)定過表達FABP3，與對照組比較，F(xiàn)ABP3在足細胞中mRNA表達水平和蛋白表達水平均明顯升高(P<0.01)；經(jīng)FABP3-siRNA瞬時轉(zhuǎn)染感染的足細胞，與對照組比較，足細胞FABP3表達明顯受到抑制，F(xiàn)ABP3的mRNA表達水平和蛋白表達水平均明顯降低(P<0.01)(圖1)。

圖1 FABP3 siRNA及過表達FABP3 mRNA水平和蛋白水平檢測A:FABP3 siRNA以及過表達mRNA水平檢測;B:FABP3 siRNA以及過表達蛋白水平檢測;ctrl:正常足細胞組；NC：陰性對照，將足細胞轉(zhuǎn)染一個錯配序列；FABP3:脂肪酸結(jié)合蛋白3；**：與ctrl組比較,P<0.01

不同F(xiàn)ABP3表達水平對足細胞內(nèi)TG和游離脂肪酸的影響 比色法結(jié)果顯示，在PA作用下足細胞TG和游離脂肪酸水平增加(P<0.05)。過表達FABP3慢病毒感染足細胞后，足細胞內(nèi)TG和游離脂肪酸水平增加(P<0.05)；經(jīng)FABP3-siRNA瞬時轉(zhuǎn)染感染的足細胞，與正常對照組比較，TG和游離脂肪酸水平降低(P<0.05)。FABP3過表達足細胞在PA作用下TG和游離脂肪酸水平增加更加明顯(P<0.01)；FABP3-siRNA足細胞在PA作用下，TG和游離脂肪酸水平增加不明顯(P>0.05)(表2)。

表2 FABP3 siRNA以及FABP3過表達足細胞在PA干預下細胞內(nèi)TG和游離脂肪酸水平變化

實驗組TG(mg/gprotein)游離脂肪酸(μmol/gprotein)正常足細胞組156±18332±24NC?siRNA足細胞組148±20350±39FABP3?siRNA足細胞組81±12?196±16?NC足細胞組164±35328±23FABP3過表達足細胞組225±37?458±45?正常足細胞+PA組239±46?567±58?NC?siRNA足細胞+PA組245±39?579±72?FABP3?siRNA足細胞+PA組136±27303±42NC足細胞+PA組230±40?572±53?FABP3過表達足細胞+PA組332±23??798±54??

FABP3:脂肪酸結(jié)合蛋白3;NC:陰性對照;TG:三酰甘油；PA：棕櫚酸；*：與正常對照組比較,P<0.05；**：與正常對照組比較,P<0.01

不飽和脂肪酸干預狀態(tài)下足細胞不同F(xiàn)ABP3表達水平對PPARα和ACOX3 mRNA及蛋白表達的影響 定量PCR和Western Blot檢測結(jié)果顯示，過表達FABP3慢病毒感染足細胞后，足細胞PPARα mRNA和蛋白表達水平均下降(P<0.05)，ACOX3 mRNA和蛋白表達水平均上升(P<0.05)。經(jīng)FABP3-siRNA瞬時轉(zhuǎn)染感染的足細胞，與正常對照組比較，PPARα mRNA和蛋白表達水平均上升(P<0.05)，ACOX3 mRNA和蛋白表達水平均下降(P<0.05)。正常足細胞經(jīng)PA干預后，PPARα mRNA和蛋白表達水平均下降(P<0.05)，ACOX3 mRNA和蛋白表達水平均上升(P<0.05)。過表達FABP3慢病毒感染足細胞在PA干預下，PPARα mRNA和蛋白表達水平下降更加明顯(P<0.05)，ACOX3 mRNA和蛋白表達水平上升更加明顯(P<0.05)。在PA干預下，經(jīng)FABP3-siRNA瞬時轉(zhuǎn)染感染的足細胞較正常足細胞PPARα mRNA和蛋白表達水平高(P<0.05)，ACOX3 mRNA和蛋白表達水平低(P<0.05)(圖2、3)。

圖2 FABP3 siRNA以及FABP3過表達足細胞在PA干預下PPARα、ACOX3 mRNA水平變化A:PPARα mRNA表達水平;B:ACOX3 mRNA水平;PPARα：過氧化物酶增殖激活受體α；ACOX3：酰基輔酶A氧化酶3；FABP3：脂肪酸結(jié)合蛋白3；PA：棕櫚酸；ctrl：正常足細胞組；NC：陰性對照；a：與ctrl組比較,P<0.05；b：與ctrl+PA對照組比較,P<0.05；c：與FABP3+PA組比較,P<0.01

圖3 FABP3 siRNA及FABP3過表達足細胞在PA干預下PPARα、ACOX3 蛋白水平變化A:PPARα、ACOX3 蛋白表達水平;B:PPARα蛋白表達水平半定量測定;C:ACOX3蛋白表達水平半定量測定;PPARα：過氧化物酶增殖激活受體α；ACOX3：?；o酶A氧化酶3；FABP3：脂肪酸結(jié)合蛋白3；PA：棕櫚酸；ctrl：正常足細胞組；NC：陰性對照；a：與ctrl組比較,P<0.05；b：與ctrl+PA對照組比較,P<0.05；c：與FABP3+PA組比較,P<0.01

討 論

足細胞在腎臟中具有重要作用，除參與構(gòu)成腎小球濾過屏障、維持毛細血管袢正常結(jié)構(gòu)、輔助腎小球基膜的更新和修復外，在腎小球固有細胞功能調(diào)節(jié)以及機體免疫應答中，足細胞也起著重要作用。既往研究認為足細胞損傷是腎小球損傷的中心環(huán)節(jié)，可導致蛋白尿形成、腎小球硬化或間質(zhì)纖維化等。脂毒性-足細胞中心觀點認為脂肪酸氧化異?？赡苡绊憄odocin蛋白的棕櫚化作用、膜的嵌入及脂質(zhì)閥的脂質(zhì)構(gòu)成，可導致足細胞凋亡，從而促進腎小球高濾過而產(chǎn)生白蛋白尿[1-3]。此外，足細胞還可能分泌脂肪細胞因子如內(nèi)脂素參與機體代謝紊亂[7-8]。因此提出脂肪過度增加可影響足細胞功能。

FABP是一組分子量約為14～15 kD的低分子胞質(zhì)蛋白，分為FABP1、FABP2、FABP3、FABP4等亞型，參與細胞內(nèi)的脂肪酸運輸，在細胞內(nèi)與脂肪酸結(jié)合，調(diào)節(jié)細胞內(nèi)外脂肪酸的濃度，并將脂肪酸從細胞膜運送到脂肪酸氧化、TG和磷脂的合成部位，調(diào)控細胞內(nèi)的多種生化反應過程。FABP廣泛分布于多種組織細胞中，不同型的FABP以及同型FABP在不同細胞及組織內(nèi)有其特殊性[9]。腎臟主要分布著三種FABP。Kamijo-Ikemori等[10]報道FABP3集中分布于腎小球和遠端腎小管上皮。Guan等[11]發(fā)現(xiàn)腎小球系膜細胞上分布有FABP4。Oyama[12]的研究證實腎小管上皮細胞中存在FABP1。近期Chen等[4]研究發(fā)現(xiàn)腎小球足細胞中也存在FABP3，并且在肥胖相關性腎病患者腎組織足細胞中表達異常增高，與蛋白尿水平呈正相關。但FABP3對足細胞脂肪代謝的影響極其機制尚不清楚。因此，本文試圖通過體外實驗，重點觀察足細胞FABP3過度表達和抑制狀態(tài)下足細胞內(nèi)脂肪代謝的情況及反映脂肪代謝的兩個指標PPARα、ACOX3 mRNA和蛋白表達水平的改變。結(jié)果發(fā)現(xiàn)FABP3過度增加可導致足細胞內(nèi)脂肪代謝紊亂，PPARα mRNA和蛋白表達水平下降，ACOX3 mRNA和蛋白表達水平升高；抑制FABP3表達可降低足細胞內(nèi)TG及游離脂肪酸濃度，上調(diào)足細胞PPARα mRNA和蛋白表達水平，下調(diào)ACOX3 mRNA和蛋白表達水平。

PPARα可調(diào)節(jié)與脂肪酸氧化相關的酶的基因，可通過其他核轉(zhuǎn)錄因子而參與轉(zhuǎn)錄調(diào)控靶基因。PPARα的功能改變與肥胖的發(fā)病機制有密切關系。PPARα可能作為一種重要的脂質(zhì)調(diào)節(jié)因子，參與細胞脂質(zhì)代謝失衡的過程。足細胞中部分蛋白基因編碼區(qū)有特異的啟動因子，PPARα可直接調(diào)節(jié)足細胞。激活PPARα后對糖尿病受累足細胞有保護作用，可抑制核因子(NF-κB)和轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)/Smad3 信號通路[13]。研究發(fā)現(xiàn)，阿霉素誘導的小鼠腎病綜合征模型中PPARα表達下降，PPARα激動劑可通過穩(wěn)定nephrin表達并抑制足細胞凋亡改善這一疾病模型[14]。在體外培養(yǎng)的足細胞中，也發(fā)現(xiàn)PPARα可通過降低caspase-3表達、增加Bcl-2表達而改善阿霉素誘導的足細胞損傷[15]。在多種損傷模型中發(fā)現(xiàn)PPARα可通過保護Bcl-2、Bax和nephrin表達而防治足細胞損傷[16]。本研究結(jié)果提示FABP3過度增加可能通過降低PPARα表達而導致足細胞更易受外界因素損傷，包括代謝、免疫、炎癥、毒物、感染、環(huán)境等；抑制FABP3可能通過增加PPARα表達而起到保護足細胞的作用。本研究選取PA作為外界干擾因素，發(fā)現(xiàn)抑制FABP3過度增加仍可防止PA作用下足細胞PPARα表達降低，從而可能起到保護足細胞的作用。

ACOX3是過氧化物酶體脂肪酸β氧化過程中的重要氧化酶之一，過氧化物酶體是脂肪酸氧化的重要場所。在哺乳動物中，過氧化物酶體主要氧化分解長鏈、超長鏈和支鏈脂肪酸，過氧化物酶體的功能障礙會造成很多脂肪酸的過度沉積，引起代謝疾病。組織表達規(guī)律研究表明，ACOX3在小鼠白色脂肪組織中的表達量最高。高脂系個體ACOX3基因的表達量是低脂系的兩倍多，ACOX3對脂肪的沉積有重要影響[17-18]。本研究結(jié)果提示FABP3過度增加可能通過ACOX3表達增加而導致脂肪在組織中過度沉積，在代謝因素所致足細胞損傷中可能起重要作用；抑制FABP3過度增加可能通過降低ACOX3 mRNA和蛋白表達而保護足細胞。

從研究結(jié)果看，我們認為FABP3過度增加可導致足細胞脂肪代謝紊亂，細胞內(nèi)TG和游離脂肪酸水平增加，抑制FABP3表達可糾正足細胞脂肪代謝紊亂狀態(tài)，細胞內(nèi)TG和游離脂肪酸水平下降。FABP3過度增加可導致足細胞PPARα mRNA和蛋白表達水平下降，ACOX3 mRNA和蛋白表達水平升高；抑制FABP3可上調(diào)足細胞PPARα mRNA和蛋白表達水平，下調(diào)ACOX3 mRNA和蛋白表達水平。尤其在外界因素PA干預下兩者差異更加顯著。由此提示抑制FABP3表達可能通過改善足細胞脂肪代謝，調(diào)控PPARα、ACOX3 mRNA和蛋白表達水平起到保護足細胞、防止足細胞受外界因素損傷的作用。

小結(jié):本研究為治療足細胞損傷相關腎臟病提供了一種新的可行性方案，不足之處是目前對FABP3如何影響PPARα和ACOX3表達的機制尚未明確，我們將在今后的研究中進一步探索相關機制，并進一步觀察FABP3在足細胞中的其他作用。

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(本文編輯 春 江)

Effects of fatty acid binding protein 3 on the fat metabolism of podocyte

GAOQing,XUBo,GUOHancheng,LIUJunlan,GUANTianjun

DepartmentofNephrology,ZhongshanHospital,XiamenUniversity,Xiamen361004,ChinaCorrespondingauthor:GUANTianjun(E-mail:guantianjun@aliyun.com)

Objective：To investigate the effect and mechanisms of fatty acid binding protein 3 (FABP3) on the fat metabolism of podocyte. Methodology：We transfect the lentivirus vector to heat-sensitive mouse podocytes(HSMPs) to construct the cell line which express FABP3 stabile and excessively. Two siRNAs were designed and synthesized. One of them that was capable of silencing FABP3 more effectively in HSMPs was chosen to do the next interference study. They were divided into ten cell groups: (1) normal control group; (2) NC-siRNA group; (3) FABP3-siRNA group; (4) NC group; (5) excessive express FABP3 group; (6)normal control+palmic acid (PA) group; (7) NC-siRNA+PA group; (8) FABP3-siRNA+PA group; (9) NC+PA group; (10) excessive express FABP3+PA group. Triglycerides (TG) and free fatty acid contents in podocytes were determined by colorimetric method. The mRNA expression of peroxisome proliferator activated receptors α (PPARα) and ACOX3 of each group was determined by using Real-Time PCR. The proteins of PPARα and ACOX3 were examined by using Western blot. Results：Compared with normal control group,the levels of TG and free fatty acid were up-regulated in group5 (FABP3 group),while down-regulated in group3 (FABP3-siRNA group) (P<0.05). Compared with normal control group,mRNA and protein expressions of PPARα were down-regulated in FABP3 group (P<0.05),while mRNA and protein expressions of ACOX3 were up-regulated in FABP3 group (P<0.05) with or without PA. Compared with normal control group,mRNA and protein expressions of PPARα were up-regulated in FABP3-siRNA group (P<0.05),while mRNA and protein expressions of ACOX3 were down-regulated in FABP3-siRNA group with or without PA (P<0.05). Compared with FABP3 group,mRNA and protein expressions of PPARα were up-regulated in FABP3-siRNA group (P<0.05),while mRNA and protein expressions of ACOX3 were down-regulated in FABP3-siRNA group (P<0.05). There was more conspicuous statistical difference between FABP3+PA group and FABP3-siRNA+PA group in the expression of mRNA and proteins of PPARα and ACOX3 (P<0.01). Conclusion：The excessive expression of FABP3 may induce fatty metabolic disturbance in podocytes. Inhibiting the expression of FABP3 may improve the fatty metabolic disturbance in podocytes. These results prompted that inhibiting the expression of FABP3 may ameliorate the metabolic disorder induced podocyte injury,such as diabetes mellitus, obesity and dyslipidemia.

Fatty acid binding protein 3 peroxisome proliferator activated receptors α Acyl-Coenzyme A oxidase 3 podocyte

福建省自然科學基金青年創(chuàng)新項目(2012D054)

福建省廈門大學附屬中山醫(yī)院腎內(nèi)科(廈門，361004)

關天俊(E-mail:guantianjun@aliyun.com)

2015-05-12

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