王治偉，李福廣，熊裕民，趙子龍

論著·臨床

腸癌組織中微小染色體維持蛋白2的高表達(dá)與腸癌肝轉(zhuǎn)移及臨床病理特征的關(guān)系

王治偉，李福廣，熊裕民，趙子龍

目的 探究腸癌組織中微小染色體維持蛋白2(MCM2) 的高表達(dá)與腸癌肝轉(zhuǎn)移及臨床病理特征的關(guān)系。方法 2009年1月—2014年1月收治大腸癌患者215例，其中肝轉(zhuǎn)移88例為肝轉(zhuǎn)移組，另127例為無(wú)肝轉(zhuǎn)移組，同時(shí)選擇60例健康者為健康對(duì)照組。比較3組血漿MCM2水平，以及肝轉(zhuǎn)移組與無(wú)肝轉(zhuǎn)移組腸癌組織MCM2表達(dá)情況，分析MCM2表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系。結(jié)果 與健康對(duì)照組比較，腸癌肝轉(zhuǎn)移組和無(wú)肝轉(zhuǎn)移組MCM2水平均升高(P<0.05)，且肝轉(zhuǎn)移組MCM2水平高于無(wú)肝轉(zhuǎn)移組(P<0.05)；腸癌肝轉(zhuǎn)移組MCM2高表達(dá)率為76.1%(67/88)，高于腸癌無(wú)肝轉(zhuǎn)移組的46.5%(59/127)(P<0.05)；MCM2高表達(dá)與腸癌TNM分期、分化程度及淋巴轉(zhuǎn)移密切相關(guān)(χ2=5.005、4.263、4.388，P<0.05)。結(jié)論 MCM2高表達(dá)與大腸癌肝轉(zhuǎn)移、TNM分期、分化程度、淋巴轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。

腸癌；肝轉(zhuǎn)移；微小染色體維持蛋白2；臨床病理

大腸癌發(fā)病率較高，部分大腸癌患者在確診時(shí)已出現(xiàn)肝轉(zhuǎn)移[1]。腸癌肝轉(zhuǎn)移患者預(yù)后差，近遠(yuǎn)期生存率低[2～4]。大腸癌中存在腫瘤細(xì)胞異常增殖，微小染色體維持蛋白2(minichromosome maintenance protein 2，MCM2)為DNA復(fù)制時(shí)的重要相關(guān)標(biāo)志物，與腫瘤細(xì)胞異常增殖有關(guān)，在正常情況下表達(dá)水平不高，而在細(xì)胞過(guò)度增殖時(shí)其水平可不斷升高[5，6]。由于MCM2的表達(dá)特異性，其現(xiàn)已成為腫瘤診斷的主要標(biāo)志物[7]?，F(xiàn)探討MCM2的表達(dá)與腸癌肝轉(zhuǎn)移及臨床病理的關(guān)系，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2009年1月—2014年1月我院收治的大腸癌患者215例為研究對(duì)象，均經(jīng)病理證實(shí)為大腸癌。剔除在隨訪過(guò)程中失去聯(lián)系的患者。215例中男133例，女82例；年齡34～75(54±5)歲。其中出現(xiàn)肝轉(zhuǎn)移88例(肝轉(zhuǎn)移組)：男52例，女36例;年齡34～71(56±6)歲, 病程3～7(4±1)年；合并糖尿病19例，合并高血壓22例，接受過(guò)放射治療25例，有家族遺傳史41例。腸癌無(wú)肝轉(zhuǎn)移患者127例(無(wú)肝轉(zhuǎn)移組)：男81例，女46例;年齡34～75(52±4)歲；病程2～6(3±1)年；合并糖尿病15例，合并高血壓20例，接受過(guò)放射治療16例，有家族遺傳史38例。選擇同期在我院健康體檢的健康者60例為健康對(duì)照組：男32例，女28例;年齡35～75(54±4)歲。3組在性別、年齡等基本資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。腸癌患者肝轉(zhuǎn)移組和無(wú)肝轉(zhuǎn)移組在病程、基礎(chǔ)合并癥、既往治療史、家族遺傳史方面比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究獲我院倫理委員會(huì)審批通過(guò)，患者及家屬知情同意并簽署知情同意書。

1.2 觀測(cè)指標(biāo)與方法[4，5]

1.2.1 血漿MCM2測(cè)定(ELISA法): 3組于清晨空腹?fàn)顟B(tài)下抽取外周肘靜脈血5 ml，3 500 r/min離心10 min，上清液-80℃保存待測(cè)；采用雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)MCM2水平；試劑盒購(gòu)自于上海華大科技有限公司，嚴(yán)格按照說(shuō)明書操作。

1.2.2 癌組織 MCM2測(cè)定(免疫組化法)：選用的病理組織蠟塊在切片后脫蠟，再經(jīng)免疫組化法進(jìn)行顯色。選擇英國(guó)Abcan公司提供的鼠抗人MCM2多克隆抗體，最后用蘇木素進(jìn)行復(fù)染程序后在顯微鏡下觀察，當(dāng)細(xì)胞核中出現(xiàn)棕黃色顆粒記為MCM2陽(yáng)性細(xì)胞。其中在顯微鏡( XTJ-4600，梧州光學(xué)儀器廠)觀察區(qū)域內(nèi)細(xì)胞陽(yáng)性比例超過(guò)50%記為高表達(dá)，相反≤50%記為低表達(dá)。

2 結(jié) 果

2.1 血漿MCM2水平比較 與健康對(duì)照組比較，腸癌肝轉(zhuǎn)移組、無(wú)肝轉(zhuǎn)移組血漿MCM2水平均升高(P<0.05)，肝轉(zhuǎn)移組MCM2水平高于無(wú)肝轉(zhuǎn)移組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 3組血漿MCM2水平及癌組織MCM2表達(dá)情況比較

注：與健康對(duì)照組比較，aP<0.05；與無(wú)肝轉(zhuǎn)移組比較，bP<0.052.2 腸癌組織MCM2高表達(dá)比較 腸癌肝轉(zhuǎn)移組癌組織MCM2高表達(dá)率為76.1%，顯著高于腸癌無(wú)肝轉(zhuǎn)移組的46.5%(P<0.01)。見(jiàn)表1，圖1、2(見(jiàn)插頁(yè)4)。

2.3 腸癌組織MCM2表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系 根據(jù)腸癌組織MCM2表達(dá)情況將215例患者分為高表達(dá)亞組(126例)和低表達(dá)亞組(89例)。結(jié)果顯示，MCM2高表達(dá)與腸癌TNM分期、分化程度及淋巴轉(zhuǎn)移密切相關(guān)(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 MCM2表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系 [例(%)]

3 討 論

大腸癌為消化系統(tǒng)惡性腫瘤，發(fā)病率居消化道惡性腫瘤第2位，病死率高，其中腸癌伴發(fā)肝轉(zhuǎn)移患者預(yù)后極差，近遠(yuǎn)期生存率低[8]。一般大腸癌在發(fā)病早期得到確診并進(jìn)行及時(shí)治療不僅能提高生存率，亦可降低肝轉(zhuǎn)移發(fā)生率。MCM2是DNA復(fù)制中的主要組成物[9]，在DNA復(fù)制前期，通過(guò)與主要過(guò)程因子的結(jié)合形成復(fù)合體，從而引起DNA的復(fù)制。當(dāng)惡性腫瘤細(xì)胞不斷增殖時(shí)可出現(xiàn)MCM2高表達(dá)。MCM2獨(dú)特的性質(zhì)使得其成為腫瘤標(biāo)志物，其對(duì)腫瘤的發(fā)生及嚴(yán)重程度的判定均有較高的價(jià)值[10]。研究顯示，MCM2的異常表達(dá)與大腸癌肝轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[11，12]。本結(jié)果顯示，腸癌伴肝轉(zhuǎn)移組MCM2水平明顯高于腸癌無(wú)肝轉(zhuǎn)移組及健康對(duì)照組，而免疫組化結(jié)果亦顯示，腸癌伴肝轉(zhuǎn)移組癌組織中MCM2高表達(dá)率高于腸癌無(wú)肝轉(zhuǎn)移組。表明MCM2的異常表達(dá)與腸癌肝轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，MCM2的高表達(dá)可能參與了腸癌肝轉(zhuǎn)移的發(fā)生過(guò)程。

本結(jié)果顯示，MCM2高表達(dá)與腸癌肝轉(zhuǎn)移、TNM分期、分化程度及淋巴轉(zhuǎn)移等因素有關(guān)。與Schmidt等[12]的研究結(jié)果相符。表明大腸癌肝轉(zhuǎn)移患者M(jìn)CM2表達(dá)水平相對(duì)更高，MCM2表達(dá)與腫瘤嚴(yán)重程度、淋巴轉(zhuǎn)移存在一定相關(guān)性。MCM2主要是在DNA復(fù)制中對(duì)細(xì)胞分裂起作用來(lái)加大細(xì)胞增殖速度，從而作為腫瘤標(biāo)志物。在大腸癌轉(zhuǎn)移的患者中由于細(xì)胞增殖轉(zhuǎn)移的需要，導(dǎo)致所需MCM2越多，進(jìn)一步刺激了MCM2的表達(dá)，兩者相互惡性循環(huán)，能高效代表腫瘤轉(zhuǎn)移水平[10]。當(dāng)TNM分期越高，即大腸癌越嚴(yán)重時(shí)就會(huì)出現(xiàn)擴(kuò)散及轉(zhuǎn)移，所以MCM2水平不斷增高。同樣，在分化程度越大、淋巴轉(zhuǎn)移的患者中也觀察到MCM2水平升高。這也說(shuō)明MCM2表達(dá)水平的高低在一定程度上能代表TNM分期和分化程度，并能輔助判斷是否出現(xiàn)肝轉(zhuǎn)移和淋巴轉(zhuǎn)移[13，14]。大腸癌肝轉(zhuǎn)移患者多會(huì)選擇肝切除來(lái)治療疾病，也有部分患者堅(jiān)持放化療來(lái)治療。但肝轉(zhuǎn)移后的惡化程度在一定程度上影響預(yù)后結(jié)果，若在治療前能準(zhǔn)確判斷大腸癌嚴(yán)重程度能幫助患者選擇最佳治療方案[15，16]。不僅增大治療效率，還減少患者經(jīng)濟(jì)壓力。因此，MCM2水平對(duì)大腸癌肝轉(zhuǎn)移具有較高的研究?jī)r(jià)值，可以作為診斷及預(yù)后的觀察指標(biāo)。

綜上所述，大腸癌中血漿MCM2出現(xiàn)異常表達(dá)，組織中MCM2高表達(dá)與大腸癌肝轉(zhuǎn)移、TNM分期、分化程度、淋巴轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。

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《疑難病雜志》可直接使用的英文縮略語(yǔ)

T(體溫) R(呼吸) HR(心率) BP(血壓)

SBP(收縮壓) DBP(舒張壓) ECG(心電圖) EEG(腦電圖)

Hb(血紅蛋白) RBC(紅細(xì)胞) WBC(白細(xì)胞) N(中性粒細(xì)胞)

L(淋巴細(xì)胞) M(單核細(xì)胞) E(嗜酸粒細(xì)胞) PLT(血小板)

ESR(紅細(xì)胞沉降率) HCT(紅細(xì)胞壓積) TG(三酰甘油) TC(總膽固醇)

CH(膽固醇) LDL-C(低密度脂蛋白膽固醇) HDL-C(高密度脂蛋白膽固醇) SCr(血肌酐)

UA尿酸 NO(一氧化氮) BUN(血尿素氮) T3(三碘甲狀腺原氨酸)

T4(甲狀腺素) ALT(丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶) AST(天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶) APTT(活化部分凝血活酶時(shí)間)

PaO2(動(dòng)脈血氧分壓) PaCO2(動(dòng)脈血二氧化碳分壓) SaO2動(dòng)脈血氧飽和度 IU或U(酶活力的國(guó)際單位)

The expression of minichromosome maintenance protein 2 in colorectal cancer with liver metastases and the clinical significance

WANGZhiwei*,LIFuguang,XIONGYumin,ZHAOZilong.*DepartmentofSurgery,AnkangCentralHospital,ShanxiProvince,Ankang725000,China

Objective To explore the relationship between the expression of 2 (MCM2) in colorectal cancer tissues and the clinical pathological characteristics of colorectal cancer.Methods From January 2009 to January 2014, 215colorectal cancer patients were enrolled, 88 patients with hepatic metastasis as liver metastases group, 127 cases as non-liver metastasis group, and 60 cases of healthy people as healthy control group. MCM2 levels in the 3 groups were compared, and the expression of MCM2 in the liver metastasis group and non-liver metastasis group were compared. The relationship between MCM2 expression and clinical pathological features was analyzed.Results Compared to the health control group, colon cancer liver metastasis group and non-liver metastases group’s level of MCM2 increased (P<0.05), and liver metastasis group’s level of MCM2 was higher than those in non-liver metastasis group (P<0.05); liver metastasis group’s MCM2 expression rate was 76.1% (67/88), which was higher than non-liver metastasis group’s 46.5% (59/127) (P<0.05); MCM2 expression and Colon Cancer TNM staging, differentiation degree and lymph node metastasis is closely related (χ2=5.005，4.263，4.388,P<0.05).Conclusion The high expression of MCM2 is related to liver metastasis of colorectal cancer, TNM staging, differentiation, lymphatic metastasis.

Colorectal cancer; Hepatic metastasis; Minichromosome maintenance protein 2; Clinical pathology

725000 陜西省安康市中心醫(yī)院普通外科(王治偉、李福廣、熊裕民)，病理科(趙子龍)

10.3969 / j.issn.1671-6450.2015.11.007

2015-06-04)