朱虹貞，蘭周燕，黎 宇 (廣西醫(yī)科大學(xué)第四附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣西 柳州 545005)

探討溶血對血清胰島素水平檢測的影響

朱虹貞，蘭周燕，黎 宇 (廣西醫(yī)科大學(xué)第四附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣西 柳州 545005)

目的：探討不同程度溶血對血清胰島素水平檢測的影響。方法：選取體檢健康成年人血標(biāo)本30例，測定其溶血前后血清胰島素水平，并進(jìn)行對比分析。結(jié)果：各組未溶血前檢測結(jié)果與溶血后的輕、中、重度溶血組比較，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論：溶血對血清胰島素水平檢測有顯著的影響，應(yīng)盡量避免溶血標(biāo)本的送檢。

溶血;胰島素;電化學(xué)發(fā)光免疫分析法

血清胰島素水平測定對糖尿病分型、臨床用藥和療效評估具有重要的指導(dǎo)作用。然而，在日常的臨床血標(biāo)本檢測中，溶血已成為影響檢測結(jié)果準(zhǔn)確性的主要因素之一［1］，使得其檢測結(jié)果與臨床癥狀不相符，影響臨床醫(yī)生對病情的診斷，延誤患者的最佳治療時間。筆者探討不同程度溶血對血清胰島素水平檢測的影響，意在讓臨床醫(yī)生深入了解溶血標(biāo)本對實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響的嚴(yán)重性，以避免溶血標(biāo)本的送檢，使患者能在最短時間里得到有效地診治?，F(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本資料和溶血分級

1.1.1 標(biāo)本資料：選取當(dāng)天到我院體檢的健康成年人血標(biāo)本30例，所有體檢者均征求其同意和詢問病史、用藥史，無服用其他藥物及相關(guān)疾病史，肝腎功能各項指標(biāo)基本正常。標(biāo)本無黃疸、溶血或高脂血狀態(tài)。

1.1.2 溶血分級：根據(jù)美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(CLSI)的文件，將溶血程度分為輕度溶血(Hb濃度0～1 g/L)、中度溶血(Hb濃度1～5 g/L)、重度溶血(Hb濃度＞5 g/L)。

1.2 儀器和試劑：采用羅氏公司全自動電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及配套試劑檢測胰島素濃度;全自動血球分析儀K－4500及配套試劑檢測溶血后血清中Hb的含量;離心機(jī)為湖南湘儀L－530低速臺式離心機(jī)。

1.3 檢測方法：①所選取標(biāo)本以3 000 r/min離心10 min分離血清，用羅氏全自動電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測每份標(biāo)本中胰島素的含量，并記錄好數(shù)據(jù)。②用真空注射器反復(fù)抽打標(biāo)本中的血液，使其發(fā)生溶血后，離心分離血清，并用全自動血球分析儀K－4500檢測其血清中的Hb含量，按上述溶血標(biāo)準(zhǔn)分為輕度溶血組10例、中度溶血組10例、重度溶血組10例。③用羅氏全自動電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀再次檢測三組溶血后的血清，記錄好數(shù)據(jù)，進(jìn)行對比分析。以上所有檢驗(yàn)操作嚴(yán)格按照廠家提供的說明書及科室制訂的SOP文件執(zhí)行。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理：試驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)Microsoft Excel進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，兩組數(shù)據(jù)間比較采用配對t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

30例體檢者血清胰島素檢測結(jié)果顯示，各組未溶血前檢測結(jié)果與溶血后的輕、中、重度溶血組比較，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，詳見表1。

表1 血清胰島素檢測結(jié)果(±s)

表1 血清胰島素檢測結(jié)果(±s)

組別 例數(shù) 溶血前Ins(mU/L)溶血后Ins(mU/L)t值 P值輕度溶血組10 215.60±29.97 89.22±32.67 9.01 ＜0.05中度溶血組 10 225.00±29.36 103.61±21.08 9.25 ＜0.05重度溶血組10 224.20±38.59 59.48±37.11 9.73 ＜0.05

3 討論

本次試驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，各組未溶血前檢測結(jié)果與溶血后的輕、中、重度溶血組比較，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，溶血后的胰島素測定值明顯低于溶血前的胰島素測定值。由此可知，溶血對血清胰島素水平檢測有較顯著的影響。

標(biāo)本溶血可影響胰島素的檢測結(jié)果，其主要原因在于紅細(xì)胞內(nèi)含有一種過氧化物水解酶，該酶具有催化胰島素降解的作用。當(dāng)紅細(xì)胞破裂后，胰島素降解酶從紅細(xì)胞內(nèi)釋放至血清中，將血清中的胰島素分子降解。由于本次試驗(yàn)的測定方法為電化學(xué)發(fā)光免疫分析法，其反應(yīng)原理采用生物素化的人抗胰島素單克隆抗體和釕標(biāo)記的抗胰島素的單克隆抗體與標(biāo)本混勻，形成夾心復(fù)合物。在加入鏈霉親和素包被的微粒后，通過生物素和親和素的特異性作用將夾心復(fù)合物結(jié)合到磁性微粒上與檢測反應(yīng)使用的三丙胺在電場的作用下發(fā)生氧化還原反應(yīng)。該反應(yīng)會發(fā)射光子而成為光子信號，該信號最終通過光電倍增管進(jìn)行測定，并將其轉(zhuǎn)化為數(shù)據(jù)以形成報告的形式傳輸給電腦。所以當(dāng)標(biāo)本溶血時，胰島素被過氧化物水解酶大量分解，致使在反應(yīng)液中形成的夾心復(fù)合物減少，反應(yīng)形成的光電信號減弱，最終導(dǎo)致檢測出的結(jié)果偏低，影響臨床醫(yī)生的診斷思路與治療方案。

由此可見，溶血的標(biāo)本可對胰島素的檢測造成較大的影響。如何有效地減少溶血對胰島素水平檢測的影響，已成為醫(yī)學(xué)界熱議的話題。要確保標(biāo)本的采集質(zhì)量，對于護(hù)理人員而言，護(hù)理人員在抽血的時候應(yīng)按照抽血的操作規(guī)范嚴(yán)格執(zhí)行，盡可能避免因操作不當(dāng)而造成標(biāo)本溶血的現(xiàn)象;對于相關(guān)醫(yī)務(wù)工作人員而言，對不能及時送檢的標(biāo)本，可按相關(guān)規(guī)定給予標(biāo)本低溫保存或加入適量的添加酶抑制劑保護(hù)，以延緩血標(biāo)本中紅細(xì)胞裂解的速度，防止因紅細(xì)胞水解而釋放出過多的水解酶水解血清中的胰島素［2］。對能及時送檢的標(biāo)本，相關(guān)醫(yī)務(wù)人員也應(yīng)按照標(biāo)本的安全運(yùn)送規(guī)程及時將其送至實(shí)驗(yàn)室;對于檢驗(yàn)人員而言，檢驗(yàn)人員在接收標(biāo)本或上機(jī)操作中，如發(fā)現(xiàn)標(biāo)本為溶血狀態(tài)，應(yīng)及時聯(lián)系臨床并建議重抽標(biāo)本。只有相關(guān)醫(yī)務(wù)人員共同把關(guān)，才能確保標(biāo)本的采集質(zhì)量，確保標(biāo)本的檢測質(zhì)量，幫助臨床醫(yī)生能更好地掌握患者的病情。

［1］駱 豐，虞玉群，陳益民.常見因素對胰島素檢測的干擾分析［J］.浙江中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2008，32(4)：501.

［2］張慧漲，方 強(qiáng).標(biāo)本的不同處理對胰島素檢測結(jié)果的影響［J］.中國臨床醫(yī)學(xué)，2010，17(6)：901.

2014－07－28 編校：徐強(qiáng)］