程歆琦，程 倩，邱 玲，劉 荔，劉 茜，韓少梅，朱廣瑾

（1.中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 100730;2.中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所流行病統(tǒng)計(jì)學(xué)系，北京 100005;3.生理學(xué)與病理生理學(xué)系，北京 100005）

黑龍江省健康青少年血清鈣、磷、堿性磷酸酶的參考范圍

程歆琦1，程 倩1，邱 玲1，劉 荔1，劉 茜1，韓少梅2，朱廣瑾3*

（1.中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 100730;2.中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所流行病統(tǒng)計(jì)學(xué)系，北京 100005;3.生理學(xué)與病理生理學(xué)系，北京 100005）

目的 調(diào)查分析黑龍江省健康青少年血清鈣、磷和堿性磷酸酶水平，建立性別和年齡相關(guān)的參考范圍。方法于2008年7月-2009年6月，從黑龍江省哈爾濱和牡丹江的市區(qū)、郊區(qū)隨機(jī)抽取2 101名9～18歲健康中小學(xué)生進(jìn)行體檢，測(cè)定血清鈣、磷和堿性磷酸酶濃度。篩除離群數(shù)據(jù)個(gè)體后，共2 091名受試者入選?？紤]性別和年齡因素，建立相應(yīng)的血清鈣、磷和堿性磷酸酶的參考范圍（P2.5～P97.5）。結(jié)果 描述了9～18歲青少年男性和女性血清鈣、磷和堿性磷酸酶水平隨年齡、性別的變化趨勢(shì)。血清鈣、磷和堿性磷酸酶水平與年齡呈明顯的負(fù)相關(guān)，且男性高于女性（P＜0.001）。全部人群的血清鈣、磷和女性的堿性磷酸酶水平隨年齡的增加而下降，而男性的13歲年齡組堿性磷酸酶水平最高，13歲前隨年齡增加而增加，13歲后隨年齡增加而降低。結(jié)論 初步建立了黑龍江省健康青少年血清鈣、磷和堿性磷酸酶的參考范圍，對(duì)臨床醫(yī)生特別是兒科醫(yī)生對(duì)上述指標(biāo)的結(jié)果解釋和臨床干預(yù)具有很好的參考價(jià)值。

健康青少年;鈣;磷;堿性磷酸酶;參考范圍

*通信作者（corresponding author）:zhugj@126.com

血清鈣（calcium，Ca）、磷（phosphate，P）和堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）水平與兒童骨骼生長(zhǎng)發(fā)育密切相關(guān)［1］。但由于收集健康青少年志愿者和標(biāo)本采集比較困難，國(guó)內(nèi)缺乏基于大樣本流行病學(xué)研究的中國(guó)健康青少年血清Ca、P和ALP的數(shù)據(jù)，因此上述項(xiàng)目的青少年參考范圍也無法建立。本研究擬為建立黑龍江地區(qū)健康青少年各年齡段的參考范圍提供資料，并探討血清Ca、P和ALP在青少年生長(zhǎng)發(fā)育中的變化趨勢(shì)及其與性別、年齡、民族的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象

采用分層、隨機(jī)整群抽樣的原則，于2008年7月-2009年6月，從黑龍江省的哈爾濱市區(qū)、郊區(qū)和牡丹江市區(qū)、郊區(qū)隨機(jī)抽取2 101名9～18歲健康中小學(xué)生進(jìn)行體檢，并測(cè)定血清Ca、P和ALP濃度。排除患心、肺、肝、腎和內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病、身體發(fā)育不正常和最近15 d有發(fā)熱、感冒或其他呼吸道感染癥狀者，并篩除離群數(shù)據(jù)個(gè)體（在男性和女性的各自不同年齡組中刪除血清Ca、P和ALP濃度在x±4s范圍之外的受試者）后，共2 091名受試者入選，其中男937名，女1 154名;漢族1 280名，朝鮮族811名。

此調(diào)查工作經(jīng)過中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，并取得了受試者本人和監(jiān)護(hù)人書面知情同意。

1.2 方法

1.2.1 儀器與試劑:使用Roche Modular P全自動(dòng)生化分析儀，Roche配套試劑，使用MTB比色法測(cè)定Ca濃度，使用磷鉬酸紫外法測(cè)定P濃度，使用AMP速率法測(cè)定ALP濃度，項(xiàng)目校準(zhǔn)使用Roche c.f.a.s多項(xiàng)校準(zhǔn)品。

1.2.2 標(biāo)本采集和血清Ca、P和ALP測(cè)定:空腹8～12 h后抽血，標(biāo)本靜置15～30 min后，20℃3 000×g離心10 min分離血清，2～8℃冷藏保存，8 h內(nèi)運(yùn)送至檢測(cè)中心檢測(cè)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS16.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。分別比較不同性別、不同年齡組內(nèi)“最小值～最大值”是否在x±4s區(qū)間范圍內(nèi)，不在此范圍內(nèi)的數(shù)據(jù)作為異常值去除。血清Ca、P和ALP濃度用均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。血清Ca、P和ALP在不同年齡間的變化趨勢(shì)按男女分別描述，不同年齡組間的比較采用方差分析，使用SNK法進(jìn)行組間的兩兩比較。不同性別及不同民族間血清Ca、P和ALP比較采用t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 血清Ca、P和ALP與性別和年齡的相關(guān)性

2.1.1 血清Ca:男性和女性血清Ca分別為（2.47±0.08）mmol/L和（2.45±0.08）mmol/L，男性高于女性（P＜0.001），并與年齡呈負(fù)相關(guān)（P＜0.001），年齡每增加1歲，血清Ca濃度降低0.01 mmol/L（圖1）。

2.1.2 血清P:青少年男性和女性血清P分別為（1.47±0.27）mmol/L和（1.37±0.23）mmol/L，男性高于女性（P＜0.001）。血清P與年齡呈負(fù)相關(guān)（P＜0.001），年齡每增加1歲，血清 P濃度降低0.07 mmol/L。不同年齡組血清P的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）（圖2）。

2.1.3 血清ALP:青少年男性血清ALP濃度顯著高于女性（213比139 U/L，P＜0.001），不同年齡組血清ALP的差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其中青少年男性從9歲開始血清ALP水平逐漸升高（P＜0.001），年齡每增加1歲，血清ALP增加20 U/L，至13歲年齡段最高，然后逐漸下降至成人水平（P＜0.001），年齡每增加1歲，血清ALP降低45 U/L。而9～18歲青少年女性中9歲年齡段血清ALP濃度最高，然后隨年齡增加血清ALP水平逐漸下降至成人水平（P＜0.001），年齡每增加1歲，血清ALP降低31 U/L（圖3）。

圖1 青少年男性和女性血清Ca濃度隨性別和年齡的變化Fig 1 Change tendency of serum calcium with age and sex

圖2 青少年男性和女性血清P濃度隨性別和年齡的變化Fig 2 Change tendency of serum phosphate with age and sex

2.2 不同民族間血清Ca、P和ALP濃度的比較

漢族和朝鮮族間血清P濃度無明顯差異（1.42±0.25）mmol/L比（1.40±0.25）mmol/L，漢族和朝鮮族間血清ALP濃度在男性和女性均無明顯差異（表1）。血清Ca濃度漢族高于朝鮮族（2.48±0.08）mmol/L比（2.43±0.08）mmol/L（P＜0.001）。

2.3 不同性別、不同年齡組血清Ca、P和ALP的參考范圍

根據(jù)不同性別、不同年齡人群血清 Ca、P和ALP濃度的分布特點(diǎn)，建立黑龍江省健康青少年上述指標(biāo)的參考范圍（表2）。

圖3 青少年男性和女性血清ALP濃度隨性別和年齡的變化Fig 3 Change tendency of serum alkaline phosphatase with age and sex

表1 不同民族間血清ALP濃度的比較Table 1 Comparison of ALP between different ethnic age groups（U/L）

表2 黑龍江省健康青少年血清Ca、P和ALP的參考范圍Table 5 Reference intervals of serum Ca，P，ALP in of healthy school children and adolescents in Heilongjiang province

3 討論

成人身高的15%、體質(zhì)量的50%和骨礦物質(zhì)的45%均在青少年時(shí)期完成［2］，因此判斷青少年個(gè)體血清Ca、P和ALP是否正常及其生長(zhǎng)發(fā)育狀況，需要了解此時(shí)期血清Ca、P和ALP隨性別、年齡的變化趨勢(shì)，并建立正確的參考范圍。

本研究中9～18歲健康青少年血清Ca、P的水平均隨著年齡的增加而下降，男性高于女性，與國(guó)外的一些研究結(jié)果［3-4］一致。但也有不一致的研究結(jié)果，如青少年血清Ca水平與年齡無關(guān)［5］，男孩和女孩之間血清 P無明顯差異［6］等，這可能與研究對(duì)象、檢驗(yàn)方法不同有關(guān)。而本研究中血清ALP隨性別、年齡的變化趨勢(shì)與其他研究［4-8］均比較一致。

本研究中漢族與朝鮮族血清Ca水平的差異，伴隨年齡的變化血清Ca的差異均小于衛(wèi)生部室間質(zhì)評(píng)的1/3允許偏差，與個(gè)體內(nèi)生物學(xué)變異相當(dāng)［9］，同時(shí)也小于全部個(gè)體血清Ca濃度95%區(qū)間的1/4，不具有臨床意義，建立青少年血清Ca參考范圍時(shí)可以不考慮民族、年齡和性別的影響［10］。血清P和ALP水平在不同年齡組間的差異遠(yuǎn)高于個(gè)體內(nèi)生物學(xué)變異和衛(wèi)生部室間質(zhì)評(píng)的允許偏差，建立血清P和ALP范圍時(shí)需要考慮年齡因素。男女之間血清P差異小于全部個(gè)體血清P濃度95%區(qū)間的1/4，建立參考范圍時(shí)可不考慮性別因素［10］。但男女血清ALP差異顯著，建立參考范圍時(shí)應(yīng)予以考慮。

不同年齡青少年血清P和ALP差異明顯，血清ALP在男女之間的差異亦非常顯著，而《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》中并沒有給予青少年人群的血清P和ALP參考范圍，因此臨床醫(yī)生在判讀青少年個(gè)體血清P和ALP結(jié)果時(shí)可能存在偏差。另外國(guó)內(nèi)基于大規(guī)模流行病學(xué)基礎(chǔ)上的青少年數(shù)據(jù)極少見，作為科技部科技基礎(chǔ)性工作專項(xiàng)項(xiàng)目資助課題的一部分，本研究避免了樣本量不足導(dǎo)致的數(shù)據(jù)偏差。

本研究初步建立了黑龍江地區(qū)健康青少年血清Ca、P和ALP的參考范圍，對(duì)于臨床醫(yī)生在臨床實(shí)踐中對(duì)青少年個(gè)體相關(guān)指標(biāo)的解釋、臨床治療方案的制定、流行病學(xué)研究和干預(yù)是非常有幫助的。但檢驗(yàn)項(xiàng)目的參考范圍可能會(huì)隨著檢驗(yàn)方法以及人群的不同而變化，實(shí)驗(yàn)室使用本研究結(jié)果時(shí)應(yīng)按照CLSI CA28 文件進(jìn)行驗(yàn)證［10］。

［1］Round JM，Butcher S，Steel R.Changes in plasma inorganic phosphorus and alkaline-phosphatase activity during adolescent growth spurt［J］.Ann Hum Biol，1979，6:129-136.

［2］Matkovic V，Ilich JZ.Calcium requirements for growth:are current recommendations adequate?［J］.Nutr Rev，1993，51:171-180.

［3］Burritt MF，Slockbower JM，F(xiàn)orsman RW，et al.Pediatric reference intervals for 19 biologic variables in healthy children［J］.Mayo Clin Proc，1990，65:329-336.

［4］Marwaha RK，Khadgawat R，Tandon N，et al.Reference intervals of serum calcium，ionized calcium，phosphate and alkaline phosphatase in healthy Indian school children and adolescents［J］.Clin Biochem，2010，43:1216-1219.

［5］Lockitch G，Halstead AC，Albersheim S，et al.Age-and sexspecificpediatric reference intervals for biochemistry analytes as measured withthe Ektachem-700 analyzer［J］.Clin Chem，1988，34:1622-1625.

［6］Yeh MH，Chen YH，Lee AJ，et al.A study of serum phosphorus and renal phosphate excretion in children of different age groups［J］.Zhonghua Min Guo Xiao Er Ke Yi Xue Hui Za Zhi，1991，32:303-313.

［7］Turan S，Topcu B，G?k?e，et al.Serum alkaline phosphatase levels in healthy children and evaluation of alkaline phosphatase z-scores in different types of rickets［J］.J Clin Res Pediatr Endocrinol，2011，3:7-11.

［8］Schiele F，Henny J，Hitz J，et al.Total bone and liver alkaline phosphatases in plasma:biological variations and reference limits［J］.Clin Chem，1983，29:634-641.

［9］曾潔，趙海艦，張傳寶，等.19項(xiàng)臨床生化檢驗(yàn)項(xiàng)目的分析前變異和個(gè)體內(nèi)生物學(xué)變異［J］.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2010，33:776-781.

［10］CLSI.Defining，establishing，and verifying reference intervals in the clinical laboratory;Approved Guideline-3rd Edition［S］.Wayne，PA:CLSI，2008.

Reference intervals of serum calcium，phosphate and alkaline phosphatase of healthy school children and adolescents in Heilongjiang province

CHENG Xin-qi1，CHENG Qian1，QIU Ling1，LIU Li1，LIU Qian1，HAN Shao-mei2，ZHU Guang-jin3*

（1.Dept.of Clinical Laboratory，Peking Union Medical College Hospital，Chinese Academy of Medical Sciences，Beijing 100730;
2.Dept.of Epidemic and Statistics，Institute of Basic Medical Sciences，Chinese Academy of Medical Sciences，Beijing 100005;
3.Dept.of Physiology and Pathophysiology，Beijing 100005，China）

ObjectiveTo analyze the serum calcium，phosphate and alkaline phosphatase level among apparently healthy school children and adolescents in Heilongjiang Province and establish the reference intervals in different gender and different age groups.MethodsRandom sample of 2 101 primary and secondary school students from 9 to 18-year-old was collected from different district of Heilongjiang Province including Harbin and Mudanjiang from July 2008 to June 2009.The fasting venous blood was collected and serum calcium，phosphate and alkaline phosphatase concentration was measured as soon as possible.After screening outlier individual，a total of 2 091 subjects were enrolled.The reference intervals of serum calcium，phosphate and alkaline phosphatase for healthy school children and adolescents were established by gender and age（P2.5 to P97.5）.ResultsThe change tendency of serum calcium，phosphate and alkaline phosphatase with age and sex were presented.All these parameters had shown inverse relationship with age and were significantly higher in boys than girls（P＜0.001）.Serum calcium，phosphate of both sexes and serum alkaline phosphatase of girls declined progressively with age.However，the highest alkaline phosphatase level was seen at 13 years in boys.Alkaline phosphatase showed a positive correlation with age before 13 years of age，but after that alkaline phosphatase started to decline.ConclusionsReference intervals of serum calcium，phosphate and alkaline phosphatase for healthy school children and adolescents in Heilongjiang Province in the age group of 9-18 years were presented，which supply good reference value for clinicians especially pediatricians to interpret the results of school children and adolescents and make decision.

healthy school children and adolescents;calcium;phosphate;alkaline phosphatase;reference interval

R466.11

A

10.16352/j.issn.1001-6325.2015.09.011

1001-6325（2015）09-1205-04

2015-05-25

2015-06-23

科技部科技基礎(chǔ)性工作專項(xiàng)（2006FY110300）