葉鴻雁，謝紅意，葛婷婷，樂旭波，張丹丹，樂群燕

·藥敏分析·

1 332株葡萄球菌的標(biāo)本分布及耐藥性分析

葉鴻雁*，謝紅意，葛婷婷，樂旭波，張丹丹，樂群燕

目的 了解我院葡萄球菌的臨床分布及對(duì)常用藥物的耐藥性，為臨床控制感染及經(jīng)驗(yàn)用藥提供有力依據(jù)。方法 收集2011-2013年我院分離的葡萄球菌，采用西門子MicroScan WalkAway40SI全自動(dòng)細(xì)菌鑒定藥敏分析系統(tǒng)進(jìn)行鑒定和藥敏試驗(yàn)，結(jié)果按CLSI M100-S23進(jìn)行判斷，采用WHONET 5.6軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果 3年中共檢出葡萄球菌1 332株，MRSA和MRCoNS的發(fā)生率分別為51.7% (372/720)和80.4% (492/612)，未發(fā)現(xiàn)對(duì)萬古霉素、利奈唑胺和達(dá)托霉素耐藥的葡萄球菌。結(jié)論 我院相關(guān)結(jié)果與全國(guó)耐藥監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)比較，有地區(qū)性差異，只有不斷提高監(jiān)測(cè)水平，合理選用抗菌藥物，才能減少耐藥菌的發(fā)生。

細(xì)菌耐藥；抗菌藥物；葡萄球菌

0 引言

近年來，隨著臨床介入性治療操作的增多和抗菌藥物的廣泛使用，葡萄球菌感染呈增多趨勢(shì)，目前，葡萄球菌感染在我院革蘭陽性菌感染中占首位，特別是耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(Methicillin-resistantStaphylococcusaureus，MRSA)，其高發(fā)病率和高死亡率備受關(guān)注[1]。筆者對(duì)我院2011-2013年葡萄球菌的耐藥監(jiān)測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，為臨床合理用藥提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株來源 我院臨床2011-2013年分離的1 332株非重復(fù)葡萄球菌。

1.1.2 儀器與試劑 采用西門子MicroScan WalkAway40SI全自動(dòng)細(xì)菌鑒定藥敏分析系統(tǒng)進(jìn)行鑒定與藥敏試驗(yàn)，所用板條為POS Combo Type 33復(fù)合板。

1.2 方法 菌株配置成0.5麥?zhǔn)蠞舛鹊木?，吸?00 μL菌液加入到含有PLURONIC表面活性劑的接種液，用RENOK接種器對(duì)POS Combo Type 33復(fù)合板進(jìn)行再水化，用MicroScan WalkAway40SI自動(dòng)測(cè)試系統(tǒng)孵育和讀取藥敏。質(zhì)控菌株為金黃色葡萄球菌ATCC29213和糞腸球菌ATCC29212。

1.3 結(jié)果判斷 根據(jù)美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)2013年版M100-S23進(jìn)行判讀[2]。

1.4 分析 采用WHONET 5.6軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果

2.1 細(xì)菌分布

2.1.1 細(xì)菌種類及數(shù)量 1 332株葡萄球菌中，最多為金黃色葡萄球菌54.0% (720/1 332)，其次為表皮葡萄球菌20.0% (267/1 332)和人葡萄球菌11.5% (153/1 332)，見表1。

2.1.2 標(biāo)本來源分布 金黃色葡萄球菌主要分離自呼吸道標(biāo)本(占57.4%)，其次為傷口和膿液標(biāo)本(占25.6%)；所有凝固酶陰性葡萄球菌(Coagulase-negativeStaphylococci，CONS)均來自住院和門急診患者的無菌部位，以血液標(biāo)本為主(占52.5%)，其次為傷口和膿液標(biāo)本(占20.4%)。見表2。

表1 1 332株葡萄球菌種類及數(shù)量統(tǒng)計(jì)

表2 1 332株葡萄球菌標(biāo)本來源分布

2.2 葡萄球菌屬對(duì)抗菌藥物的耐藥性

2.2.1 金黃色葡萄球菌對(duì)抗菌藥物的耐藥性 720株金黃色葡萄球菌中，MRSA發(fā)生率為51.7% (372/720)，其中ICU患者的MRSA發(fā)生率為74.5% (114/153)，非ICU住院患者的MRSA發(fā)生率為47.8% (258/540)，見表3。

表3 MRSA科室和標(biāo)本來源分布(株，%)

由表3可見，MRSA分布在多個(gè)病區(qū)，其中以ICU (占39.8%)和神經(jīng)內(nèi)科(占14.5%)居多；呼吸道標(biāo)本所占比例最高，為81.2% (302/372)，其次為傷口和膿液標(biāo)本，占12.9% (48/372)。

金黃色葡萄球菌對(duì)氯霉素的耐藥率約為12%，對(duì)利福平、復(fù)方新諾明、奎奴普丁/達(dá)福普汀的耐藥率均在10%以下。MRSA萬古霉素MIC范圍為0.25～2 mg/L，未發(fā)現(xiàn)萬古霉素中介和耐藥的金黃色葡萄球菌，未發(fā)現(xiàn)對(duì)利奈唑胺和達(dá)托霉素耐藥的金黃色葡萄球菌。

2.2.2 凝固酶陰性葡萄球菌對(duì)抗菌藥物的耐藥性 CoNS中耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(Methicillin-resistant coagulase-negativeStaphylococci，MRCoNS)的發(fā)生率為80.4% (492/612)，血液標(biāo)本和非血液標(biāo)本MRCoNS發(fā)生率分別為81.5% (318/390)和78.4% (174/222)。未發(fā)現(xiàn)對(duì)萬古霉素、利奈唑胺、達(dá)托霉素、奎奴普丁/達(dá)福普汀耐藥的CoNS，對(duì)所測(cè)藥物的耐藥率MRCoNS均高于甲氧西林敏感CONS，見表4。

表4 抗菌藥物對(duì)葡萄球菌的體外抗菌活性

注：R.耐藥，I.中介，S.敏感

3 討論

目前，金黃色葡萄球菌引起的院內(nèi)感染已成為患者發(fā)病和致死的主要原因[3-4]。從表2可見，我院的金黃色葡萄球菌主要來自呼吸道、傷口和膿，這與陳江華等[5]研究結(jié)果相似。馬序竹等[6]通過細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)，發(fā)現(xiàn)凝固酶陰性葡萄球菌為血標(biāo)本來源最常見細(xì)菌，我院存在相同情況，近年來，由于留置血管內(nèi)導(dǎo)管使用的增加，導(dǎo)管相關(guān)性感染呈上升趨勢(shì)，凝固酶陰性葡萄球菌是重要病原菌，而血液標(biāo)本來源的CoNS中，MRCoNS發(fā)生率高達(dá)81.5%。另外，取自內(nèi)置靜脈導(dǎo)管的血標(biāo)本比靜脈穿刺所獲得的血培養(yǎng)物的污染率更高[7]。因此，采取有效措施減少導(dǎo)管相關(guān)感染的發(fā)生，加強(qiáng)血培養(yǎng)標(biāo)本采集操作培訓(xùn)尤為重要。

我院MRSA和MRCoNS的發(fā)生率分別為51.7%和80.4%，高于郭宇等[8]報(bào)道的2012年全國(guó)監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)(43.6%、75.7%)。我院ICU的MRSA發(fā)生率為74.5%，高于非ICU病房(47.8%)，表明ICU應(yīng)加強(qiáng)感染控制干預(yù)措施。我院MRSA呼吸道標(biāo)本占88.2%。上呼吸道病原體的定植是一個(gè)普遍規(guī)律，而鼻前庭是MRSA定植的常見部位[9]，陳健等[10]研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞壁錨定蛋白SasX主要存在于醫(yī)院環(huán)境內(nèi)致病性的金黃色葡萄球菌中，是金黃色葡萄球菌在醫(yī)院環(huán)境內(nèi)持續(xù)感染毒力因子之一。因此，從感染控制的角度，定植也使金黃色葡萄球菌在醫(yī)護(hù)人員與患者之間得以傳播，應(yīng)采取積極有效的措施加強(qiáng)管理。

萬古霉素是臨床治療MRSA感染的首選藥。郭宇等[8]在2012年全國(guó)10大城市16家教學(xué)醫(yī)院的監(jiān)測(cè)中，發(fā)現(xiàn)1株對(duì)萬古霉素中介的金黃色葡萄球菌(VISA)，MIC值為3 μg/mL。我院金黃色葡萄球菌萬古霉素MIC范圍為0.25～2 mg/L，雖然未發(fā)現(xiàn)VISA，但有MIC為1～2 mg/L的菌株，其中可能存在異質(zhì)性萬古霉素中介的金黃色葡萄球菌(Heterogeneous vancomycin-intermediateStaphylococcusaureus，hVISA)。hVISA是指金黃色葡萄球菌的母代菌株對(duì)萬古霉素敏感(MIC≤2 mg/L)，而子代卻含有少量能夠在萬古霉素≥4 mg/L的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的耐藥亞群。有研究證明，hVISA是VISA的前體[11]，與萬古霉素治療失敗相關(guān)[12]。因此，微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)加強(qiáng)對(duì)hVISA的監(jiān)測(cè)，當(dāng)糖肽類藥物治療無效時(shí)，可考慮使用利奈唑胺和達(dá)托霉素。

微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)臨床常見細(xì)菌進(jìn)行長(zhǎng)期動(dòng)態(tài)的耐藥監(jiān)測(cè)，同時(shí)，臨床一線加強(qiáng)預(yù)防感染和感染控制措施，職能部門提升合理用藥管理水平，才能有效控制耐藥菌的發(fā)生。

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Distribution and drug resistance of 1 332 strains ofStaphylococci

YE Hong-yan*,XIE Hong-yi,GE Ting-ting,LE Xu-bo,ZHANG Dan-dan,LE Qun-yan

(The People’s Hospital of Beilun District,Ningbo 315800,China)

Objective To investigate the distribution and the common drug-resistance inStaphylococcispecies and provide scientific evidences for controlling and treating in clinic.Methods TheStaphylococcispecies were collected from clinical samples in our hospital from 2011 to 2013.The identification and antibiotic testing were carried out using MicroScan WalkAway 40 system,and Clinical and Laboratory Standards Institute M100-S23 as assessment criteria.Date was analyzed using WHONET 5.6 software.Results 1 332 strains ofStaphylococcispecies were detected.The prevalence of methicillin-resistantStaphylococcusaureus(MRSA) and methicillin-resistant coagulase-negativeStaphylococci(MRCoNS) were 51.7% (372/720),80.4% (492/612) respectively.AllStaphylococciisolates were susceptible to vancomycin,linezolid and daptomycin.Conclusion The rates of antimicrobial resistance ofStaphylococcispecies in our hospital are different from national data.To improve the level of bacterial monitoring,using antimicrobial drugs rationally and control nosocomial infections strictly,is important to reduce the incidence of drug resistance.

Antimicrobial resistance;Antimicrobial drugs;Staphylococci

2014-06-04

寧波市北侖區(qū)人民醫(yī)院，浙江 寧波 315800

*通信作者

10.14053/j.cnki.ppcr.201502026