牛恒立，趙國彪，馬中興，陳曉東，白雪紅

1蘭州大學(xué)第二醫(yī)院，甘肅 蘭州 730030；2蘭州大學(xué)藥學(xué)院；3甘肅省秦安縣人民醫(yī)院；4甘肅藥業(yè)信息研究所；5甘肅省人民醫(yī)院

接骨丹對大鼠脛骨骨折愈合療效的影像學(xué)研究

牛恒立1，趙國彪2，馬中興3，陳曉東4，白雪紅5

1蘭州大學(xué)第二醫(yī)院，甘肅 蘭州 730030；2蘭州大學(xué)藥學(xué)院；3甘肅省秦安縣人民醫(yī)院；4甘肅藥業(yè)信息研究所；5甘肅省人民醫(yī)院

目的：觀察接骨丹對于骨折愈合及骨形成的影響。方法：采用開放性骨折模型制作方法制作大鼠骨缺損模型，通過拍攝脛骨X光片，并根據(jù)骨折肢X片評分標(biāo)準(zhǔn)，對各組大鼠在不同時間段進(jìn)行相應(yīng)的評分。在此評分基礎(chǔ)上，考察接骨丹對于骨折愈合及骨形成的影響。結(jié)果：給藥組相較于空白組骨缺損部位骨痂生成良好、骨缺損明顯減小、骨折肢X線片評分明顯高于空白對照組（P＜0.05）。 結(jié)論：接骨丹對于骨折愈合及骨形成有促進(jìn)作用。

接骨丹；脛骨；骨損傷；骨缺損；X線片。

骨缺損指骨的結(jié)構(gòu)完整性被破壞，是臨床常見病。其典型的缺損局部臨床表現(xiàn)，結(jié)合X線檢查，即可明確診斷[1]。較小的骨缺損（通常指8mm以下），對于一個健康的非吸煙者來說，有可能自行愈合；但骨缺損過大，或者是在較小的骨頭上的骨缺損，很難完全愈合[2]。甘肅民間中藥接骨丹[3]由西藏山溪鯢組成，可促進(jìn)細(xì)胞增殖、成骨性分化，提高堿性磷酸酶活性、鈣鹽沉積量、Ι型膠原含量、骨鈣素含量和鈣化結(jié)節(jié)數(shù)，口服后的代謝產(chǎn)物可刺激大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖，并能促進(jìn)其成骨性分化[4]。本研究通過大鼠開放型骨折模型制作方法制作骨損傷模型，同時通過此模型考察接骨丹對于骨折愈合及骨形成的促進(jìn)作用。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器、設(shè)備 德國L E ICA R M-2015生物組織切片機，O l ym p u s BX41顯微攝影系統(tǒng)，M i as病理圖像分析系統(tǒng)。實驗所用BM P-2兔抗鼠多克隆抗體為北京博奧森生物工程有限公司提供，即用型S A B C免疫組化試劑盒為福州邁新生物公司提供。

1.1.2 動物 S D大鼠40只，雌雄各半，（230± 50）g，購自于甘肅中醫(yī)藥大學(xué)S P F級動物實驗中心，動物質(zhì)量合格證號：0001112。

1.1.3 藥物 接骨丹（西藏山溪鯢），購自于甘肅省渭源縣黃香溝羅家磨，經(jīng)定西市藥檢所鑒定；鹽酸氯胺酮注射液(福建吉田藥業(yè)有限公司，批號：110530)。

1.1.4 藥物溶液配制 稱取曬干研磨均勻的西藏山溪鯢適量，取生理鹽水適量溶解，配制成0.025 g/mL的接骨丹混懸液。

1.2 方法

1.2.1 造模[3]各組大鼠腹腔注射氯胺酮（20m g/kg），待麻醉后，仰臥固定、對左后肢脛骨處進(jìn)行脫毛處理、消毒，于左后肢脛骨下端切開1.5~2 cm切口，分離肌肉，避免血管神經(jīng)損傷，暴露脛骨，用專用電鉆于脛骨中端磨出寬4 mm深達(dá)髓腔骨缺損，逐層縫合，傷口不包扎不固定[5-7]，每天消毒，7天后分籠飼養(yǎng)。

1.2.2 分組 將造模成功大鼠隨機分為2組：治療組和空白對照組，每組20只。治療組大鼠經(jīng)灌胃給予治療量接骨丹（0.25 g/kg），2次/d，連續(xù)給藥28天，空白對照組灌服2mL生理鹽水。

1.2.3 影像學(xué)檢查 于術(shù)后第4、7、14、21、28天隨機在各組選取4只大鼠（雌雄各半）進(jìn)行影像學(xué)檢查。

1.2.4 影像學(xué)檢查條件 影像學(xué)檢查在63 k v、374mA、22mses、8.1mAs的條件下進(jìn)行X線掃描拍片。

1.2.5 骨損傷X片評分 骨損傷的愈合情況根據(jù)影像學(xué)檢查結(jié)果，按下述標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評分[8-10]：1）錯位：已缺損脛骨無錯位包括錯位＜0.1 cm的得1分；有錯位包括骨折斷端錯位未超過其斷端的1/2或骨折端輕度成角的得0分。2）骨缺損：已缺損脛骨缺損部位部分模糊或消失的得1分；未有明顯變化的得0分。3）連接：已缺損脛骨骨折端連接成一整體的得1分；未連接的得0分。4）腓骨：腓骨未斷裂或斷裂后連接的得1分；腓骨斷裂的得0分。5）愈合：已缺損脛骨未愈合包括無內(nèi)外骨痂或骨折縫依舊的得0分；骨折愈合包括有內(nèi)外輕度骨痂改變，同時骨折縫變淺或模糊的得1分。

2 結(jié)果

2.1 接骨丹對大鼠脛骨骨折X線片評分值的影響 在給予藥物治療第4、7天后骨缺損清晰可見，同時空白對照組骨缺損亦未有任何變化2組相比較無顯著性差異（P＞0.05）；在給藥14天給藥組骨折斷端有大量骨痂生成骨缺損開始明顯變小，空白對照組雖然也有骨痂生成但骨缺損變化不大，兩者存在顯著性差異（P＜0.05）；給藥21天后骨缺損進(jìn)一步變小甚至消失，相比較空白對照組骨缺損的變化不明顯；給藥28天后骨缺損脛骨基本連接成一個整體，骨愈合顯著，空白對照組骨缺損變小，但骨愈合現(xiàn)象明顯無給藥組顯著，兩者之間存在明顯差異（P＜0.05）。見表1。

表1 接骨丹對大鼠脛骨骨折X線片評分的影響

3 討論

中藥治療骨折愈合已在臨床實踐中證明有一定的優(yōu)勢，中醫(yī)認(rèn)為“跌打損傷皆瘀血在內(nèi)而不散也，血不活則瘀不能去，瘀不去則折不能續(xù)”，肝失血養(yǎng)則骨折愈合得較為緩慢。而甘肅民間中藥接骨丹在廣大勞動人民中就是作為接骨續(xù)筋的藥物，且可以用來養(yǎng)肝。X線檢查可以較好地反應(yīng)骨折愈合情況。所以本實驗中我們采用X線檢查方法來對各組大鼠的骨損傷愈合及治療效果進(jìn)行評分。從研究結(jié)果我們可以得出接骨丹能明顯改善骨折愈合情況，提高影像學(xué)檢查評分，大大縮短骨折的愈合時間，促進(jìn)骨折的愈合。同時，隨著給藥時間的增加，骨損傷的改善變得尤為明顯。此項研究為臨床使用、研究接骨丹治療骨損傷提供實驗基礎(chǔ)和經(jīng)驗，而在治療骨損傷中哪種主要成分發(fā)揮作用，以及作用的部位、靶點、通路，是我們以后研究的方向和重點。

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Study on ClinicalEffectsof JieGu Pills in Healing Ratw ith Tibial Fracture from Im aging

NIU Hengli1,ZHAOGuobiao2,MA Zhongxing3,CHEN Xiaodong4*,BAIXuehong5
1 Lanzhou University Second Hospital,Lanzhou 730030,China; 2 Pharmacy College of Lanzhou University;3 Qin’an County People’s Hospital; 4 Gansu Pharmaceutical Information Institute;5 Gansu Provincial Hospital

Objective:To survey the effects of JieGu pills on the healing of bone fracture and bone formation. Methods:Ratmodel w ith bone defectwas prepared by themethod of open fracturemodelmaking,the rats in the groupswere scaled in different times by taking tibial X ray and evaluation standards of bone fracture limb X ray.On the foundation,to investigate the effects of JieGu pill on the healing of bone fracture and bone formation.Results: Compared w ith the blank group,themedication group showed better formation of callus and lessbone defects,higher than blank control group in the scales of bone fracture limb X ray obviously(P＜0.05).Conclusion:JieGu pill could promote the healing ofbone fracture and bone formation.

JieGu pill;tibia;bone injury;bone defect;X ray

R683

B

1004-6852(2015)08-0175-02

2014-11-18

牛恒立，男，大學(xué)本科，副主任藥師，研究方向，中藥藥理學(xué)。

陳曉東，男，大學(xué)本科，主管藥師，研究方向，中藥信息化。