李光福， 朱麗巖, 王曉敏， 韓 萃， 江田田

(中國(guó)海洋大學(xué)海洋生命學(xué)院，山東 青島 266003)

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溫度和鹽度對(duì)指狀偽鏢水蚤孵化及產(chǎn)糞的影響?

李光福， 朱麗巖??, 王曉敏， 韓 萃， 江田田

(中國(guó)海洋大學(xué)海洋生命學(xué)院，山東 青島 266003)

橈足類是海洋浮游動(dòng)物的重要組成部分，而指狀偽鏢水蚤分布廣泛，生殖掛卵，易于觀察，被選為實(shí)驗(yàn)對(duì)象。本研究設(shè)定了一系列溫度、鹽度梯度，對(duì)指狀偽鏢水蚤的溫度、鹽度適應(yīng)性進(jìn)行了探討。結(jié)果：溫度對(duì)雌性指狀偽鏢水蚤產(chǎn)糞粒數(shù)、卵孵化率及孵化時(shí)間均有顯著影響(P<0.05)。在10～35 ℃范圍內(nèi)，隨著溫度的升高，卵孵化率也隨著升高，在20 ℃時(shí)達(dá)到最大，隨后又有所下降；孵化時(shí)間呈現(xiàn)出明顯的縮短趨勢(shì)；24 h產(chǎn)糞粒數(shù)隨著溫度的升高呈現(xiàn)出先逐漸增加后又略微降低的趨勢(shì)。鹽度對(duì)雌性指狀偽鏢水蚤卵孵化率、孵化時(shí)間及產(chǎn)糞粒數(shù)均有顯著影響(P<0.05)。在鹽度為10～40范圍內(nèi)，隨著鹽度的升高，孵化率逐漸下降，孵化時(shí)間逐漸緩慢延長(zhǎng)，24 h產(chǎn)糞粒數(shù)總體呈下降趨勢(shì)。據(jù)此可以得出：指狀偽鏢水蚤的最適繁育溫度為20 ℃，最適繁育鹽度為10,并且與鹽度相比溫度對(duì)其影響更加明顯。

指狀偽鏢水蚤； 溫度； 鹽度； 孵化率； 孵化時(shí)間

在海洋中，浮游動(dòng)物是一類缺乏發(fā)達(dá)的運(yùn)動(dòng)器官，隨波逐流，營(yíng)浮游生活的動(dòng)物，包括無(wú)脊椎動(dòng)物的大部分門類如原生動(dòng)物、輪蟲(chóng)、枝角類和橈足類[1]。作為浮游動(dòng)物的一員，橈足類的種類多、數(shù)量大和分布廣的特點(diǎn)決定了它們?cè)诤Ｑ蟾∮蝿?dòng)物群落中的優(yōu)勢(shì)地位，同時(shí)橈足類也是重要的食物鏈的傳遞者，其種群動(dòng)態(tài)變化直接影響著海洋生態(tài)系統(tǒng)的初級(jí)生產(chǎn)力的節(jié)律、規(guī)模和歸宿[2]。據(jù)FAO(2000)估計(jì)，1999年海洋漁業(yè)產(chǎn)業(yè)中，0.92億t的漁獲量是以天然橈足類餌料生物為食的魚(yú)類[3]。橈足類在近岸海域生態(tài)系統(tǒng)中起著承上啟下的作用，其生產(chǎn)力的高低和種群群落的大小，對(duì)整個(gè)海洋生態(tài)系統(tǒng)的生態(tài)容納量、生物資源補(bǔ)充量都有著十分重要的影響,直接反映生態(tài)環(huán)境質(zhì)量的好壞[4]。

多年以來(lái)，水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)多以輪蟲(chóng)、鹵蟲(chóng)等作為魚(yú)、蝦育苗的開(kāi)口餌料，但輪蟲(chóng)、鹵蟲(chóng)等并非適用于所有經(jīng)濟(jì)魚(yú)、蝦幼苗的培育,原因是輪蟲(chóng)和鹵蟲(chóng)營(yíng)養(yǎng)供給不足，缺乏某些必需脂肪酸，特別是廿碳五烯酸(eicosapentaenoic acid, EPA)和廿二碳六烯酸(docosahexaenoic acid, DHA)[5]。Watanabe等曾指出鹵蟲(chóng)的營(yíng)養(yǎng)成分極不穩(wěn)定，甚至缺乏EPA和DHA這2種重要的魚(yú)類必需脂肪酸，雖然通過(guò)在鹵蟲(chóng)餌料中添加營(yíng)養(yǎng)成分能使鹵蟲(chóng)也富含EPA和DHA，但含量極不穩(wěn)定[6]。橈足類個(gè)體很小，成體一般僅1～3 mm，無(wú)節(jié)幼蟲(chóng)不超過(guò)0.5 mm。而且，橈足類從無(wú)節(jié)幼蟲(chóng)Ⅰ期發(fā)育到成體要經(jīng)過(guò)12個(gè)發(fā)育期，其整個(gè)發(fā)育過(guò)程中可為魚(yú)、蝦幼體的不同發(fā)育期提供了寬幅餌料。更為重要的是，橈足類富含的EPA和DHA多分布于膜脂中，利于魚(yú)蝦幼體的吸收，這不僅對(duì)海洋魚(yú)蝦類生長(zhǎng)、存活和發(fā)育非常有利，而且可以幫助其提高免疫力[7-9]。

然而作為魚(yú)類活體餌料，橈足類的生長(zhǎng)、繁殖和寄生物的情況都需要細(xì)致的研究。隨著研究的深入，有研究發(fā)現(xiàn)橈足類在幼體和成體期所需的環(huán)境條件是不同的，生長(zhǎng)和繁殖所需的條件也有所差別[10-12]。其中溫度和鹽度是影響橈足類生存繁殖的重要因素，對(duì)于其物質(zhì)代謝、卵的孵化率和孵化時(shí)間都有極其重要的影響[13-14]。在適溫范圍內(nèi)，較高的水溫能促進(jìn)橈足類繁殖，增加懷卵次數(shù)和個(gè)數(shù)以及縮短產(chǎn)卵周期與孵化時(shí)間，但如果溫度過(guò)高，超過(guò)適溫范圍，就會(huì)使橈足類死亡率增大[15]。過(guò)高或過(guò)低的鹽度都會(huì)引起橈足類原生質(zhì)的變質(zhì)而導(dǎo)致生物的死亡。不同種類，甚至同種的不同發(fā)育期及性別都有一定的適鹽范圍[16]。Cervetto等研究發(fā)現(xiàn)克氏紡錘水蚤(Acartiaclausi)最大耐鹽度為65，最小鹽度為1，最適鹽度為24～30[17]。在對(duì)中華哲水蚤(Calanussinicus)、瘦尾胸刺水蚤(Centropagestenuiremis)和特氏歪水蚤(Tortanusderjugini)3種動(dòng)物研究中觀察到：特氏歪水蚤耐鹽最強(qiáng)，中華哲水蚤最弱，且后者的雄體比雌體更弱。Drillet等指出，溫度的變化可改變橈足類對(duì)鹽度的耐受范圍[18]。黃加棋等研究報(bào)道了瘦尾胸刺水蚤在高溫下耐高鹽度，在低溫下耐低鹽度，越接近自然海區(qū)鹽度對(duì)橈足類越有利，如火腿許水蚤(Schmackeriapoplesia)在接近自然海區(qū)的鹽度中有最大的存活率[19-20]。

指狀偽鏢水蚤(Pseudodiaptomidaeinopinus)隸屬于哲水蚤目(Calanoida)偽鏢水蚤科(Pseudodiaptomidae)，分布于日本、俄羅斯以及中國(guó)大陸的廣東、福建、浙江、江蘇、上海、安徽、山東、河北、天津等地，多生活于淡水、咸淡水和低鹽度海水中。指狀偽鏢水蚤豐度主要受chl-a濃度和鹽度條件的影響，在秋季11月份中鹽和高鹽條件下時(shí)有最大峰值，而此時(shí)的Chl-a濃度全年第二高，春季和秋季時(shí)出現(xiàn)大量的掛卵雌體且秋季雌性個(gè)體產(chǎn)卵率最高[33-35]。本文擬通過(guò)研究溫度和鹽度對(duì)指狀偽鏢水蚤產(chǎn)糞粒數(shù)、卵孵化率及卵孵化時(shí)間的影響，確定指狀偽鏢水蚤實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的最佳溫度和鹽度條件，以期為該橈足類的大量連續(xù)培養(yǎng)奠定基礎(chǔ)，同時(shí)也為研究指狀偽鏢水蚤作為養(yǎng)殖魚(yú)類仔稚魚(yú)開(kāi)口餌料提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 餌料藻的培養(yǎng)

用作餌料的球等鞭金藻(Isochrysisgalbana)取自于中國(guó)海洋大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院藻種室，采用不含硅鹽的f/2培養(yǎng)基，其中培養(yǎng)鹽度為30±0.5，溫度為(20±1)℃，光照強(qiáng)度為1 200 lx，光照周期12 hL∶12 hD。用來(lái)培養(yǎng)的海水，要經(jīng)過(guò)孔徑為0.45和0.22 μm的濾膜分別過(guò)濾一遍，然后加入f/2培養(yǎng)基，在高壓滅菌鍋中120 ℃條件下滅菌20 min，待其冷卻至常溫后使用。

1.2 指狀偽鏢水蚤的采集與培養(yǎng)

實(shí)驗(yàn)所用的指狀偽鏢水蚤于2013年11月初采集于山東省青島市嶗山區(qū)南窯蝦池，溫度17 ℃，鹽度15。采集的樣品在2h內(nèi)帶回實(shí)驗(yàn)室，挑出懸浮物和其他雜質(zhì)，然后置于3 000 mL的燒杯中，為保證馴化鹽度條件與采樣時(shí)自然環(huán)境條件的一致性，加入充分曝氣的鹽度為15的海水，放入光照培養(yǎng)箱中，溫度為(15±1)℃，光照強(qiáng)度為1 200 lx，馴化2周以上。實(shí)驗(yàn)中所用的海水為新鮮海水經(jīng)孔徑為0.45 μm的濾膜過(guò)濾1遍，并充分曝氣。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

實(shí)驗(yàn)前一周挑取健康活潑的成體指狀偽鏢水蚤1 000只置于與實(shí)驗(yàn)環(huán)境相同條件下馴化培養(yǎng)7 d，然后挑取健康活潑的成體指狀偽鏢水蚤約600只，置于2 L燒杯中，讓其自由交配。每隔2 h觀察一次，記錄雌性個(gè)體的掛卵時(shí)間,并在顯微鏡下計(jì)數(shù)每個(gè)雌體掛卵的個(gè)數(shù)(E)。

溫度實(shí)驗(yàn)中每個(gè)平行組挑取30個(gè)雌性掛卵個(gè)體分別分放于30個(gè)盛有10 mL鹽度為15、球等鞭金藻濃度為105ind/mL海水的小燒杯中，然后放入設(shè)定好實(shí)驗(yàn)溫度的不同培養(yǎng)箱中。24 h后將掛卵雌體挑出放入裝有新鮮海水和餌料的小燒杯中，原燒杯置于解剖鏡下計(jì)數(shù)24 h內(nèi)的總產(chǎn)糞粒數(shù)。此后每隔2 h觀察1次，記錄雌性掛卵個(gè)體卵全部孵化的時(shí)間。待卵全部孵化后，將小燒杯中的內(nèi)容物使用魯哥試劑固定，在解剖鏡下觀察并記錄其內(nèi)無(wú)節(jié)幼蟲(chóng)個(gè)數(shù)(N)。

鹽度實(shí)驗(yàn)中每個(gè)平行組挑取30個(gè)雌性掛卵個(gè)體分別分放于30個(gè)盛有10 mL不同鹽度的、球等鞭金藻濃度為105ind/mL海水的小燒杯中，置于20 ℃培養(yǎng)箱中。24 h后將掛卵雌體挑出放入裝有新鮮海水和餌料的小燒杯中，原燒杯置于解剖鏡下計(jì)數(shù)24 h產(chǎn)糞粒數(shù)。此后每隔2 h觀察一次，記錄雌性掛卵個(gè)體卵全部孵化時(shí)的時(shí)間。待卵全部孵化后，將小燒杯中的內(nèi)容物使用魯哥試劑固定，在解剖鏡下觀察并記錄其內(nèi)無(wú)節(jié)幼蟲(chóng)個(gè)數(shù)(N)。實(shí)驗(yàn)中鹽度低于30的海水是由過(guò)濾海水加蒸餾水獲得，鹽度高于30的海水是由過(guò)濾海水加海結(jié)晶獲得。

實(shí)驗(yàn)過(guò)程中每24 h更換1/2與原實(shí)驗(yàn)條件相同的加入新鮮藻液的海水，保證海水的清潔和餌料供應(yīng)的充足。每8 h加入充分曝氣的蒸餾水至初始海水體積以彌補(bǔ)由于水分蒸發(fā)造成的損失。

溫度梯度：實(shí)驗(yàn)設(shè)置10、15、20、25、30、35 ℃共6個(gè)溫度梯度；鹽度梯度：實(shí)驗(yàn)設(shè)置10、20、25、30、35、40共6個(gè)鹽度梯度。每個(gè)梯度設(shè)置30個(gè)平行組。光照強(qiáng)度為1 200 lx，周期為12 hL∶12 hD。

1.4 計(jì)算方法

橈足類孵化率R計(jì)算公式為

R=N/E×100%。

式中：N為孵化幼體數(shù)；E為掛卵雌體的帶卵個(gè)數(shù)。

1.5 數(shù)據(jù)分析

本實(shí)驗(yàn)的所有數(shù)據(jù)均運(yùn)用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，方法為One-Way ANOVA，顯著性水平α=0.05。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 溫度對(duì)指狀偽鏢水蚤產(chǎn)糞及孵化的影響

2.1.1 溫度對(duì)指狀偽鏢水蚤卵孵化率的影響 在10～35 ℃范圍內(nèi)，指狀偽鏢水蚤的孵化率隨溫度的升高呈現(xiàn)出先升高后降低的趨勢(shì)。從10 ℃時(shí)的73.2%升高到15 ℃時(shí)的78.6%，然后在20 ℃時(shí)快速升高達(dá)到最大孵化率96.8%，其后在25 ℃時(shí)出現(xiàn)較大下降，孵化率只有64.5%，30和35 ℃的孵化率雖略有上升但仍然較低，分別為67.5%和74.5%。

通過(guò)SPSS軟件對(duì)各組數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)顯示F=6.360，P<0.05，表明溫度對(duì)指狀偽鏢水蚤孵化率的影響顯著。通過(guò)組間兩兩比較顯示，指狀偽鏢水蚤20 ℃時(shí)的卵孵化率與10、15、25、30、35 ℃時(shí)的孵化率差異顯著(P<0.05)；10、15、35 ℃分別與25、30 ℃之間的孵化率差異顯著(P<0.05)；其他組之間兩兩進(jìn)行比較，不存在顯著差異(P>0.05)。

(組間上標(biāo)無(wú)相同字母表示差異顯著，有相同字母則差異不顯著。The different letters mean there are marked differences between the groups.The same letters mean there are no significant differences.)

圖1 不同溫度下指狀偽鏢水蚤的孵化率
Fig.1 Hatching rate ofP.inopinusat different temperatures

2.1.2 溫度對(duì)指狀偽鏢水蚤卵孵化時(shí)間的影響 在10～35 ℃范圍內(nèi)，指狀偽鏢水蚤的孵化時(shí)間隨著溫度的升高呈現(xiàn)出明顯縮短的趨勢(shì)，其中35 ℃時(shí)的平均孵化時(shí)間略長(zhǎng)于30 ℃。溫度為10 ℃時(shí)，指狀偽鏢水蚤的平均孵化時(shí)間長(zhǎng)達(dá)175 h，溫度升高到15 ℃時(shí)，平均孵化時(shí)間迅速縮短到77.7 h，之后隨著溫度的繼續(xù)升高，孵化時(shí)間仍繼續(xù)下降，但相對(duì)較緩一些。用最小二乘法擬合的公式顯示，指狀偽鏢水蚤卵的孵化時(shí)間隨溫度的變化符合指數(shù)函數(shù)，且R2為0.975 7，擬合度較高。

對(duì)各組數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，F(xiàn)=174.504，P<0.05，表明溫度對(duì)指狀偽鏢水蚤卵孵化時(shí)間的長(zhǎng)短影響顯著。其中通過(guò)組間兩兩比較顯示，10 ℃組與15、20、25、30、35 ℃組之間差異極顯著(P<0.01)，15℃組與20、25、30、35 ℃之間的差異均顯著(P<0.05)，而20、25、30、35 ℃組之間的孵化時(shí)間沒(méi)有顯著差異(P>0.05)。

圖2 不同溫度下指狀偽鏢水蚤卵的孵化時(shí)間

2.1.3 溫度對(duì)指狀偽鏢水蚤24 h產(chǎn)糞粒數(shù)的影響 在10～35 ℃范圍內(nèi)，指狀偽鏢水蚤的24 h產(chǎn)糞粒數(shù)隨著溫度的升高呈現(xiàn)逐漸增加后又降低的趨勢(shì)。從10 ℃開(kāi)始，隨著溫度的升高指狀偽鏢水蚤的24 h產(chǎn)糞粒數(shù)也逐漸升高，在30 ℃時(shí)24 h產(chǎn)糞粒數(shù)達(dá)到最大值154.6粒。其后，24 h產(chǎn)糞粒數(shù)又有所下降，在35 ℃時(shí)為118粒。

通過(guò)SPSS軟件對(duì)各組數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)顯示F=17.696，P<0.05，表明溫度對(duì)指狀偽鏢水蚤24 h產(chǎn)糞粒數(shù)影響顯著。通過(guò)組間兩兩比較顯示，10 ℃組與15、20、25、30、35 ℃組間差異極顯著(P<0.01)，15 ℃組與20、25、30、35 ℃之間的差異均極顯著(P<0.01)，20 ℃組與25、30、35 ℃組之間差異顯著(P<0.05)，30 ℃組與25、35 ℃組之間差異顯著，而25與35 ℃組之間的孵化時(shí)間沒(méi)有顯著差異(P>0.05)。

(組間上標(biāo)無(wú)相同字母表示差異顯著，有相同字母則差異不顯著。The different letters mean there are marked differences between the groups.The same letters mean there are no significant differences.)

圖3 不同溫度下指狀偽鏢水蚤的產(chǎn)糞粒數(shù)
Fig.3 Feces production ofP.inopinusat different temperatures

2.2 鹽度對(duì)指狀偽鏢水蚤產(chǎn)糞及孵化的影響

2.2.1 鹽度對(duì)指狀偽鏢水蚤卵孵化率的影響 在鹽度為10～40范圍內(nèi)，指狀偽鏢水蚤的卵孵化率隨著鹽度的升高呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢(shì)。鹽度10時(shí)孵化率最大為75.1%，鹽度15和20時(shí)的孵化率略微下降分別為74.4%和69.7%，其后當(dāng)鹽度超過(guò)25時(shí)孵化率有較大下降，鹽度為25、30和35時(shí)的孵化率分別為55%、56.8%和47.5%，在鹽度為40時(shí)孵化率為0，說(shuō)明指狀偽鏢水蚤不能耐受此鹽度。

對(duì)各組數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)顯示F=16.359，P<0.05，表明鹽度對(duì)指狀偽鏢水蚤孵化率的影響顯著。其中通過(guò)組間數(shù)據(jù)兩兩比較顯示，鹽度為40時(shí)偽鏢水蚤的孵化率與其他鹽度水平下的孵化率差異極顯著(P<0.01)；鹽度10、15、20分別與25、30、35組間孵化率差異顯著(P<0.05)；其他組之間兩兩進(jìn)行比較，不存在顯著差異(P>0.05)。

(組間上標(biāo)無(wú)相同字母表示差異顯著，有相同字母則差異不顯著。The different letters mean there are marked differences between the groups.The same letters mean there are no significant differences.)

圖4 不同鹽度下指狀偽鏢水蚤的孵化率
Fig.4 Hatching rate ofP.inopinusat different salinities

2.2.2 鹽度對(duì)指狀偽鏢水蚤卵孵化時(shí)間的影響 在鹽度為10～35范圍內(nèi)，指狀偽鏢水蚤的孵化時(shí)間隨鹽度的升高逐漸增加。從鹽度為10時(shí)的40 h，逐漸增加到鹽度30時(shí)的47.8 h，當(dāng)鹽度達(dá)到35時(shí)，其孵化時(shí)間迅速增加到76.9 h，在鹽度為40時(shí)，指狀偽鏢水蚤不能耐受此鹽度，全部死亡。用最小二乘法擬合的公式顯示，指狀偽鏢水蚤卵的孵化時(shí)間隨鹽度的變化為一元二次函數(shù)，但是R2為0.875 5，擬合度較差，說(shuō)明此函數(shù)并不完全適用于鹽度對(duì)其孵化時(shí)間影響的規(guī)律。

對(duì)各組數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)顯示F=8.025，P<0.05，表明鹽度對(duì)指狀偽鏢水蚤孵化時(shí)間影響顯著。其中通過(guò)組間數(shù)據(jù)兩兩比較顯示，鹽度為35時(shí)指狀偽鏢水蚤的孵化時(shí)間與其他鹽度水平下的孵化時(shí)間差異顯著(P<0.05)；其他組之間兩兩進(jìn)行比較，不存在顯著差異(P>0.05)。

圖5 不同鹽度下指狀偽鏢水蚤的孵化時(shí)間

2.2.3 鹽度對(duì)指狀偽鏢水蚤24 h產(chǎn)糞粒數(shù)的影響 在鹽度為10～40范圍內(nèi)，雌性指狀偽鏢水蚤的24 h產(chǎn)糞粒數(shù)隨鹽度的升高總體上呈下降趨勢(shì)。鹽度為10時(shí)24 h產(chǎn)糞粒數(shù)最高為150.4粒，當(dāng)鹽度升高到15時(shí)產(chǎn)糞粒數(shù)出現(xiàn)小幅下降為98粒，一直到鹽度30時(shí)，產(chǎn)糞粒數(shù)都維持在一個(gè)比較穩(wěn)定的狀態(tài)，其后當(dāng)鹽度為35時(shí)，其24 h產(chǎn)糞粒數(shù)出現(xiàn)較大下降僅為52粒，在鹽度為40時(shí)，雌性指狀偽鏢水蚤不能耐受此鹽度，全部死亡，小燒杯中出現(xiàn)極少的糞粒。

對(duì)各組數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)顯示F=8.637，P<0.05，表明鹽度對(duì)雌性指狀偽鏢水蚤的24 h產(chǎn)糞粒數(shù)有顯著影響。其中通過(guò)組間數(shù)據(jù)兩兩比較顯示，鹽度10與鹽度35組之間差異極顯著(P<0.05)；鹽度為10和35實(shí)驗(yàn)組與其他鹽度組的雌性指狀偽鏢水蚤的24 h產(chǎn)糞粒數(shù)差異顯著(P<0.05)；其他組之間兩兩進(jìn)行比較，不存在顯著差異(P>0.05)。

(組間上標(biāo)無(wú)相同字母表示差異顯著，有相同字母則差異不顯著。The different letters mean there are marked differences between the groups.The same letters mean there are no significant differences.)

圖6 不同鹽度下指狀偽鏢水蚤的產(chǎn)糞粒數(shù)
Fig.6 Feces production ofP.inopinusat different salinities

3 討論

3.1 溫度對(duì)指狀偽鏢水蚤產(chǎn)糞及孵化的影響

溫度實(shí)驗(yàn)中，指狀偽鏢水蚤的孵化率隨溫度的升高呈現(xiàn)出先升高后降低的趨勢(shì)。從10 ℃時(shí)的73.2%升高到15 ℃時(shí)的78.6%，然后在20 ℃時(shí)快速升高達(dá)到最大孵化率96.8%，其后出現(xiàn)較大下降，在25～35℃時(shí)的孵化率分別只有64.5%、67.5%和74.5%。在陳峰等人的實(shí)驗(yàn)中，溫度對(duì)右突歪水蚤(Tortanusdextrilobatus)的產(chǎn)卵率的影響顯著，產(chǎn)卵率隨著溫度的升高也出現(xiàn)先升高再降低的趨勢(shì)，當(dāng)溫度為20 ℃時(shí)，產(chǎn)卵率最大，當(dāng)溫度繼續(xù)升高時(shí)，產(chǎn)卵率下降[21]，雖然所用種不同，但此結(jié)果與本實(shí)驗(yàn)得到的結(jié)果基本是一致的；此外，Santhanam和Perumal的研究表明，(15±1)℃時(shí)堅(jiān)長(zhǎng)腹劍水蚤(Oithonarigida)的孵化率低，而最大孵化率99.8%在最適溫度(26±2)℃處獲得[22]；羅曉霞等的研究表明，溫度對(duì)雙齒許水蚤的孵化率影響顯著(P<0.05)，其最適溫度為30 ℃，孵化率達(dá)82.7%[23]；鄭重等的研究也表明，橈足類的產(chǎn)卵量隨著溫度升高而加速，但超過(guò)最適溫度就開(kāi)始下降，而最適溫度則因種類而異[24]；Uye對(duì)克氏紡錘水蚤(Acartiaclausi)的研究也表明，較高溫度對(duì)產(chǎn)卵率有抑制效應(yīng)[25]。綜合以上實(shí)驗(yàn)可以猜測(cè)，溫度可能是通過(guò)對(duì)能量積累或激素分泌速度的控制而起作用[26]。此外，因?yàn)橹笭顐午S水蚤春夏兩季數(shù)量不是很多，到初秋，數(shù)量驟增，個(gè)體亦較大，帶卵雌體較多，體內(nèi)布滿金黃色的油點(diǎn)，入冬后數(shù)量極少，所以其平時(shí)生活水溫一般為10～20 ℃。本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果可以推測(cè)，當(dāng)溫度大于20 ℃時(shí)，其機(jī)體就會(huì)不適應(yīng)，對(duì)卵的孵化和無(wú)節(jié)幼蟲(chóng)的發(fā)育不利，導(dǎo)致孵化率降低。

指狀偽鏢水蚤的卵孵化時(shí)間與溫度的變化具有顯著相關(guān)性，隨著溫度的升高呈現(xiàn)出明顯縮短的趨勢(shì)，溫度為10 ℃時(shí)，指狀偽鏢水蚤的平均孵化時(shí)間長(zhǎng)達(dá)175 h，溫度升高到15 ℃時(shí)，平均孵化時(shí)間迅速縮短到77.7 h，之后隨著溫度的繼續(xù)升高，孵化時(shí)間繼續(xù)下降，但相對(duì)較緩一些。用最小二乘法擬合的公式顯示，指狀偽鏢水蚤卵的孵化時(shí)間隨溫度的變化符合指數(shù)函數(shù)。Yoshida等研究了溫度對(duì)馬六甲海峽3種紡錘水蚤刺尾紡錘水蚤(Acartiaspinicauda)、紅紡錘水蚤(A.erythraea)、和太平洋紡錘水蚤(A.pacifica)卵孵化時(shí)間的影響，并且得出孵化時(shí)間隨溫度的變化均符合指數(shù)函數(shù)[27]。Checkley[28]對(duì)小擬哲水蚤(Paracalanusparvus)以及Uye[29]對(duì)中華哲水蚤(Calanussinicus)的研究也得到了卵孵化時(shí)間隨溫度變化呈現(xiàn)指數(shù)變化規(guī)律。Yoshida等在研究中指出每個(gè)物種受地理環(huán)境獨(dú)特適應(yīng)性的影響，指數(shù)函數(shù)的表現(xiàn)形式不盡相同，相比較而言，熱帶物種的卵孵化時(shí)間對(duì)溫度的反應(yīng)要比溫帶和亞極地地區(qū)的要更為敏感。并且卵的孵化溫度和親本的馴化溫度都對(duì)卵的孵化時(shí)間有顯著影響[27]。Landry[30]發(fā)現(xiàn)對(duì)于克氏紡錘水蚤在冬季(8～10 ℃)采集的卵發(fā)育速度顯著快于夏季(15～20 ℃)采集的卵。但是，Uye和Fleming重復(fù)了實(shí)驗(yàn)，沒(méi)有成功得到Landry的結(jié)果，而是得出克氏紡錘水蚤全年產(chǎn)卵都具有相似的生理學(xué)特性。這場(chǎng)爭(zhēng)論的核心問(wèn)題是卵孵化時(shí)間是基因決定還是環(huán)境誘導(dǎo)的。

Tester[31]發(fā)現(xiàn)對(duì)于湯氏紡錘水蚤親本的馴化溫度和卵的孵化溫度對(duì)于卵的孵化時(shí)間是加成的，卵孵化時(shí)間不僅取決于自身所處環(huán)境溫度，而且受親本馴化溫度的影響。如果親本馴化溫度長(zhǎng)期固定，培養(yǎng)溫度變化在86 h到8 d之間能夠充分影響卵孵化時(shí)間。他還指出影響卵孵化時(shí)間的溫度變化時(shí)間取決于溫度變化的方向和程度。本實(shí)驗(yàn)中的孵化實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前將親本在各自的實(shí)驗(yàn)溫度條件下馴化了2周的時(shí)間，保證了馴化溫度條件的長(zhǎng)期穩(wěn)定性，消除了溫度的短時(shí)間驟變對(duì)親本和卵孵化的不利影響。

指狀偽鏢水蚤的24 h產(chǎn)糞粒數(shù)隨著溫度的升高呈現(xiàn)逐漸增加后又降低的趨勢(shì)。從10 ℃開(kāi)始，隨著溫度的升高指狀偽鏢水蚤的24 h產(chǎn)糞粒數(shù)也逐漸升高，在30 ℃時(shí)24 h產(chǎn)糞粒數(shù)達(dá)到最大值154.6粒。其后，在35 ℃時(shí)有所下降為118粒。從側(cè)面反映了由于溫度變化造成了指狀偽鏢水蚤攝食和消化代謝的提高，進(jìn)而導(dǎo)致了產(chǎn)糞粒數(shù)的增加。

3.2 鹽度對(duì)指狀偽鏢水蚤產(chǎn)糞及孵化的影響

鹽度實(shí)驗(yàn)中，指狀偽鏢水蚤的卵孵化率隨著鹽度的升高呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢(shì)。鹽度10時(shí)孵化率最大為75.1%，鹽度15和20時(shí)的孵化率略微下降，其后當(dāng)鹽度超過(guò)25時(shí)孵化率有較大下降，在鹽度為40時(shí)孵化率為0，說(shuō)明指狀偽鏢水蚤不能耐受此鹽度。Cortney等認(rèn)為，河口動(dòng)物適應(yīng)鹽度的變化與滲透壓和離子調(diào)節(jié)機(jī)制密切相關(guān)，當(dāng)鹽度改變時(shí)，動(dòng)物可以通過(guò)呼吸和排泄器官的調(diào)節(jié)機(jī)制來(lái)調(diào)節(jié)滲透壓和離子濃度[32]。因此可以認(rèn)為鹽度過(guò)高，超過(guò)了成體的調(diào)節(jié)范圍而導(dǎo)致其死亡。羅曉霞等人對(duì)雙齒許水蚤的研究表明，鹽度對(duì)雙齒許水蚤的孵化率和孵化時(shí)間影響不顯著(P>0.05)。不同鹽度下雙齒許水蚤的孵化時(shí)間無(wú)明顯差別，均為48 h[23]。而本實(shí)驗(yàn)中指狀偽鏢水蚤的孵化時(shí)間隨鹽度的升高逐漸增加。從鹽度為10時(shí)的40 h，逐漸增加到鹽度30時(shí)的47.8 h，當(dāng)鹽度達(dá)到35時(shí)，其孵化時(shí)間迅速增加到76.9 h。這是因?yàn)殡p齒許水蚤是典型的廣鹽性浮游生物，對(duì)鹽度的變化具有較強(qiáng)的適應(yīng)能力，而指狀偽鏢水蚤耐鹽性較差，不耐受高鹽度，因此鹽度變化對(duì)其卵孵化率和孵化時(shí)間均有顯著影響。

雌性指狀偽鏢水蚤的24 h產(chǎn)糞粒數(shù)隨鹽度的升高總體上呈下降趨勢(shì)。鹽度為10時(shí)24 h產(chǎn)糞粒數(shù)最高為150.4粒，當(dāng)鹽度升高到15時(shí)產(chǎn)糞粒數(shù)出現(xiàn)小幅下降，一直到鹽度30時(shí)，產(chǎn)糞粒數(shù)都維持在一個(gè)比較穩(wěn)定的狀態(tài)，其后當(dāng)鹽度為35時(shí)，其24 h產(chǎn)糞粒數(shù)出現(xiàn)較大下降僅為52粒。產(chǎn)糞粒數(shù)的變化反映了指狀偽鏢水蚤對(duì)鹽度的低耐受性，低鹽狀態(tài)下生活狀態(tài)更好，產(chǎn)糞粒數(shù)更多。

由于指狀偽鏢水蚤生活于淡水、咸淡水和低鹽度海水中，實(shí)驗(yàn)中低鹽度接近其生活環(huán)境的鹽度，適合其卵的孵化以及成體的代謝，因此其孵化率、產(chǎn)糞粒數(shù)在低鹽度10時(shí)最高，且孵化時(shí)間也最短。

3.3溫度與鹽度實(shí)驗(yàn)對(duì)比

指狀偽鏢水蚤的卵孵化率隨溫度的升高呈現(xiàn)出先升高后降低的趨勢(shì)，在20 ℃時(shí)達(dá)到最大孵化率96.8%，比最低孵化率高出32.3個(gè)百分點(diǎn)，而鹽度實(shí)驗(yàn)中，指狀偽鏢水蚤的卵孵化率隨著鹽度的升高呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢(shì)，不僅變化趨勢(shì)與溫度實(shí)驗(yàn)不同，且變化幅度比溫度實(shí)驗(yàn)要小。指狀偽鏢水蚤的卵孵化時(shí)間隨著溫度的升高呈現(xiàn)出明顯縮短的趨勢(shì)，10 ℃時(shí)平均孵化時(shí)間長(zhǎng)達(dá)175 h，15 ℃時(shí)迅速縮短到77.7 h，其后小幅降低，二者相關(guān)性顯著符合指數(shù)函數(shù)的特征，而孵化時(shí)間隨鹽度的升高逐漸增加，從鹽度10時(shí)的40 h，逐漸增加到鹽度30時(shí)的47.8 h，鹽度35時(shí)孵化時(shí)間迅速增加到76.9 h，變化趨勢(shì)與溫度實(shí)驗(yàn)相反，且變化幅度要小。指狀偽鏢水蚤24 h產(chǎn)糞粒數(shù)隨著溫度的升高呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢(shì)，而隨鹽度的升高總體上呈下降趨勢(shì)。通過(guò)對(duì)溫度實(shí)驗(yàn)和鹽度實(shí)驗(yàn)的對(duì)比不難發(fā)現(xiàn)，相較于鹽度，溫度對(duì)雌性指狀偽鏢水蚤產(chǎn)糞粒數(shù)、卵孵化率及孵化時(shí)間的影響更明顯。溫度是海洋浮游動(dòng)物橈足類孵化的一個(gè)重要影響因子，合理地控制溫度有利于提高孵化率，縮短孵化周期。由于指狀偽鏢水蚤能生活于淡水、咸淡水和低鹽度海水中，其鹽度耐受范圍相對(duì)比較寬，因此鹽度對(duì)其影響不如溫度明顯，但低鹽度更適合其生長(zhǎng)繁殖。

糞粒是影響橈足類培養(yǎng)水質(zhì)的最重要因素,孵化率和孵化時(shí)間是衡量橈足類培養(yǎng)效率的重要指標(biāo)。本研究初步揭示了溫度和鹽度對(duì)指狀偽鏢水蚤的影響,并得出了其最適培養(yǎng)溫度為20 ℃，最適培養(yǎng)鹽度為10，為其多世代連續(xù)培養(yǎng)提供了技術(shù)資料。

致謝:感謝實(shí)驗(yàn)室同學(xué)們?cè)趯?shí)驗(yàn)過(guò)程中的幫助。

[1] 劉鎮(zhèn)盛, 杜明敏, 章菁. 國(guó)際海洋浮游動(dòng)物研究進(jìn)展 [J]. 海洋學(xué)報(bào), 2013, 35(4): 1-10.

[2] Lee, Park, Kang. Effects of diets of the growth of the brackish water cyclopoid copepodParacyclopinananaSmirnov. Aquaculture, 2006, 256: 346-353.

[3] 齊鑫, 李盈鋒, 王月, 等. 橈足類動(dòng)物培養(yǎng)技術(shù)研究進(jìn)展 [J]. 湖南飼料, 2011(6): 24-26.

[4] 李超倫, 王克. 植食性浮游橈足類攝食生態(tài)學(xué)研究進(jìn)展 [J]. 生態(tài)學(xué)報(bào), 2002, 22(4): 593-596.

[5] Andrew, Rhyne, Cortney, et al. Effects of temperature on reproduction and survival of the calanoid copepodPseudodiaptomuspelagicus[J]. Aquaculture, 2009, 292: 53-59.

[6] Takeshi Watanabe. Importance of docosahexaenoic acid in marine larval fish [J]. Journal of the World Aquaculture Society, 1993, 24: 152-161.

[7] Bonnet D, Richardson A, Harris R, et al, Edwards. An overview ofCalanushelgolandicusecology in European waters [J]. Progr Oceanogr, 2005, 65: 1-53.

[8] Camus, Zeng. The effects of stocking density on egg production and hatching success, cannibalism rate, sex ratio and population growth of the tropical calanoid copepodAcartiasinjiensis[J]. Aquaculture, 2009, 287: 145-151.

[9] Drillet G, Frouёl S, Sichlau M H， et al. Status and recommendations on marine copepod cultivation for use as live feed [J], Aquaculture, 2011, 315: 155-166.

[10] Isla, Perissinotto. Effects of temperature, salinity and sex on the basal metabolic rate of the estuarine copepodPseudodiaptomushessei[J]. Journal of Plankton Research, 2004, 26: 579-583.

[11] Stott up. The elusive copepods: their production and suitability in marine aquaculture [J]. Aquaculture, 2000. 31: 703-711.

[12] Castellani, Irigoien, Harris, et al. Feeding and egg production ofOithonasimilisin the North Atlantic [J]. Marine Ecology-Progress Series, 2005, 288: 173-182.

[13] Castellani C, Irigoien X, Mayor D J, et al. Feeding ofCalanusfinmarchicusandOithonasimilison the microplankton assemblage in the Irminger Sea, North Atlantic [J]. J Plankton Res, 2008, 30: 1095-1116.

[14] 商栩, 王桂忠. 福建九龍江口火腿許水蚤各發(fā)育期耐鹽能力與生態(tài)分布的關(guān)系 [J].臺(tái)灣海峽, 2005, 24(3): 330-338.

[15] Payne, Rippingale. Intensive cultivation of the calanoid copepodGladioferensimparipes[J]. Aquaculture, 2001, 201(3): 329-342.

[16] 鄭重, 李少菁, 連光山. 海洋橈足類生物學(xué) [M]. 廈門出版社, 1992: 234-292.

[17] Guillermo Cervetto. Influence of salinity on the distribution ofAcartiatonsa(Copepoda, Calanoida) [J]. Journal of Experimental Marine Biology and Ecology, 1999, 239: 33-45.

[18] Guillaume Drillet. Status and recommendations on marine copepod cultivation for use as live feed [J]. Aquaculture, 2011, 315: 155-166.

[19] 黃加祺, 鄭重. 溫度和鹽度對(duì)廈門港幾種橈足類存活率的影響 [J]. 海洋與湖沼, 1986, 17(2): 161-167.

[20] 黃加祺, 黃輝洋, 許振祖. 火腿許水蚤培養(yǎng)條件的初步研究 [J]. 臺(tái)灣海峽, 1998, 17(S1): 44-48.

[21] 陳峰, 李少菁. 歪水蚤產(chǎn)卵率的研究 [J]. 廈門大學(xué)學(xué)報(bào), 1990, 29(4): 449-453.

[22] Santhanam, Perumal. Feeding, survival, egg production and hatching rate of the marine copepodOithonarigidaGiesbrecht (Copepoda: Cyclopoida) under experimental conditions [J]. J Mar Biol Ass India, 2012, 54(1): 38-44.

[23] 羅曉霞, 黃翔鵠, 黃子華. 四種理化因子對(duì)雙齒許水蚤卵子孵化率的影響 [J]. 廣東海洋大學(xué)學(xué)報(bào), 2008, 28(4): 65-68.

[24] Uye. Fecundity studies of neritic calanoid copepodsAcatiaclauseGiesbrecht and A. steueri Smirnov: a simple empirical model of daily egg production [J]. J Exp Mar Biol Ecol, 1981, 50: 255-271.

[25] 黃加棋, 鄭重. 九龍江口橈足類和鹽度關(guān)系的初步研究 [J]. 廈門大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版), 1984, 23(4): 497-505.

[26] 劉光興， 陳珂. 海洋橈足類滯育卵在海水養(yǎng)殖業(yè)中的應(yīng)用及其前景 [J]. 青島海洋大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版), 2003, 33(6): 901-906.

[27] Teruaki Yoshida, Ching-Fong Liong, Abdul Mohamed Majid, et al. Temperature effects on the egg development time and hatching success of threeAcartiaSpecies (Copepoda: Calanoida) from the Strait of Malacca [J]. Zoological Studies, 2012, 51: 644-654.

[28] Checkley. Food limitation of egg production by a marine planktonic copepod in the sea off southern California [J]. Oceanogr, 1980, 25: 991-998.

[29] Uye. Temperature-dependent development and growth ofCalanussinicus(Copepoda: Calanoida) in the laboratory [J]. Hydrobiologia, 1988, 167: 285-293.

[30] Landry. Seasonal temperature effects and predicting development rates of marine copepod eggs [J]. Limnol Oceanogr, 1975, 20: 434-440.

[31] Tester. Effects of parental acclimation temperature and egg-incubation temperature on egg-hatching time inAcartiatonsa(Copepoda: Calanoida) [J]. Mar Biol, 1985, 89: 45-53.

[32] Cortney, Andrew, Scott, et al. Effects of salinity on reproduction and survival of the calanoid copepodPseudodiaptomuspelagicus[J]. Aquaculture, 2010, 307: 219-224.

[33] Cordell, Rasmussen, Bollens. Biology of the introduced copepodPseudodiaptomusinopinusin a northeast Pacific estuary [J]. Mar Ecol Progr Ser, 2007, 333:213-227.

[34] Park, Cordell, Soh. Occurrence characteristics of two sibling species,PseudodiaptomusinopinusandPseudodiaptomuspoplesia(Copepoda, Calanoida, Pseudodiaptomidae), in the Mankyung River estuary, South Korea [J]. Zoological Studies, 2013, 52(7): 1-10.

[35] Soh, Suh, Yu, et al. The first record of two demersal calanoid copepods,PseudodiaptomuspoplesiaandP.nihonkaiensisin Korea, with remarks on morphology of the genital area [J]. Hydrobiologia, 2001, 448: 203-215.

責(zé)任編輯 高 蓓

Effects of Temperature and Salinity on the Hatching and Fecal Production ofPseudodiaptomidaeinopinus

LI Guang-Fu, ZHU Li-Yan, WANG Xiao-Min, HAN Cui, JIANG Tian-Tian

(College of Marine Life Sciences, Ocean University of China, Qingdao 266003，China)

Copepods are important components of marine zooplankton.Pseudodiaptomidaeinopinuswas chosen as our experimental subjects for the wide distribution and easy observation of its hanging eggs. The experiment set up a series of temperature and salinity gradients to investigate its temperature and salinity adaptation. The results: Temperature has significant effects on the hatching rate, hatching time and fecal production of the femaleP.inopinus(P<0.05). In the range of 10 ℃ to 35 ℃, as the temperature rises, the hatching rate ofP.inopinusincreases, and the maximum number appears at 20 ℃ before a slightly downing. The hatching time showed a clear trend of shortening, and the number of fecal production in 24 h presented a gradually elevated and slightly lowered trend. Salinity has significant effects on hatching rate, hatching time and fecal production (P<0.05). When the salinity was in the range of 10 to 40, as salinity increased, theP.inopinushatching number decreased gradually, hatching time expended slowly and gradually, and the fecal production in 24 h decreased overall. Based on the experiment, we can conclude that the best culture temperature is 20 ℃ and the best salinity is 10 for eggs hatching. Compared with salinity, it is more susceptible to the influence of temperature.

Pseudodiaptomidaeinopinus; temperature; salinity; hatching rate; hatching time; the number of fecal production

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31172412)；國(guó)家科技重大專項(xiàng)子課題項(xiàng)目(2012ZX07501-003-06)資助

2014-12-19；

2015-05-11

李光福(1988-)，男，碩士，研究方向?yàn)楹Ｑ笊鷳B(tài)學(xué)。E-mail: 294865452@qq.com

??通訊作者： E-mail: lyzhu@ouc.edu.cn

X171.5

A

1672-5174(2015)11-036-07

10.16441/j.cnki.hdxb.20140419