牛嬋

隨著羊絨制品的流行，一些廠商為了獲取高額利潤(rùn)，在生產(chǎn)羊絨制品時(shí)，摻入羊毛纖維以降低成本，欺騙消費(fèi)者。因此，上海出入境檢驗(yàn)檢疫局工業(yè)品與原材料檢測(cè)技術(shù)中心自主研發(fā)的基于DNA技術(shù)的羊絨羊毛精確定性定量檢驗(yàn)方法的建立及應(yīng)用就顯得尤為重要，其能通過(guò)DNA對(duì)羊絨和羊毛的含量高效準(zhǔn)確作出鑒別，解決羊絨羊毛區(qū)分難題，因此榮獲紡織之光2014年中國(guó)紡織工業(yè)聯(lián)合會(huì)科學(xué)技術(shù)進(jìn)步二等獎(jiǎng)。

該項(xiàng)目負(fù)責(zé)人段冀淵博士曾任職于上海國(guó)檢局檢驗(yàn)監(jiān)管處，負(fù)責(zé)上?？诎哆M(jìn)出口消費(fèi)品的檢驗(yàn)監(jiān)管工作，每年都會(huì)針對(duì)性地布置安排對(duì)消費(fèi)品的監(jiān)督抽查。根據(jù)進(jìn)口消費(fèi)品的狀況，段冀淵與工業(yè)品與原材料檢測(cè)技術(shù)中心深入互動(dòng)，在中心領(lǐng)導(dǎo)的支持下，針對(duì)消費(fèi)品的纖維成分欺詐問(wèn)題，開(kāi)始組建隊(duì)伍并開(kāi)展工作。

組建團(tuán)隊(duì)精英成員各司其職

既然山羊絨是山羊身上的纖維，羊毛是綿羊身上的纖維，那么這兩種羊DNA序列的不同之處有哪些呢？“在進(jìn)行了一系列可行性研究后，原材料中心斥資20萬(wàn)元建起了系統(tǒng)內(nèi)該領(lǐng)域的第一個(gè)DNA檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室。2009年，又引進(jìn)了復(fù)旦大學(xué)遺傳系碩士費(fèi)靜，至此，我們的團(tuán)隊(duì)完全建立起來(lái)了?！倍渭綔Y說(shuō)。

經(jīng)過(guò)兩年的籌備和前期探索，項(xiàng)目組成功申請(qǐng)到了質(zhì)檢總局的科技項(xiàng)目《基于分子生物學(xué)的特種動(dòng)物纖維定性和精確定量檢測(cè)方法研究》。據(jù)悉，項(xiàng)目組主要成員分工明確。段冀淵負(fù)責(zé)政策規(guī)劃、組織協(xié)調(diào)和實(shí)驗(yàn)路線的設(shè)計(jì)；孫美蓉高工是染整方面的專(zhuān)家，負(fù)責(zé)染整工藝對(duì)DNA提取效率的影響研究和內(nèi)部資源調(diào)配；由于該項(xiàng)目的特殊性，周輝主任負(fù)責(zé)外部資源調(diào)配和樣品的獲取，收集大量不同產(chǎn)地、不同年齡段的山羊絨，以及各類(lèi)特種動(dòng)物纖維；費(fèi)靜作為團(tuán)隊(duì)里生物學(xué)科的小專(zhuān)家，負(fù)責(zé)生物實(shí)驗(yàn)部分的具體實(shí)施和操作；魏孟媛博士對(duì)天然動(dòng)物纖維的結(jié)構(gòu)和性能進(jìn)行深入分析和研究，確立了天然動(dòng)物纖維的最佳纖維裂解方案；袁志磊高工對(duì)纖維染色頗有研究，負(fù)責(zé)研究染色工藝對(duì)定量檢測(cè)的影響；劉芳、劉敏華為標(biāo)準(zhǔn)定量曲線的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)做了大量的工作；隋陽(yáng)華、謝璐蔓負(fù)責(zé)收集檢測(cè)任務(wù)中的羊絨制品，為后序的驗(yàn)證做了大量的積累工作。除此之外，項(xiàng)目的順利推進(jìn)還得到了上海出入境檢驗(yàn)檢疫局工業(yè)品與原材料檢測(cè)技術(shù)中心主任陸維民的大力支持，他聯(lián)系了系統(tǒng)內(nèi)外多家DNA檢測(cè)機(jī)構(gòu)，對(duì)驗(yàn)證方案的設(shè)計(jì)及方法比較評(píng)價(jià)提供了寶貴建議。

另辟蹊徑從根源解決纖維鑒別問(wèn)題

羊毛羊絨的定量，關(guān)鍵是要將羊絨羊毛混合物的重量比例與山羊綿羊DNA的量之間建立起一條定量的標(biāo)準(zhǔn)曲線?！拔覀兎治隽嗣绹?guó)國(guó)立生物信息中心（NCBI）數(shù)據(jù)庫(kù)中山羊和綿羊的線粒體序列，找到了種內(nèi)相同、種間差異大的區(qū)域，設(shè)計(jì)了相應(yīng)的引物和探針，用于檢測(cè)各物種DNA的量?！睂O美蓉說(shuō)。

能否得到純度和完整性均高的DNA是該方法的關(guān)鍵。為此，項(xiàng)目組嘗試了很多文獻(xiàn)報(bào)道的蛋白纖維DNA裂解方案，并做了各種改進(jìn)，希望可以將角蛋白完全裂解。

費(fèi)靜說(shuō)：“將纖維剪碎，可增加其與裂解液的接觸面積，但一般的粉碎機(jī)無(wú)法勝任，只能通過(guò)人工用剪刀剪。1克纖維在一個(gè)小燒杯內(nèi)，用一把手術(shù)剪將其剪碎到面粉一樣的效果，需要剪無(wú)數(shù)次。”為了保證羊毛和羊絨是被剪碎到相同的程度，需將樣品混合不同的比例再進(jìn)行剪碎，每個(gè)比例又要有重復(fù)的樣品，費(fèi)靜的手指上磨出了水泡。大家得知了這一情況后，自告奮勇輪流進(jìn)行“剪毛行動(dòng)”。唐敏峰研究員更是調(diào)動(dòng)中心上下技術(shù)專(zhuān)家，集思廣益，嘗試各種樣品的粉碎手段。在不斷嘗試后，項(xiàng)目組發(fā)現(xiàn)冷凍研磨機(jī)可以很好地粉碎纖維，這樣就大大節(jié)省了勞力。

當(dāng)項(xiàng)目組克服重重困難，建立起定量的標(biāo)準(zhǔn)曲線后，新問(wèn)題又來(lái)了?！拔覀兊难芯慷际墙⒃诰€粒體DNA上，而線粒體在不同物種、不同組織、不同生長(zhǎng)時(shí)期的數(shù)目可能會(huì)發(fā)生變化，這就帶來(lái)了新的問(wèn)題。特種動(dòng)物纖維毛發(fā)中的線粒體數(shù)目是否穩(wěn)定，是關(guān)系到我們定量標(biāo)準(zhǔn)曲線準(zhǔn)確度的大問(wèn)題?！辟M(fèi)靜說(shuō)道。

為了確認(rèn)這個(gè)方法是否可行，項(xiàng)目組兩次深入新疆采集樣品。在采樣途中，項(xiàng)目組成員還碰上幾十年一遇的沙塵暴，感受了車(chē)子拋錨在戈壁灘上等待救援的無(wú)奈。最終在一戶(hù)衣家采集到了1～6歲山羊絨的樣品?！肮Ψ虿回?fù)有心人，驗(yàn)證的結(jié)果表明，不同產(chǎn)地、不同年齡段的山羊絨，其所攜帶的線粒體拷貝數(shù)是穩(wěn)定不變的，這樣我們的定量標(biāo)準(zhǔn)曲線就有了實(shí)際樣品檢驗(yàn)的支撐。”孫美蓉說(shuō)。

項(xiàng)目組還收集了很多平時(shí)檢測(cè)時(shí)遇到的羊絨羊毛樣品，對(duì)該方法進(jìn)行了進(jìn)一步的驗(yàn)證，并使用顯微鏡法的檢測(cè)結(jié)果來(lái)進(jìn)行對(duì)照。驗(yàn)證顯示該方法不僅適用于原毛、面料的檢測(cè)，也適用于成衣的檢測(cè)。

2012年，該項(xiàng)目順利完成了驗(yàn)收，得到專(zhuān)家高度評(píng)價(jià)。后來(lái)該項(xiàng)目又獲得了上海質(zhì)檢總局科技興檢獎(jiǎng)二等獎(jiǎng)，2014年更是獲得中國(guó)紡織工業(yè)聯(lián)合會(huì)的紡織之光科技進(jìn)步二等獎(jiǎng)，2014年底，國(guó)標(biāo)委對(duì)羊絨羊毛DNA定量檢測(cè)方法也立了項(xiàng)。

據(jù)悉，目前，該項(xiàng)目成果在質(zhì)檢系統(tǒng)、檢測(cè)公司、司法鑒定等機(jī)構(gòu)中得到了推廣和應(yīng)用。制成的羊毛羊絨定量試劑盒，在服裝的檢測(cè)監(jiān)管、企業(yè)產(chǎn)品質(zhì)量控制中發(fā)揮了重要作用。