隋思強(qiáng)等

摘要：[目的] 探討一種綠茶浸提物的最佳提取工藝及其抗氧化活性。[方法]以保定市售綠茶為研究對(duì)象，通過(guò)對(duì)不同浸提時(shí)間、浸提溫度與料液比等浸提條件對(duì)浸提效果影響得出綠茶浸提物的最佳提取工藝并鑒定提取物的抗氧化活性。[結(jié)果]試驗(yàn)表明，綠茶在提取時(shí)間為30 min，料液比為1∶20 g/ml，提取溫度為80 ℃時(shí)，具有最佳的提取效果。通過(guò)在豆油中的抗氧化活性研究表明，提取物有著比維生素E強(qiáng)的抗氧化性。[結(jié)論]研究可為綠茶資源的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供參考。

關(guān)鍵詞：綠茶；綠茶浸提物；最佳提取工藝；抗氧化性

中圖分類(lèi)號(hào)：S571 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 0517-6611（2015）08-252-01

綠茶又被稱(chēng)作不發(fā)酵茶。以茶多酚為主的綠茶浸提物含有豐富的兒茶素等多酚類(lèi)化合物，是茶葉中主要的起生理活性和藥理作用的物質(zhì)，其浸提物的提取對(duì)茶資源的開(kāi)發(fā)和研究有著很大的促進(jìn)作用[1]。筆者根據(jù)不同的條件對(duì)綠茶中的抗氧化物質(zhì)進(jìn)行浸提，確定了最佳提取方案，并對(duì)浸提物的抗氧化作用做了初步的驗(yàn)證，證明其有良好的抗氧化作用[2]。研究確定的最佳提取方案可應(yīng)用于試驗(yàn)研究以及化工生產(chǎn)，可以免去一些不必要的測(cè)試、鑒定等。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 主要試劑。 75%乙醇，氯仿，乙酸乙酯，冰乙酸，維生素，可溶性淀粉，碘化鉀植酸，冰乙酸，酒石酸。

1.1.2 主要儀器及用具。

萬(wàn)能粉碎機(jī)（FW-80），恒溫水浴鍋（HH-S6），電子分析天平（BS224S），離心機(jī)（TD25-WS），鼓風(fēng)干燥箱（DHG-9245A），燒杯，試管，量筒，分液漏斗，滴定管等。

1.2 方法

1.2.1 綠茶浸提物的提取。先取100 g綠茶用萬(wàn)能粉碎機(jī)粉碎，再取1 500 ml 75%乙醇備用。

根據(jù)以往研究可知，影響提取效果的因素主要有加熱溫度、加熱時(shí)間以及加熱時(shí)的料液比等。分別以不同的提取溫度、不同的提取時(shí)間以及料液比做3個(gè)單因素試驗(yàn)，來(lái)驗(yàn)證不同條件對(duì)綠茶浸提效果的影響[3]。

1.2.2 浸提物的純化。

將綠茶粗提物在2 000 r/min離心2 min，棄掉沉淀后加入等體積的氯仿對(duì)溶液進(jìn)行萃取。振蕩、靜置分層后取出上層水相。向水相中加入等量的乙酸乙酯。振蕩、靜置分層后取下層有機(jī)相。乙酸乙酯易揮發(fā)，加熱有機(jī)相使其蒸發(fā)結(jié)晶，最后得到純度較高的綠茶提取物[4]。

1.2.3 綠茶浸提物抗氧化研究。利用浸提物對(duì)豆油的抗氧化作用來(lái)檢驗(yàn)浸提物抗氧化能力[5]。將150 g豆油與100 mg硫酸亞鐵混合等量分成5組，其中1組作為對(duì)照，另外4組分別加入：① 6 mg綠茶浸提物，② 6 mg維生素E，③ 6 mg綠茶浸提物和6 mg酒石酸，④ 6 mg綠茶浸提物和6 mg植酸。將5組樣品于65 ℃，無(wú)光條件下放置。每3 d測(cè)量一次豆油的抗氧化值，稱(chēng)取樣品3 g，加入30 ml三氯甲烷-冰乙酸混合液并立即搖動(dòng)使其溶解，然后加入1 ml飽和KI溶液，加塞后輕微振蕩30 s，置于暗處3 min。

靜置后取出樣品并加入100 ml的水，輕輕搖晃，立即用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定樣品，滴定至淡黃色后，向樣品中加入1 ml的淀粉指示劑，繼續(xù)滴定樣品，滴定至藍(lán)色時(shí)油脂氧化時(shí)會(huì)在油脂當(dāng)中產(chǎn)生一些氧化物質(zhì)，這些物質(zhì)的氧化性可以將碘離子氧化成碘，而碘可以使淀粉溶液變藍(lán)。當(dāng)用硫代硫酸鈉滴定時(shí)，這些碘又變成碘離子，而藍(lán)色也隨之消失。

滴定硫代硫酸鈉的體積用于油脂的過(guò)氧化值（PV）的計(jì)算：

PV = 1 000（V-Vo）C/m

式中，V，滴定的硫代硫酸鈉體積（ml）；

Vo，空白組消耗的硫代硫酸鈉體積（ml）；

C，硫代硫酸鈉的濃度（mol/l）；m，油脂試樣的質(zhì)量（g）。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同浸提條件對(duì)浸提效果的影響

2.1.1 最佳提取溫度。

通常提取效果與提取溫度成正比，但是過(guò)高溫度的提取會(huì)降低提取效果。固定料液比與提取時(shí)間，分別對(duì)不同提取溫度的綠茶進(jìn)行浸提。

取5份10 g茶葉粉末，將綠茶粉末與200 ml 75%乙醇混合、攪拌、靜置后，分別在50、60、70、80、90 ℃的水浴鍋中提取30 min。2次重復(fù)試驗(yàn)，取3次試驗(yàn)提取率的平均值。

試驗(yàn)得出，提取溫度50、60、70、80、90 ℃時(shí)，浸提物提取率依次為5.9%、6.7%、7.5%、8.4%、10.3%。由此可知，當(dāng)提取時(shí)間和料液比固定的情況下，浸提物提取率是隨著提取溫度的升高而遞增，但是當(dāng)提取溫度90 ℃時(shí)，由于加熱溫度過(guò)高，會(huì)導(dǎo)致提取物的抗氧化活性喪失[6]，所以綠茶浸提物的最佳提取溫度為80 ℃。

2.1.2 最佳提取時(shí)間。確定最佳提取溫度后，在這個(gè)提取溫度下，固定料液比，對(duì)不同溫度下的綠茶進(jìn)行浸提。

取5份10 g茶葉粉末，將綠茶粉末與200 ml 75%的乙醇混合、攪拌、靜置后，在80 ℃的水浴鍋中分別加熱10、20、30、40、50 min。2次重復(fù)試驗(yàn)，取3次試驗(yàn)提取率的平均值。

試驗(yàn)得出，當(dāng)提取時(shí)間為10、20、30、40、50 min時(shí)，浸提物提取率依次為6.1%、6.9%、7.9%、7.1%、6.5%。由此可知，當(dāng)料液比和提取溫度固定的情況下，改變提取時(shí)間對(duì)最后得到的提取率的影響較小，提取率先是隨著提取時(shí)間的增加而增加，但當(dāng)提取時(shí)間超過(guò)30 min后，隨著提取時(shí)間的增加，提取率減小。由結(jié)果比較得出，當(dāng)料液比和提取溫度2個(gè)條件確定時(shí)，最佳提取時(shí)間為30 min。

2.1.3 最佳提取料液比。

取5份10 g茶葉粉末，分別與75%的乙醇100、150、200、250、300 ml（即料液比為1∶10、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30 g/ml）混合、攪拌、靜置后，在80 ℃的水浴鍋中分別加熱30 min，2次重復(fù)試驗(yàn)，取3次試驗(yàn)提取率的平均值。

試驗(yàn)得出，當(dāng)料液比為1∶10、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30 g/ml時(shí)，浸提物提取率依次為6.2%、7.3%、8.2%、6.8%、5.6%。由此可知，當(dāng)提取時(shí)間和提取溫度固定的情況下，逐步增加料液比中溶劑用量會(huì)改變影響提取的效果，初步增加液料比中溶劑用量時(shí)可以增加提取率，當(dāng)料液比小于1∶20后，隨著料液比中溶劑用量的增加，提取率逐漸減少。這是由于浸提物混合物中不同物質(zhì)的不同溶解度造成的，所以當(dāng)提取溫度和提取時(shí)間確定時(shí)，最佳液料比為1∶20 g/ml。

2.2 綠茶浸提物與普通抗氧化物的抗氧化效果的比較 由表1可知，對(duì)照組是所有樣品中過(guò)氧化值最高的，當(dāng)在樣品中加入綠茶提取物和維生素E等抗氧化物后，過(guò)氧化值有著不同水平的降低。數(shù)據(jù)表明，添加綠茶浸提物的樣品過(guò)氧化值低于添加維生素的樣品，這證明了綠茶浸提物有著比維生素E強(qiáng)的抗氧化性。酒石酸與植酸的添加可增強(qiáng)茶多酚在油脂中的抗氧化能力。根據(jù)試驗(yàn)數(shù)據(jù)得知，植酸促進(jìn)茶多酚抗氧化的能力要優(yōu)于酒石酸。

3 結(jié)論與討論

通過(guò)試驗(yàn)驗(yàn)證綠茶茶多酚最佳提取條件為80 ℃，浸提時(shí)間為30 min，料液比為1∶20 g/ml。而通過(guò)對(duì)豆油的抗氧化試驗(yàn)可以看出，綠茶浸提物抗氧化能力比維生素E高出數(shù)倍，有著較好的抗氧化力，而對(duì)比植酸和酒石酸對(duì)浸提物的看氧化促進(jìn)能力來(lái)看，植酸有著較好的促進(jìn)能力。

根據(jù)在油脂中測(cè)量的抗氧化值可知，以茶多酚為主綠茶浸提物有著比維生素E強(qiáng)的抗氧化性；在試驗(yàn)中最大提取率達(dá)到10%，證實(shí)茶多酚等抗氧化物在綠茶中的含量是比較高的，這是綠茶有著較高的保健價(jià)值的因素之一。

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