程棟，陳冰，王銀東，吳世林

（廣州智特奇生物科技股份有限公司，廣東 廣州 510663）

維生素A通常是指視黃醇及具有視黃醇生物活性的一類物質(zhì)的統(tǒng)稱，是一種重要的脂溶性維生素，是動(dòng)物體內(nèi)正常代謝所必需的營養(yǎng)素，具有重要的生理藥理作用。智維A采用特殊的包被工藝生產(chǎn)而成，在高溫高濕環(huán)境下有較高的穩(wěn)定性。本試驗(yàn)以雞作為動(dòng)物模型測定血清維生素A水平來評(píng)估智維A在動(dòng)物體內(nèi)的生物利用規(guī)律。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)1維生素A樣品：“智維A”，由廣州智特奇生物科技股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)為15011601，生產(chǎn)日期2015年1月16日，檢測有效含量50.5萬u/g。

試驗(yàn)2維生素A樣品，選取生產(chǎn)日期相近的維生素A，分別如下:（1）智維 A Ⅰ，批號(hào) 15040302，生產(chǎn)日期為2015年4月3日，檢測有效含量為50.8 萬 u/g；（2）智維 A Ⅱ，批號(hào) 15052808，生產(chǎn)日期為2015年5月28日，檢測有效含量50.6萬u/g；（3）市場產(chǎn)品Ⅰ，國內(nèi)知名產(chǎn)品，生產(chǎn)日期為2015年5月10日，檢測有效含量50.2萬u/g；（4）市場產(chǎn)品Ⅱ，國外知名產(chǎn)品，生產(chǎn)日期為2015年4月24日，檢測有效含量50.9萬u/g。

雞采血設(shè)備：一次性抗凝真空采血管（肝素鈉帶針）。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.2.1 智維A在雞體內(nèi)的生物利用規(guī)律。將青年公雞(3.0±0.2kg)饑餓1d后，用一次性抗凝真空采血管采血5mL，離心后得血清，用反相高效液相色譜法測定血清維生素A含量，測定方法參照許蘊(yùn)等（2005）的研究報(bào)道；持續(xù)饑餓1d，繼續(xù)采血5mL，測定血清中的維生素A含量，并觀察其含量變化。之后配制少量無維生素A日糧（碎米）飼喂雞，正常飲水，當(dāng)雞體內(nèi)維生素A含量下降到一定程度時(shí)，給雞飼喂含智維A(15 000u/kg)的日糧，使其保證正常采食和飲水，并盡量減少應(yīng)激。測定雞采食含智維A日糧后不同時(shí)間點(diǎn)的血清維生素A含量。并根據(jù)測定結(jié)果，確定智維A的生物利用率規(guī)律。根據(jù)采血次數(shù)、實(shí)驗(yàn)雞的應(yīng)激狀況以及血清維生素A的含量變化來確定實(shí)際采血時(shí)間，試驗(yàn)期共15d。

1.2.2 智維A與其他市場產(chǎn)品生物利用率的比較。選用青年蛋雞75只，隨機(jī)分成5個(gè)組，分別為對(duì)照組、A組、B組、C組、D組，每個(gè)處理5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)3只雞，試驗(yàn)周期7d?；A(chǔ)日糧為雞場日常飼料，在此日糧基礎(chǔ)上維生素A的添加水平分別為：對(duì)照組不添加，4個(gè)處理組均添加不同的維生素A 15 000u/kg，進(jìn)行多級(jí)混合，使維生素A樣品均勻分布在日糧中。經(jīng)檢測維生素A的收率都接近100%。試驗(yàn)雞網(wǎng)上飼養(yǎng)，自由采食，自由飲水；蛋雞從試驗(yàn)期喂養(yǎng)至第7天時(shí)，每個(gè)組取5只體重相近的雞，用一次性抗凝真空采血管采血5mL，以4 000r/min離心10min分離血清，采用反相高效液相色譜法測定血清中維生素A的含量。試驗(yàn)分組見表1。

表1 不同維生素A在蛋雞中生物利用率的比較

1.3 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，并用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件分析顯著性。

2 試驗(yàn)結(jié)果與分析

2.1 智維A在雞體內(nèi)的生物利用規(guī)律

2.1.1 雞饑餓階段血清維生素A的變化規(guī)律。饑餓時(shí)間段的雞血清維生素A的數(shù)據(jù)及趨勢見表2和圖1。從表中可看出，饑餓第0d時(shí)，血清維生素A水平為448.4ng/mL，洪平（2012）等報(bào)道黃羽肉雞的日糧維生素A水平為12 000u/kg時(shí)，其血清維生素A水平在0.37~0.59μg/mL，本試驗(yàn)中的血清維生素A水平與這個(gè)報(bào)道接近。饑餓第2d時(shí)為341.3ng/mL，第4d時(shí)為272.2ng/mL，第6d時(shí)為229.2ng/mL。可以看出，隨著饑餓時(shí)間的延長，血清維生素A水平逐漸下降，到第6d時(shí)已經(jīng)下降到較低水平，此時(shí)實(shí)驗(yàn)雞的應(yīng)激極大，停止饑餓試驗(yàn)，給雞正常采食含智維A日糧，正常飲水。

表2 雞饑餓階段的血清中維生素A含量ng/mL

圖1 雞血清維生素A含量的變化規(guī)律

表3 雞采食含智維A日糧后的血清中VA含量ng/mL

2.1.2 雞采食含智維A日糧的血清維生素A含量變化。雞采食智維A后的血清維生素A水平見表3和圖1，雞饑餓6d后開始飼喂含智維A日糧，第6d的血清維生素A含量為229.2ng/mL，隨著雞正常采食，血清中的維生素A水平開始上升，1d后維生素A水平迅速回升到271.5ng/mL，說明智維A有較快的補(bǔ)償能力，在有較大應(yīng)激情況下能迅速提高血清維生素A水平。到第8d時(shí)，維生素A水平上升到314ng/mL，隨后緩慢上升，上升到405.7ng/mL需要6d時(shí)間，此階段維生素A水平回升較慢。第15d時(shí)，血清維生素A到達(dá)590.5ng/mL，這個(gè)水平已經(jīng)遠(yuǎn)高于基礎(chǔ)水平（448.4 ng/mL），這說明維生素A水平恢復(fù)到正常，雞的代謝歸于正常。

整個(gè)試驗(yàn)期間血清維生素A水平變化情況如圖1，從圖中可以看出，在饑餓期間，雞血清維生素A水平快速下降，到第6d下降到最低。正常采食含智維A日糧后2d內(nèi)血清維生素A水平快速回升，此后緩慢升高，到第12d時(shí)達(dá)到405.7ng/mL，接近正常水平，到第15d時(shí)到達(dá)590.5ng/mL，已經(jīng)超過正常水平。根據(jù)圖1的趨勢，雞體內(nèi)血清維生素A含量約在第13d回到饑餓試驗(yàn)前的水平，即約采食含智維A日糧的第7d。

總體來看，智維A有較高的生物利用率，能迅速補(bǔ)償雞體內(nèi)的缺乏。在動(dòng)物體內(nèi)極度缺乏且有較大應(yīng)激的情況下，添加智維A使雞體內(nèi)維生素A回到正常水平需要將近7d，在實(shí)際正常養(yǎng)殖過程中，智維A的生物利用過程會(huì)更快。

2.2 智維A與其他市場產(chǎn)品的生物利用率比較

表4 雞血清中維生素A的含量ng/mL

圖2 雞血清中的維生素A含量

不同組別中的血清維生素A含量見表4和圖2，對(duì)照組的血清維生素A含量為494.4ng/mL，4個(gè)處理組的雞血清維生素A含量分別為智維AⅠ556.3 ng/mL，智維AⅡ 604.4ng/mL，市場產(chǎn)品Ⅰ555.8 ng/mL，市場產(chǎn)品Ⅱ 555.8ng/mL。從數(shù)值上來看，4個(gè)試驗(yàn)組均要高于對(duì)照組，說明額外添加維生素A較好的補(bǔ)充了雞對(duì)維生素A的需要。在統(tǒng)計(jì)上來看，4個(gè)處理組與對(duì)照組及處理組之間差異不顯著（P＞0.05），說明這4種維生素A制劑產(chǎn)品在雞體內(nèi)的生物利用率沒有明顯差異。從數(shù)值上來看，智維AⅠ和市場產(chǎn)品Ⅰ非常接近，說明這兩種維生素A產(chǎn)品的生物利用率相近，智維AⅡ達(dá)到604.4ng/mL，在4個(gè)維生素A產(chǎn)品中最高，說明智維AⅡ有相對(duì)較高的生物利用率。總體來看，試驗(yàn)結(jié)果表明額外添加4種維生素A都補(bǔ)充了雞體內(nèi)的維生素A需要。另外，4種維生素A產(chǎn)品的生產(chǎn)日期和保存時(shí)間相近，其中兩種智維A產(chǎn)品的生物利用率較高，與市場上的兩種主流產(chǎn)品沒有顯著差異（P＞0.05）。在本試驗(yàn)條件下，雞正常采食兩個(gè)批次含智維A的日糧7 d后，雞體內(nèi)血清維生素A水平分別達(dá)556.3 ng/mL和604.4ng/mL。

3 結(jié)論

3.1 當(dāng)雞體內(nèi)極度缺乏維生素A時(shí)，添加智維A能快速補(bǔ)充雞體內(nèi)維生素A的需要并在第7d時(shí)使雞體內(nèi)維生素A水平回到正常。

3.2 在本試驗(yàn)條件下，雞正常采食兩個(gè)批次含智維A的日糧7d后，雞體內(nèi)血清維生素A水平分別達(dá)556.3ng/mL和604.4ng/mL。

[1]許蘊(yùn)，馬經(jīng)野，付林．反相高效液相色譜法測定人血清中維生素 A 含量[J]．深圳中西醫(yī)結(jié)合雜志，2005，15（3）：175～182.

[2]洪平，蔣宗勇，蔣守群.維生素A添加水平對(duì)22～42日齡黃羽肉雞生長性能、血清和肝臟維生素A含量及抗氧化能力的影響[J]．動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào) 2012，24（11）：2110～2117.