霍玉發(fā)，蔣選舉

白城市疾病預防控制中心，吉林白城 137000

黃曲霉毒素B1是已知化學物質(zhì)中致癌性最強的一種，耐熱，裂解最低溫度為280℃，一般烹調(diào)加工溫度下難以破壞?；ㄉ⒂衩?、稻谷、小麥等糧油食品是黃曲霉毒素B1污染的主要食物，釀制調(diào)味品所使用的稻谷類等可能被黃曲霉毒素B1污染，致使調(diào)味品中可能含有這種毒性物質(zhì)，因此，必須使用適宜的檢測方法測定調(diào)味中黃曲霉毒素B1含量。為此筆者應(yīng)用GB/T5009.23-2006《食品衛(wèi)生檢驗方法 理化部分》中高效液相色譜法（第三法）檢測調(diào)味品中黃曲霉毒素B1含量，應(yīng)用測量不確定度理論建立數(shù)學模型，分析掌握導致實驗結(jié)果誤差的關(guān)鍵因素，提高實驗數(shù)據(jù)結(jié)果的可信性和有效性?，F(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 實驗部分

1.1實驗樣品來源

該單位衛(wèi)生科采集的調(diào)味品安全風險檢測黃曲霉毒素B1樣品。

1.2實驗方法

《食品衛(wèi)生檢驗方法理化部分》GB/T5009.23-2006。

1.3實驗試劑及器材

黃曲霉毒素B1標準品制造商給出擴展不確定度為（2.0±1.5）%（農(nóng)業(yè)部環(huán)境科研監(jiān)測所提供）；1、10、20 mL移液管；25、100 mL容量瓶；Aglent1260型液相色譜儀（認證編號 BCSJK-LH-039）。

1.4實驗操作

按《食品衛(wèi)生檢驗方法理化部分》GB/T5009.23-2006操作。

1.5計算公式和實驗結(jié)果

結(jié)果計算公式：

式中：ω-試樣中黃曲霉毒素B1的含量，單位μg/kg；

A-樣品洗脫液黃曲霉毒素B1的峰面積，單位μg；

V-試樣提取過程中提取液的體積，單位mL；

f-試樣溶液衍生后較衍生前的濃縮倍數(shù)；

V-通過免疫親和柱被測樣品的體積，單位mL；

m-試樣的取樣質(zhì)量單位，g。

按標準檢驗方法10次重復測定結(jié)果：

2 各不確定度來源

黃曲霉毒素B1檢測過程中各不確定度來源，見表1。

表1 檢測過程中的不確定度來源

3 建立檢測結(jié)果的不確定度計算數(shù)學模型

4 各分量不確定度的計算

4.1 樣品引入的不確定度

4.1.1 樣品制備過程中帶來的不確定度 a：取樣（樣品均勻性）該實驗依據(jù)GBT5413.37-2010規(guī)定，將樣品充分混勻后隨機取樣，可認為是均勻的，代表性充分，由此帶來的不確定度可忽略不計。b：稱重過程：①稱量變動性，根據(jù)歷史記載，在50 g以內(nèi)，變動性標準偏差為0.05 mg，則：u1﹙m﹚=0.05 mg。②天平校正產(chǎn)生的不確定度，按檢定證書給定為±0.005 mg，按均勻分布，則校正產(chǎn)生的不確定度為：u2（m）=0.0289 g。

由于天平稱量了2次（空瓶和空瓶+樣品）所以天平引起的不確定度為：u2（m）=0.00408 g。

則由天平引起的相對不確定度為：

4.1.2 樣品的回收率 根據(jù)標準方法的要求，樣品處理過程存在損失或污染方法回收率在90%～105%之間。由于 b+＝(105－100)%＝5%，b－＝（100－90）%＝10%，根據(jù)公式計算得=4.33%。

4.1.3 樣品的定容過程引入的不確定度 容量誤差：根據(jù)JJG646-1990《定量、可調(diào)移液器試行檢定規(guī)程》規(guī)定1 mL可調(diào)移液器吸取1 mL時容量誤差為1.5%。

4.2 標準溶液的不確定度

4.2.1 標準儲備液的不確定度 購于國家標準物質(zhì)中心，編碼（SB05-195-2008，（k＝2）±0.5%），u(ρ)＝0.25 μg/mL

4.2.2 標準儲備液的稀釋過程 采用 （1±0.015）mL移液管和（100±0.10）mLA 級容量瓶來完成，f＝f（100）。由容量誤差、溫度、人員讀書和重復性4個不確定度來源分別計算（過程略）。Urel（V 移）＝0.867%mL，urel（V 容）＝0.066%mL，urel（f100）＝0.87%。則由標準物質(zhì)引入的相對不確定度為 ur（C 標）＝0.89%。

4.3 標準曲線擬合校準產(chǎn)生的不確定度

4.3.1 擬合過程 采用5個質(zhì)量水平的標準溶液，測定2次，得到相應(yīng)的濃度值值。用最小二乘法進行擬合，得到直線方程和相關(guān)系數(shù)，見表2和表3。

表2 標準溶液質(zhì)量－儀器示值結(jié)果

表3最小二乘法擬合標準溶液質(zhì)量－儀器示值結(jié)果

SR:回歸曲線的剩余標準差

式中：Aoj-各標準液的實際響應(yīng)值

-根據(jù)回歸曲線算出的理論值

n-回歸曲線的點數(shù)（每個標準溶液濃度進行3次測量工15次）

4.3 .2由標準曲線擬合帶來的標準不確定度

式中：u（C）-標準曲線擬合帶來的不確定度b-斜率

SR-回歸曲線的剩余標準差

P-待測樣品重復測定次數(shù)

n-回歸曲線的點數(shù)

標準曲線擬合標準帶來的相對不確定度：

4.4 結(jié)果的重復性帶來的不確定度值

此樣品在重復條件下，進行10次獨立測定，其結(jié)果的算術(shù)平均值為9.82μg/kg。

單次測量的不確定度：u（xi）=0.27 μg/kg。

算術(shù)平均值的不確定度為0.853μg/kg。

測量結(jié)果的相對不確定度為0.87%。

4.5 濃度值量化誤差引起的不確定度分量

儀器的分辨率為0.001，按均勻分布，其不確定度為：

5 各不確定度分量

合成相對標準不確定度：

Urel（X）＝7.305%

合成標準不確定度：u（X）＝7.3%×9.8＝0.715 μg/kg

擴展不確定度為：U＝ku（k＝2）＝0.715 mg/L×2≈1.43μg/kg

結(jié)果：X=（9.8±1.43）μg/kg（k＝2），見表 4。

表4各不確定度分量

6 討論

通過對調(diào)味品中黃曲霉毒素B1檢測結(jié)果的不確定度來源分析可以看出，樣品的回收、標準儲備液稀釋、定容、和分光光度法標準曲線擬合過程引起的不確定度較大，是造成實驗室誤差的主要因素。采用化學分析計算，建立測量結(jié)果的溯源性，提高實驗室檢測水平，為判斷調(diào)味品質(zhì)量提供有效依據(jù)。

[1]中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗疫總局、中國國家標準差化管理委員會.GB/T5009.23-2006.食品衛(wèi)生檢驗方法理化部分（一）[S].北京：中國標準出版社，2006.

[2]中國實驗室國家認可委員會.化學分析中不確定度的評估指南[M].北京：中國計量出版社，2002:14-15.

[3]國家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局認證與實驗室評審管理司.計量認證/審查認可（驗收）評審準則宣貫指南[M].北京：中國計量出版社，2001:52-55.