余蕾

（廈門海洋職業(yè)技術(shù)學(xué)院，福建廈門361100）

水蠟（Ligustrum obtusifoliu Sieb.et Zucc）為木犀科女貞屬中的一種落葉灌木，該樹木適應(yīng)性強(qiáng)，耐寒，對(duì)土壤要求不嚴(yán)，萌蘗力強(qiáng)，耐修剪，在園林中應(yīng)用非常廣泛，常被修剪成各種造型或自然式孤植、列植、叢植等，也可被修剪成綠籬，用于分割空間。該樹木的果實(shí)為黑色或紫黑色核果，橢圓形，北方地區(qū)成熟于9月，成熟時(shí)綴滿枝頭，非常耀眼，目前園林中種植的水蠟果實(shí)大部分都自然脫落，無人采集加以利用。而據(jù)資料記載，水蠟果實(shí)中含有多種藥用成分，可滋補(bǔ)肝腎、明目烏發(fā)等，另研究表明，水蠟果實(shí)中含有豐富的花色素苷類物質(zhì)，可提取色素[1]。食用色素是食品添加劑的重要組成部分，在食品工業(yè)、醫(yī)藥、化妝品及日常用品中被廣泛應(yīng)用，而天然色素由于味香無毒，色調(diào)誘人，同時(shí)具有一定的營養(yǎng)及藥理作用，更受到人們的喜愛[2-3]。因此本試驗(yàn)以水蠟果實(shí)為原料，對(duì)其色素提取工藝及色素性質(zhì)進(jìn)行研究，為其在食品工業(yè)中的應(yīng)用提供參考，同時(shí)達(dá)到對(duì)園林中廢棄的大量水蠟果實(shí)加以充分利用，起到變廢為寶的作用。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

水蠟果實(shí)2013年9月6日于廈門海洋職業(yè)技術(shù)學(xué)院及周邊地區(qū)種植的水蠟樹上采集（果皮顏色為黑色或紫黑色即為成熟），經(jīng)過清洗、搗碎成液后備用；試驗(yàn)儀器有電子天平（UV-1700）：上海麗馳計(jì)量?jī)x器有限公司；分光光度計(jì)：南京菲勒儀器有限公司；HH-4數(shù)溫恒溫水浴鍋：上海赫田科學(xué)儀器有限公司等；主要 試 劑 有 95%C2H5OH、 蔗 糖 、30%H2O2、Na2SO3、CaCl2、FeCl3·6H2O、CuSO4·5H2O、ZnSO4、MgSO4·7H2O 等均為分析純[4]。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 提取條件比較

影響色素提取的主要條件有提取劑乙醇濃度、溫度、固液比和提取時(shí)間[5]，提取條件比較主要采用L9（34）正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)方案，具體見表1。

表1 水蠟果實(shí)色素提取正交試驗(yàn)因素水平Table 1 The orthogonal experimental factors level on the extraction of pigment from Ligustrum obtusifoliu Sieb.et Zucc

1.2.2 色素液的最大波長

對(duì)水蠟色素進(jìn)行1∶25（mg/mL）稀釋后，放在波長400 nm～700 nm進(jìn)行掃描，確定最大吸收波長，然后在最大吸收波長處測(cè)定吸光度，見圖1光譜掃描圖。

圖1 光譜掃描Fig.1 The figure of spectral scanning

由圖1可知水蠟色素水溶液最大吸收波長在532 nm處。

1.2.3 水蠟色素性質(zhì)的研究

取經(jīng)過 1∶25（mg∶mL）稀釋后的色素液 100 mL，在室內(nèi)自然光下每隔7 d測(cè)其吸光度，然后測(cè)其在532 nm的吸光度值；配制0%、4%、6%、8%、10%濃度的蔗糖溶液，各加2 mL的色素稀釋液，測(cè)其在532 nm的吸光度值；配制0.5%、1%、1.5%、2%、2.5%、3%濃度的食鹽溶液，各加2 mL的色素稀釋液，測(cè)其在532 nm的吸光度值；配制 0.06%、0.12%、0.24%、0.48%、0.96%濃度的H2O2溶液，各加2 mL的色素稀釋液，測(cè)其在532 nm 的吸光度值；配制 0.02、0.025、0.03、0.035、0.04 moL/L濃度的Na2SO3溶液，各加2 mL的色素稀釋液，測(cè)其在532 nm的吸光度值；配制0.1 moL/L CaCl2、FeCl3·6H2O、CuSO4·5H2O、ZnSO4、MgSO4·7H2O 濃度的金屬離子溶液，各加2mL的色素稀釋液，測(cè)其在532nm的吸光度值[6]。

2 結(jié)果與分析

2.1 色素提取條件的比較

對(duì)影響色素提取的4個(gè)因素提取劑乙醇濃度、溫度、固液比和提取時(shí)間進(jìn)行正交試驗(yàn)比較，結(jié)果見表2。

表2 水蠟果實(shí)色素提取正交試驗(yàn)L9（34）結(jié)果Table 2The orthogonal experimental results of L9（34）on the extraction of pigment from Ligustrum obtusifoliu Sieb.et Zucc

由表2可知，C的R值最大，D的R值最小，得出4個(gè)因素對(duì)提取的影響大小順序?yàn)镃＞A＞B＞D，即固液比對(duì)色素提取的影響最大，提取時(shí)間對(duì)色素的提取影響最小。另得出色素提取的最佳組合A3B3C1D3，但該組合未在正交試驗(yàn)中，因此通過與正交表中得分最高的組合進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)后，最終確定組合為A3B3C1D。

2.2 色素性質(zhì)的研究

按照1.2.3的方法，測(cè)定了放置不同時(shí)間、不同濃度的蔗糖處理、不同濃度的食鹽處理、不同濃度的H2O2處理、不同濃度的Na2SO3處理、不同濃度的金屬離子處理后的色素稀釋液在最大波長時(shí)的吸光度值，結(jié)果如圖 2、圖 3、圖 4、圖 5、圖 6、表 3。

圖2 光對(duì)色素性質(zhì)的影響Fig.2 The effect of light on pigment properties

由圖2可知，吸光度隨著時(shí)間的增長呈減小趨勢(shì)，說明水蠟果實(shí)色素對(duì)光的穩(wěn)定性差，平時(shí)保存要注意避光；由圖3可知，吸光度隨著蔗糖濃度的增加先緩慢增大后又平緩降低，變化不大，說明蔗糖對(duì)色素的性質(zhì)沒有大的影響，日常生活中可以根據(jù)需要在食品添加劑中加適量的蔗糖；由圖4可知，隨著食鹽濃度的增加，吸光度值基本成平行狀態(tài)，說明食鹽對(duì)色素的性質(zhì)無影響，可以作為添加劑使用；由圖5可知，隨著H2O2濃度的增加，吸光度出現(xiàn)緩慢下降的趨勢(shì)，說明該色素的抗氧化性差，今后應(yīng)避免與一些含氧化劑的物質(zhì)相混合；由圖6可知，隨著Na2SO3濃度的增大，吸光度值緩慢上升，說明Na2SO3對(duì)水蠟色素具有較強(qiáng)的還原性；由表3可知，同為0.1 moL/L的Ca2+、Fe3+、Cu2+、Zn2+、Mg2+，但對(duì)應(yīng)的吸光度值不同，Ca2+、Zn2+、Mg2+對(duì)應(yīng)的吸光度值小，基本相同，F(xiàn)e3+、Cu2+對(duì)應(yīng)的吸光度值大，說明這兩種金屬離子容易引起色素褪色，水蠟色素應(yīng)避免和Fe3+、Cu2+混為一起。

圖3 蔗糖對(duì)色素的影響Fig.3 The effect of sucrose on pigment properties

圖4 食鹽對(duì)色素的影響Fig.4 The effect of salt on pigment properties

圖5 過氧化氫對(duì)色素的影響Fig.5 The effect of H2O2on pigment properties

圖6 亞硫酸鈉對(duì)色素的影響Fig.6 The effect of Na2SO3on pigment properties

表3 金屬離子對(duì)水蠟色素的影響Table 3 The effect of metal ions on pigment properties of Ligustrum obtusifoliu Sieb.et Zucc

3 結(jié)論與討論

通過對(duì)影響水蠟色素提取的4個(gè)條件提取劑乙醇濃度、溫度、固液比和提取時(shí)間進(jìn)行正交試驗(yàn)，另通過驗(yàn)證試驗(yàn)后得出水蠟色素提取的最佳條件為：提取劑C2H5OH濃度30%，提取溫度75℃，固液比為1∶10（g/mL），提取時(shí)間90min。另通過對(duì)水蠟色素性質(zhì)進(jìn)行了研究，得出說明水蠟色素對(duì)光的穩(wěn)定性差，平時(shí)保存要注意避光；蔗糖對(duì)色素的性質(zhì)沒有大的影響，日常生活中可以根據(jù)需要在食品添加劑中加適量的蔗糖；食鹽對(duì)色素的性質(zhì)無影響，可以作為添加劑使用；由圖5可知，水蠟色素的抗氧化性差，應(yīng)避免與一些含氧化劑的物質(zhì)相混合；Na2SO3對(duì)水蠟色素具有較強(qiáng)的還原性；Fe3+、Cu2+兩種金屬離子容易引起水蠟色素褪色，應(yīng)避免和含有Fe3+、Cu2+的物質(zhì)混合。該試驗(yàn)主要針對(duì)C2H5OH濃度、溫度、固液比和提取時(shí)間4個(gè)因素進(jìn)行比較，對(duì)其他影響因素還有待于進(jìn)一步研究。

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[5] 何玲玲,王新,張英,等.水蠟果實(shí)天然紅色素的提取工藝研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2009,37(33):16533-16534

[6] 杜鳳國,孫廣仁,姜洪源,等.天女木蘭色素提取工藝及穩(wěn)定性[J].北華大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2011(1):68-74