王譽霖 張文龍 龍小琴 婁濤濤 周 超 徐 宏 周漢華

貴陽中醫(yī)學院，貴州 貴陽 550002

不同寄主植物對桑寄生揮發(fā)性成分的影響研究

王譽霖 張文龍 龍小琴 婁濤濤 周 超 徐 宏 周漢華*

貴陽中醫(yī)學院，貴州 貴陽 550002

目的：考察不同寄主植物對桑寄生(TaxillussutchuenensisDanser)揮發(fā)性成分的組成和含量影響。方法：采集生長在同一地點、同一種群的10種不同寄主植物上的桑寄生樣品，用水蒸汽蒸餾法提取樣品的揮發(fā)性成分，采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(GC-MS)分析鑒定其化學成分，結(jié)合計算機檢索技術(shù)對分離的化合物進行分析測定，應用色譜峰面積歸一化法計算各成分的相對百分含量，比較其差異性。結(jié)果：各個樣品之間揮發(fā)性成分的組成有明顯差異；各個樣品之間揮發(fā)性成分含量也有較大差異。結(jié)論：寄主植物對桑寄生揮發(fā)性成分的組成和含量有明顯影響。

桑寄生；寄主；種群；GC-MS；揮發(fā)性成分

桑寄生為桑寄生科鈍果寄生屬植物桑寄生Taxillussutchuenensis(Lecomte) Danser的干燥帶葉莖枝，具有祛風濕、補肝腎、強筋骨、安胎等功效，臨床用于治療風濕痹痛、腰膝酸軟、筋骨無力、胎動、崩漏經(jīng)多、妊娠漏血、頭暈目眩及高血壓等癥[1-2]。桑寄生為半寄生性植物，且寄主植物的種類較多，十分復雜[3]，不同寄主植物來源的桑寄生成分組成以及藥用功效差異引起了專家學者的關(guān)注[4-5]。此前，劉曉龍等[6]報道了玉蘭(Magnoliadenudata)和油茶(Camelliaoleifera)上桑寄生(T.sutchuenensis)揮發(fā)性成分分析，初步發(fā)現(xiàn)不同寄主植物對桑寄生揮發(fā)性化學成分有明顯的影響。本文采用GC-MS聯(lián)用技術(shù)，對生長在同一地點、同一種群的10種不同寄主植物的桑寄生揮發(fā)性成分進行分析研究，進一步考察寄主植物對桑寄生揮發(fā)性成分的組成與相對含量的影響。

1 儀器與材料

1.1 儀器 GC-MS聯(lián)用儀(HP6890/5975C，美國安捷倫公司)；揮發(fā)油提取器(署牛GG-17)；LT5001E 電子天平(常熟市天量儀器有限責任公司)；PTHW電熱套(鞏義市予華儀器有限責任公司)。

1.2 試劑 正己烷(分析純，上海申博化工有限公司)；重鉻酸鉀(分析純，重慶川江化學試劑廠)；無水硫酸鈉(分析純，成都金山化學試劑有限公司)。

1.3 材料 10種不同寄主植物上的桑寄生樣品均采集于貴州省貴陽市南明區(qū)河濱公園，經(jīng)貴陽中醫(yī)學院中藥鑒定教研室周漢華教授鑒定為桑寄生科鈍果寄生屬植物桑寄生Taxillussutchuenensis(Lecomte) Danser。見表1。

表1 實驗樣品情況

2 方法

2.1 樣品的處理 將采集的桑寄生藥材樣品洗凈陰干。

2.2 揮發(fā)油的提取 稱取200g樣品，剪碎莖枝和葉置于3000ml圓底燒瓶中，加入2000ml水，振搖均勻，連接揮發(fā)油提取器，從上端加水至充滿揮發(fā)油提取器的刻度部分并溢流人燒瓶為止，加入4ml的正丁醇于上層，連接回流冷凝管。將提取器置加熱套中加熱，開始回流后設(shè)定加熱溫度為100℃左右，保持微沸5h，冷卻30min后，開啟揮發(fā)油提取器下端活塞，將水緩緩放出，收集正丁醇層于添有無水硫酸鈉的干凈小燒杯中脫水，后轉(zhuǎn)入2ml容量瓶中，密封，放置冰箱(4℃)備用。

2.3 氣相色譜條件 色譜柱：ZB-5MSI5% Phenyl-95% DiMethylpolysiloxane (30mm×0.25mm×0.25μm)彈性石英毛細管柱；柱溫45℃(保留2min)，以5℃/min升溫至300℃，保持2min；汽化室溫度250℃；載氣為高純He(純度為99.999%)；柱前壓7.62psi，載氣流量1.0ml/min；分流比40∶1；溶劑延遲時間：3.0min。

2.4 質(zhì)譜檢測條件 EI離子源；離子源溫度230℃；四極桿溫度150℃；電子能量70eV；發(fā)射電流34.6μA；倍增器電壓1306V；接口溫度280℃；質(zhì)量范圍20～450amu。

2.5 揮發(fā)性成分組成與相對含量分析 各樣品提取揮發(fā)性成分按上述條件進行測試，得到總離子流圖，見圖1。對總離子流圖中的各峰經(jīng)質(zhì)譜計算機數(shù)據(jù)系統(tǒng)檢索及核對Nist2005和Wiley275標準質(zhì)譜圖，以確定揮發(fā)性化學成分結(jié)構(gòu)，用峰面積歸一化法測定了各化學成分的相對質(zhì)量分數(shù)。見表2。

表2 10種不同寄主植物上的桑寄生樣品揮發(fā)性成分的相對含量

編號No化合物Compounds相對含量Relativecontent%厚樸M.officinalis廣玉蘭M.grandiflora玉蘭M.denudata洋槐R.pseucdoacacia皂莢G.sinensis樸樹C.tetrandra榆樹U.pumila櫻樹P.subhirtella紫薇L.miaindica法國梧桐P.orientails11,2-dime-thyl-Cyclo-pentane1,2-二甲基-環(huán)戊烷1.130000000002Cyclopenta-nol環(huán)戊醇0.9800000000032,2,3-tri-methyl-Hex-ane2,2,3-三甲基-己烷0.980000000004Octane辛烷1.782.73000001.75005Heptane2,4-二甲基-庚烷1.78000004.2803.0306Hexanal己醛4.063.412.693.432.0511.514.763.105.511.337(E)-2-Hexenal(E)-2-己烯醛4.1200.964.0103.0800.641.600.128(Z)-3-Hexen-1-ol(Z)-3-己烯-1-醇36.1423.489.8638.1124.4916.464.203.063.0509(Z)-2-Hexen-1-ol(Z)-2-己烯-1-醇0.82001.9900000010Formicacidhexylester甲酸己酯4.0902.330000000111-Hexanol1-己醇4.0902.339.66019.3902.701.020.1212cis-Linaloloxide順式氧化芳樟醇0.901.5701.0500.811.064.071.570133,7-dime-thyl-1,6-Octadien-3-ol3,7-二甲基-1,6-辛二烯-3-醇9.0727.69000.2615.5015.3330.9728.41014Nonanal壬醛14.749.5806.370.829.8825.319.8017.04015Heptadecane十七烷1.0500000.96000016Nonadecane十九烷5.0900000000017Heneicosane二十一烷5.0903.090001.5600018Pentacosane二十五烷5.0606.64000001.060

3 結(jié)論和討論

寄主植物對桑寄生揮發(fā)性成分組成的影響。10種不同寄主植物上的桑寄生藥材樣品共測到94個揮發(fā)性成分，在10個桑寄生藥材樣品中成分共有率僅有1個成分己醛為100%，占揮發(fā)性成分總數(shù)94的1.06%;共有率90%的1個;共有率80%的1個;共有率70%的4個;共有率60%的1個;共有率50%的5個；共有率≥50% 的共13個，占揮發(fā)性成分總數(shù)94的13.8%。表明同一生長地點不同寄主植物的揮發(fā)性成分的組成有顯著性差異。

10個桑寄生藥材樣品共有的揮發(fā)性成分己醛，在樸樹上的己醛相對百分含量達11.51%，在皂莢上的只有2.05%；共有率90%的成分(Z)-3-己烯-1-醇，在洋槐上的桑寄生的相對百分含量高達38.11%，在紫薇上的僅有3.05%，而在梧桐上的為0；共有率80%的成分壬醛，在厚樸上的桑寄生的相對百分含量達14.74%，在皂莢上的僅有0.82%，而在玉蘭上、梧桐上的為0。表明同一生長地點不同寄主植物的揮發(fā)性成分相對百分含量也存在明顯差異。

本文采用水蒸汽蒸餾提取，用氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)聯(lián)用檢測桑寄生揮發(fā)性成分是當下通行的較為理想的方法，10個桑寄生藥材樣品均來自同一個生長地點、同一個種群，客觀上規(guī)避了因種群不同、生長地點不同、生長環(huán)境不同等因素造成的影響和偏差。結(jié)果表明桑寄生藥材其揮發(fā)性成分的組成以及成分的相對百分含量因寄主植物不同而明顯的有所不同。因此，建議桑寄生的藥學研究不能忽略和排除寄主植物的影響，應該更加注重寄主這個重要因素。

[1] 吳家榮，丘華興．中藥桑寄生原植物學名考[J]．中草藥，1981，12(5)：32-35．

[2] 中國植物志編輯委員會．中國植物志(第二十四卷)[M]．北京：科學出版社，1988：129-130．

[3] 劉曉龍，周漢華，魏小龍，等．黔產(chǎn)桑寄生寄主植物的情況調(diào)查[J]．貴陽中醫(yī)學院學報，2013，35(4)：11-13．

[4] 周漢華，吳家榮．桑寄生與槲寄生初探[J]．貴陽中醫(yī)學院學報，1999，21(4)：59-60．

[5] 周漢華，劉曉龍，錢海兵，等．不同寄主上的桑寄生藥材毒性的比較研究[J]．中國實驗方劑學雜志，2013，19 (24)：274-277．

[6]劉曉龍，周漢華，李姝臻，等．兩種不同寄主植物對桑寄生揮發(fā)性成分的影響[J]．中藥材，2013，36(7)：1104-1110．

Research on the effects of Taxillus sutchuenensis volatile components in different host plants

WANG Yu-lin,ZHANG Wen-long,LONG Xiao-qin,LOU Tao-tao,ZHOU Chao,XU Hong,ZHOU Han-hua*

Guiyang College of Traditional Chinese Medicine，Guiyang 550002,China

Objective To investigate the growth in the same place at the same in different host plants on theTaxillussutchuenensisaffect the composition and content of volatile constituents. Method collecting growing in the same place, the same ranking. 10 different host plant group on its host plant samples, extracting volatile components of the sample water vapor distillation method, using gas chromatography - mass spectrometry (GC-MS)analysis and identification of its chemical composition, combined with compound computer retrieval technique on the separation structures were identified the relative percentage,calculated for each application component chromatographic peak area normalization method, comparing the differences between.Results composed of various samples have the obvious difference between the volatile components of the. among those samples with different content of volatile constituents. Conclusion there are obviously influence the composition and content of volatile components of the host plant.

HostTaxillussutchuenensis；The same population；GC-MS；Volatile components

貴陽中醫(yī)學院研究生教育創(chuàng)新計劃項目(ZYY12019)；貴州省科學技術(shù)廳項目[黔科合中藥(2011)LKZ7045]；貴州省科學技術(shù)基金項目[黔科合J字(2013)2072]。

王譽霖(1989-)，女，貴州貴陽人，貴陽中醫(yī)學院2012級碩士研究生。

周漢華(1957-)，男，教授，碩士研究生導師，從事中藥鑒定學及中藥資源學教學和研究。E-mail：txty_008@163.com。

R284.1

A

1007-8517(2015)08-0017-10

2015.02.15)