李敏芳 李亞清 陳 生 熊 廣 余 燕

深圳市中醫(yī)院呼吸科，廣東 深圳 518033

上氣道咳嗽方抗炎消腫鎮(zhèn)痛作用的實驗研究

李敏芳 李亞清 陳 生 熊 廣 余 燕

深圳市中醫(yī)院呼吸科，廣東 深圳 518033

目的：研究上氣道咳嗽方抗炎消腫鎮(zhèn)痛作用。方法：采用二甲苯致小鼠耳廓炎性腫脹、蛋清致大鼠足趾腫脹模型，觀察上氣道咳嗽方的抗炎消腫作用；采用小鼠熱板致痛模型，觀察上氣道咳嗽方的鎮(zhèn)痛作用。結(jié)果：高、中劑量上氣道咳嗽方能明顯減輕二甲苯所致小鼠耳廓腫脹和蛋白所致大鼠足趾腫脹，低劑量上氣道咳嗽方對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹和蛋白所致大鼠足趾腫脹無明顯影響；高、中劑量上氣道咳嗽方能明顯延長小鼠熱板致痛小鼠出現(xiàn)舔足的時間，低劑量上氣道咳嗽方對小鼠熱板致痛小鼠出現(xiàn)舔足的時間無明顯影響。結(jié)論：上氣道咳嗽方有明顯的抗炎消腫鎮(zhèn)痛作用。

上氣道咳嗽方；抗炎消腫；鎮(zhèn)痛

上氣道咳嗽方由辛夷10g，川芎10g，白芷10g，細(xì)辛3g，防風(fēng)10g，桔梗10g，魚腥草15g，黃芩10g，五味子10g組成，具有宣肺通竅、化痰止咳的功效，臨床應(yīng)用于上氣道咳嗽綜合征、急慢性鼻炎、阻塞性睡眠呼吸暫停綜合征等。本研究利用動物實驗觀察該方的抗炎消腫鎮(zhèn)痛作用，以期為臨床應(yīng)用提供藥效學(xué)資料和依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 健康昆明小鼠，SPF級，雌雄各半，體重18～22g，健康SD大鼠，SPF級，雌雄各半，體重180～220g，以上動物購自廣州中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心，動物合格證號：scxk(粵)2008-0002。

1.2 藥品及試劑 阿司匹林腸溶片(批號：BJ18653，拜耳醫(yī)藥保健有限公司 )；上氣道咳嗽方(深圳市中醫(yī)院制劑室提供，臨床成人每日用量：98g/60kg，參照體表面積比換算動物臨床等效劑量[1])；雞蛋購自超市；二甲苯(批號: 20131209，天津市大茂化學(xué)試劑廠)；其他試劑均為分析純。

1.3 方法

1.3.1 對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響[2-3]取50只昆明種小鼠，18～22g，按體重隨機(jī)分為5組，每組10只，分別為：空白對照組，阿司匹林組，上氣道咳嗽方高、中、低劑量組。每天灌胃給藥，連續(xù)7d，1次/d?？瞻讓φ战M予蒸餾水20ml/kg，阿司匹林組予阿司匹林混懸液0.156g/kg，上氣道咳嗽方高、中、低劑量組分別給予上氣道咳嗽方25.48、12.74、6.37g/kg。末次灌胃給藥后30min，將各組小鼠右耳涂抹二甲苯致炎，1h后將小鼠脫頸處死，沿耳廓基線剪下兩耳，用直徑8mm金屬打孔器分別打下小鼠左右圓耳片，稱重。以左右耳質(zhì)量之差為其腫脹程度，計算各組耳腫脹度。炎癥抑制率(%)=(空白對照組腫脹度-給藥組腫脹度)/空白對照組腫脹度×100%。

1.3.2 對蛋清致大鼠足趾腫脹的影響[4]取50只SD大鼠，180～220g，按體重隨機(jī)分為5組，每組10只，分別為：空白對照組，阿司匹林組，上氣道咳嗽方高、中、低劑量組。每天灌胃給藥，連續(xù)7d，1次/d。空白對照組予蒸餾水10ml/kg，阿司匹林組予阿司匹林混懸液0.108 g/kg，上氣道咳嗽方高、中、低劑量組分別給予上氣道咳嗽方17.64、8.82、4.41g/kg。末次給藥前用足趾容積測量儀測大鼠右足趾容積，然后灌胃給藥，給藥1h后在每只大鼠右足趾皮下注射新鮮蛋清0.1ml致炎，測定1、2、3、4、6h后大鼠右足趾容積，減去致炎前大鼠右后足趾的正常體積，即為大鼠在不同時間段的足趾腫脹度。比較不同時間段各組大鼠足趾腫脹度的差異。

1.3.3 對小鼠熱板致痛實驗的影響[5]取50只昆明小鼠，18～22g，置于(55±0.5)℃熱板上，記錄小鼠自熱板上至出現(xiàn)舔后足反應(yīng)所需的時間，即為痛閾值，凡小于5s或大于30s及跳躍者均淘汰，合格小鼠再測1次痛閾值，取兩次平均值作為各鼠痛閾值。按照痛閾值隨機(jī)分為五組，分組同上。每天灌胃給藥，連續(xù)7d，1次/d?？瞻讓φ战M予蒸餾水20ml/kg，阿司匹林組予阿司匹林混懸液0.156g/kg，上氣道咳嗽方高、中、低劑量組分別給予上氣道咳嗽方25.48、12.74、6.37g/kg。于末次給藥30min后測定痛閾值，并計算痛閾提高百分率，痛閾提高百分率=(給藥后平均痛閾值-給藥前平均痛閾值)/給藥前平均痛閾值×100%。

2 結(jié)果

2.1 上氣道咳嗽方對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響 與空白對照組相比，阿司匹林組、上氣道咳嗽方高、中劑量組二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹度明顯降低(P<0.01，P<0.05)。隨上氣道咳嗽方的劑量增加，小鼠耳廓腫脹度降低，抑制率增大。見表1。

表1 上氣道咳嗽方對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響

注：與空白對照組相比，**P<0.01，*P<0.05。

2.2 上氣道咳嗽方對蛋清所致大鼠足趾腫脹的影響 與空白對照組比較，上氣道咳嗽方高、中劑量組能明顯減少蛋清所致大鼠足趾腫脹(P<0.01，P<0.05)，提示上氣道咳嗽方有顯著的抗炎消腫作用，能顯著抑制蛋清所致大鼠足趾腫脹。見表2。

2.3 上氣道咳嗽方對小鼠熱板致痛實驗的影響 與空白對照組相比，上氣道咳嗽方高、中劑量組能夠顯著提高小鼠熱刺激的痛閾值，與空白對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01，P<0.05)。見表3。

表2 上氣道咳嗽方對蛋清所致大鼠足趾腫脹的影響 ±s)

注：與空白對照組相比，**P<0.01，*P<0.05。

表3 上氣道咳嗽方對熱板法致小鼠疼痛反應(yīng)時間的影響 ±s)

注：與空白對照組相比，**P<0.01，*P<0.05。

3 討論

上氣道咳嗽綜合征是指由鼻部疾病如鼻炎、鼻竇炎、鼻息肉等引起分泌物倒流至鼻后或咽喉等部，甚至反流進(jìn)入聲門或氣管，導(dǎo)致患者出現(xiàn)以咳嗽為主要臨床表現(xiàn)的綜合征[6-7]，屬于中醫(yī)的“久嗽”、“鼻窒”、“鼻淵”等范疇[8]。目前，上氣道咳嗽綜合征病理生理學(xué)機(jī)制尚未完全清楚，但后鼻孔滴漏為最常見的病因之一，認(rèn)為當(dāng)后鼻孔分泌物墜落到喉咽部時可刺激位于黏膜表面的神經(jīng)末梢及咳嗽受體，從而引起鼻黏膜發(fā)生炎癥反應(yīng)(如鼻炎或鼻竇炎)而產(chǎn)生炎性或化學(xué)性質(zhì)，該介質(zhì)可直接刺激喉咽部的咳嗽受體和傳入神經(jīng)分支而引發(fā)咳嗽。抗感染、抗黏膜炎癥和減少鼻分泌物是其重要治療方法[9]。

上氣道咳嗽方為臨床治療上氣道咳嗽綜合征的經(jīng)驗方，具有宣肺通竅、化痰止咳的作用，對細(xì)菌、病毒感染及非感染性炎癥所致的咳嗽有顯著的臨床療效?，F(xiàn)代藥理研究表明，方中辛夷具有收縮鼻粘膜血管作用，能促進(jìn)粘膜分泌物的吸收，減輕炎癥反應(yīng)[10]；魚腥草、黃芩中的魚腥草揮發(fā)油、黃酮類化合物、黃芩素、黃芩苷對病毒、多種革蘭氏陽性菌及陰性菌有不同程度的抑制作用，能增強白細(xì)胞吞噬能力，提高機(jī)體免疫力[11-12]。

實驗采用二甲苯致小鼠耳廓腫脹和蛋清致大鼠足趾腫脹兩種急性炎癥癥模型評價上氣道咳嗽方對早期急性炎癥的影響，以熱板致痛實驗評價上氣道咳嗽方的鎮(zhèn)痛作用。結(jié)果表明，上氣道咳嗽方的高、中劑量對二甲苯所致小鼠耳廓炎性腫脹和蛋清致大鼠足趾腫脹具有明顯的抑制作用，提示上氣道咳嗽方具有抗炎消腫作用；高、中劑量組能延長熱板法中小鼠出現(xiàn)舔足的時間，提示上氣道咳嗽方具有鎮(zhèn)痛作用。綜上所述，上氣道咳嗽方有明顯的抗炎消腫鎮(zhèn)痛作用。

[1] 陳奇．中藥藥理研究方法學(xué)[M]．北京：人民衛(wèi)生出版社，2000： 356-357．

[2] 徐叔云，卞如濂，陳修．藥理實驗方法學(xué)[M].3版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2003：911-936．

[3] 邱建永，歐陽煒，陳玉興．桑麻合劑對鼠耳廓炎性腫脹、足趾腫脹及炭粒廓清能力的影響[J]．廣東醫(yī)學(xué)，2014，35(13)：2010-2012．

[4] 董靜．青白散對慢性軟組織損傷模型大鼠的抗炎和抗氧化作用[J]．中藥藥理與臨床，2011，27(6)：93-95．

[5] 秦莉花，吳艷飛，陳曉陽,等．虎射利咽含片的抗炎、鎮(zhèn)痛作用及對小鼠免疫系統(tǒng)的影響[J]．中國老年學(xué)雜志，2014，11(34)：3065-3067．

[6] 陳清蘭，胡成平．呼吸疾病癥狀鑒別診斷學(xué)[M]．北京：科學(xué)出版社，2009:763-770．

[7] 張巧，馬士里，黃贊勝，等．上氣道咳嗽綜合征病因的初步研究[J]．中國呼吸與危重監(jiān)護(hù)志，2010，9(5)：458-460．

[8] 劉星，王宇其，王飛．鼻后滴流綜合征的中醫(yī)藥研究進(jìn)展[J]．湖南中醫(yī)雜志，2013，29(11)：152-154．

[9] Wang De-yun．Upper airway cough syndrome[J]．Med J Chin PLA，2014,39(5)：354-357．

[10] 王永慧，葉方，張秀華．辛夷藥理作用和臨床應(yīng)用研究進(jìn)展[J]．中國醫(yī)藥導(dǎo)報，2012，9(16)：12-14．

[11] 杜向群，陳敏燕，許穎．魚腥草成分、藥理的研究進(jìn)展[J]．江西中醫(yī)藥，2012，43(250)：66-68．

[12] 辛文妤，宋俊科，何國榮,等．黃芩素和黃芩苷的藥理作用及機(jī)制研究進(jìn)展[J]．中國新藥雜志，2013，22(6)：647-653．

2014年度深圳市衛(wèi)生計生系統(tǒng)科研項目非資助類項目(201402087)。

R285.5

A

1007-8517(2015)08-0008-02

2015.01.20)