趙耀東，王喜鳳，王建文，韓豆瑛，趙中亭

(1.甘肅中醫(yī)藥大學(xué)，甘肅 蘭州 730000； 2.甘肅省康復(fù)中心醫(yī)院，甘肅 蘭州 730000)

·實(shí)驗(yàn)研究·

溫通針?lè)▽?duì)慢性非細(xì)菌性前列腺炎大鼠FN、LN的影響*

趙耀東1，王喜鳳1，王建文2，韓豆瑛2，趙中亭1

(1.甘肅中醫(yī)藥大學(xué)，甘肅 蘭州 730000； 2.甘肅省康復(fù)中心醫(yī)院，甘肅 蘭州 730000)

目的：觀察溫通針?lè)▽?duì)慢性非細(xì)菌性前列腺炎大鼠血清纖維連接蛋白(FN)、層粘連蛋白(LN)含量的影響，探討溫通針?lè)ㄖ委熉苑羌?xì)菌性前列腺炎的作用機(jī)理。方法：取Wistar雄性大鼠60只，以體積分?jǐn)?shù)為250 mL/L消痔靈溶液(以蒸餾水稀釋)0.2 mL(每單側(cè)葉注射0.1mL)注入前列腺背側(cè)葉，造成慢性非細(xì)菌性前列腺炎大鼠動(dòng)物模型。造模后被隨機(jī)分為模型對(duì)照組、前列康組、平補(bǔ)平瀉組和溫通針?lè)?組，每組15只。模型對(duì)照組不予任何刺激；前列康組給予前列康灌胃；平補(bǔ)平瀉組和溫通針?lè)ńM均取穴關(guān)元、曲骨、行間，平補(bǔ)平瀉組行平補(bǔ)平瀉手法，溫通針?lè)ńM行溫通針?lè)ā?個(gè)治療組均每日治療1次，共治15次，最后檢測(cè)各組大鼠血清中FN、LN的水平。結(jié)果：溫通針?lè)ńM較平補(bǔ)平瀉組和前列康組能明顯降低大鼠血清中的FN、LN水平(P均<0.01)。結(jié)論：溫通針?lè)ㄖ委熉苑羌?xì)菌性前列腺炎療效顯著，效果獨(dú)特，其作用機(jī)制與降低FN和LN含量、調(diào)節(jié)機(jī)體微循環(huán)有關(guān)。

溫通針?lè)?；慢性非?xì)菌性前列腺炎；FN、LN；動(dòng)物；大鼠

慢性非細(xì)菌性前列腺炎(chronic non-bacterial prostatitis，CNBP)是由非細(xì)菌感染因素引起的前列腺慢性炎癥性疾病,為中青年男性泌尿生殖系統(tǒng)的常見(jiàn)病和多發(fā)病。相關(guān)統(tǒng)計(jì)[1-2]表明：CNBP的發(fā)病率遠(yuǎn)高于細(xì)菌性前列腺炎，占慢性前列腺炎發(fā)病總數(shù)的90%～95%。該病病因復(fù)雜、病程遷延、誘發(fā)因素多、癥狀范圍廣、臨床療效欠佳，給臨床診治帶來(lái)了一定的難度[3]。本課題組多年的實(shí)驗(yàn)研究[3-4]和臨床研究[5]表明，由已故全國(guó)著名針灸專家鄭魁山教授獨(dú)創(chuàng)的溫通針?lè)ㄔ贑NBP的防治上已取得了滿意的效果。為進(jìn)一步探討溫通針?lè)ㄗ饔玫莫?dú)特性及作用機(jī)制，本研究觀察了其對(duì)慢性非細(xì)菌性前列腺炎大鼠血清纖維連接蛋白(FN)、層粘連蛋白(LN)的影響。

1 材料與方法

1.1 動(dòng) 物

Wistar大鼠，雄性，60只，體質(zhì)量(200±20)g，由甘肅中醫(yī)學(xué)院科研實(shí)驗(yàn)中心提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK(甘)2011-0001。

1.2 藥品與試劑

前列康片，0.5g/片，浙江康恩貝制藥股份有限公司產(chǎn)品，批號(hào)140801，臨用時(shí)研末，并以蒸餾水制成0.054 g/mL溶液。消痔靈注射液，吉林省集安益盛藥業(yè)股份有限公司產(chǎn)品，批號(hào)Z22026175，臨用時(shí)以蒸餾水稀釋成體積分?jǐn)?shù)為250 mL/L的溶液。

FN、LN放免試劑盒，由南京森貝伽生物科技有限公司提供，批號(hào)依次為201412，201412。

1.3 模型的建立

適應(yīng)性喂養(yǎng)大鼠7 d后，參考張亞強(qiáng)[6]、雷久士等[7]的方法造模：稱量大鼠體質(zhì)量，用100 g/L 水合氯醛(3 μL/g)腹腔注射麻醉，剪去下腹部被毛，碘伏消毒，沿腹正中線切開(kāi)1.5cm左右創(chuàng)口，逐層打開(kāi)，暴露膀胱，用鑷子夾住前列腺的背側(cè)葉，分別注入體積分?jǐn)?shù)250 mL/L的消痔靈注射液0.2 mL(每單側(cè)葉注射0.1 mL)，并逐層關(guān)腹，建立慢性非細(xì)菌性前列腺炎大鼠模型。術(shù)后每只大鼠腹腔注射慶大霉素0.1 mL，以防感染。造模后所有大鼠精神狀態(tài)較差，靜臥少動(dòng)，食欲不振，但均自造模后第3天起逐步恢復(fù)，無(wú)死亡，傷口恢復(fù)良好，精神狀態(tài)正常，毛色潤(rùn)澤，食欲與二便無(wú)異常。

1.4 動(dòng)物分組與處理

將造模后的60只大鼠按體質(zhì)量編號(hào)，用隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分成模型對(duì)照組、前列康組、平補(bǔ)平瀉組和溫通針?lè)ńM4組，每組15只。

于造模后第9天各組分別進(jìn)行治療，1 d 1次，共治療15次。 前列康組：每次用前列康混懸液1 mL灌胃，每天1次。平補(bǔ)平瀉組：穴位取關(guān)元、曲骨、行間。以《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》[8]為依據(jù)，并依動(dòng)物比較方法學(xué)而定。關(guān)元：臍下約25 mm處。曲骨：恥骨聯(lián)合上緣的中點(diǎn)處。行間：后肢趾背第一、二趾縫間。穴位常規(guī)消毒，進(jìn)針得氣后行平補(bǔ)平瀉法，留針30 min，每15min行針1次，然后慢慢將針拔去，按壓針孔。溫通針?lè)ńM的取穴同平補(bǔ)平瀉組。穴位消毒后，進(jìn)針得氣即行溫通針?lè)╗9]：左手加重力量，右手拇指向前連續(xù)捻按9次，針下沉緊后，針尖拉著感應(yīng)的部位連續(xù)重插輕提9次，拇指再向前連續(xù)捻按9次，針尖頂著有感應(yīng)的部位推弩守氣，使針下繼續(xù)沉緊，此時(shí)醫(yī)者押手可明顯感覺(jué)到經(jīng)氣沖動(dòng)。每穴操作60 s，留針30 min，每15 min行針1次，然后慢慢將針拔去，按壓針孔。模型對(duì)照組：正常抓取、固定，但不予任何處理。

1.5 檢測(cè)指標(biāo)

末次治療后，禁食不禁水24 h，用100 g/L 水合氯醛(3 μL/g)腹腔注射麻醉，分離股動(dòng)脈取血5 mL，37 ℃水中放置30 min，以3 500 r/min離心15 min，取上清液放入尖底試管中，置4 ℃冰箱內(nèi)保存，待測(cè)。采用ELISA法測(cè)定血清FN、LN，操作嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié) 果

與模型對(duì)照組對(duì)比，3個(gè)治療組大鼠的FN、LN均降低，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。與前列康組對(duì)比，平補(bǔ)平瀉組、溫通針?lè)ńMFN、LN均降低，但僅溫通針?lè)ńM較之差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。溫通針?lè)ńMFN、LN與平補(bǔ)平瀉組對(duì)比，差別亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。提示：3種治療方法均可降低慢性非細(xì)菌性前列腺炎大鼠血清的FN、LN水平，改善微循環(huán)，減輕前列腺組織的纖維化，但以溫通針?lè)ㄐЧ顬轱@著，前列康和平補(bǔ)平瀉效果相當(dāng)。見(jiàn)表1。

表1 各組大鼠血清FN、LN含量對(duì)比

注：與模型對(duì)照組對(duì)比，*P<0.05，**P<0.01;與前列康組對(duì)比，##P<0.01;與平補(bǔ)平瀉組對(duì)比，△△P<0.01。

3 討 論

慢性非細(xì)菌性前列腺炎與中醫(yī)學(xué)的“精濁”“白濁”“白淫”“淋濁”等病證相類似。在其發(fā)病因素中，長(zhǎng)期處于寒濕之地致使寒濕外感，或嗜食醇酒厚味致濕濁內(nèi)阻，復(fù)受寒邪，寒濕相合，致使下焦及前列腺為寒濕所困，氣化受阻，精室濕濁不化，郁滯不暢，寒、濕、瘀相互搏結(jié)而形成敗精瘀阻，發(fā)為本病[5，10]。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證實(shí)，F(xiàn)N、LN均屬非膠原糖蛋白，為細(xì)胞外基質(zhì)的兩種重要成分。FN主要由間質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生，LN主要由上皮細(xì)胞產(chǎn)生，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，生物學(xué)作用多樣。FN和LN參與慢性前列腺炎病變?nèi)^(guò)程，在前列腺炎癥中起一定作用。其中FN主要參與慢性前列腺炎的急性、亞急性炎癥及間質(zhì)纖維化。LN參與整個(gè)炎癥過(guò)程并維持慢性期間質(zhì)纖維化。LN可通過(guò)促進(jìn)淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞釋放類似的生長(zhǎng)因子,使間質(zhì)纖維化持續(xù)發(fā)展，并使LN與抗原能很好結(jié)合。FN、LN既是慢性前列腺炎的結(jié)果，也是其發(fā)生發(fā)展的原因之一[11]。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：溫通針?lè)ㄝ^平補(bǔ)平瀉針?lè)ê颓傲锌的芨@著地降低大鼠血清FN和LN的水平。筆者認(rèn)為其作用機(jī)制主要有以下幾個(gè)方面：第一，本病發(fā)病因素中，寒、濕、瘀相互搏結(jié)而形成的敗精瘀阻最為關(guān)鍵，因而溫通經(jīng)脈、祛寒除濕、活血化瘀就成為本病的治療大法，故而運(yùn)用全國(guó)著名針灸專家鄭魁山教授的家傳針刺手法溫通針?lè)?。溫可溫通?jīng)脈，祛寒除濕；通可疏通經(jīng)絡(luò)，行氣和血，活血化瘀，從而全面、有效地針對(duì)了本病的病因、病機(jī)，降低CNBP大鼠FN和LN水平，緩解或解除了前列腺局部的炎性浸潤(rùn)與纖維化，較平補(bǔ)平瀉針?lè)ê颓傲锌弹熜Ъ押?。第二，溫通針?lè)ㄡ槾剃P(guān)元、曲骨等穴位，不僅改善了前列腺局部的微循環(huán)、達(dá)到活血化瘀的目的，還調(diào)節(jié)了支配前列腺的所有神經(jīng)，解除了會(huì)陰、少腹及腰骶部的墜脹、疼痛等不適，促使前列腺分泌功能康復(fù)[5]；針刺行間穴有抗炎和抗變態(tài)反應(yīng)、擴(kuò)張外周血管、改善微循環(huán)等作用[12]。

綜上所述，溫通針?lè)ㄖ委烠NBP的機(jī)制與降低FN、LN含量，調(diào)節(jié)機(jī)體微循環(huán)，降低前列腺的纖維化而達(dá)到溫通經(jīng)脈、祛寒除濕、活血化瘀的作用有關(guān)；且溫通針?lè)ǒ熜黠@優(yōu)于平補(bǔ)平瀉針?lè)ê颓傲锌怠Ｔ摲ǒ熜Т_切，效果獨(dú)特，值得推廣應(yīng)用。

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(編輯 陶 珠)

1001-6910(2015)09-0070-03

R697+.33

B

10.3969/j.issn.1001-6910.2015.09.34

趙耀東(1972-)，男(漢族)，甘肅蘭州人，碩士學(xué)位，副教授，研究方向：傳統(tǒng)針刺手法的臨床及實(shí)驗(yàn)研究。

甘肅省科技廳自然基金項(xiàng)目(1208RJZA248)

2015-04-18；

2015-07-07