張媛 戚磊 韓方偉 崔力兵 黃紹華 朱愛(ài)華

摘 ?要：為了解徐州地區(qū)雞群白血病的感染情況，從2013年3月到2013年12月在徐州部分地區(qū)的雞場(chǎng)隨機(jī)采樣500份，通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)gp27抗原陽(yáng)性率以及J亞型白血?。ˋLV-J）和AB亞型白血?。ˋLV-AB）的抗體陽(yáng)性率。調(diào)查顯示，徐州大多數(shù)雞場(chǎng)均存在白血病的感染，其中ALV-J為陽(yáng)性的雞場(chǎng)有8所，ALV-J最高陽(yáng)性率達(dá)28.6%，ALV-AB最高陽(yáng)性率為23.3%，ALV-AB感染的年齡段存在一定差異，感染率最高的年齡段是75周齡;肉雞ALV-J、ALV-AB感染率較高，蛋雞也存在ALV-J感染的情況，說(shuō)明ALV-J的宿主范圍正在擴(kuò)大。

關(guān)鍵詞：禽白血病;ELISA;血清;gp27

中圖分類(lèi)號(hào)：S858.31 ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B ? ? 文章編號(hào)：1673-1085（2015）03-0048-03

禽白血病（ Avian leucosis，AL） 是由禽白血病/肉瘤病毒群的病毒引起的禽類(lèi)（主要是雞）各種良性和惡性腫瘤的一群疾病[1]。白血病病毒（ALV）是反轉(zhuǎn)錄病毒，目前發(fā)現(xiàn)有10種亞群，其中A、B、C、D、E和J亞群常見(jiàn)于雞，A亞群、B亞群和J亞群是最為常見(jiàn)的外源性病毒，也是危害養(yǎng)雞業(yè)最大的三個(gè)亞群。

J亞群禽白血?。ˋL-J）是由J亞群禽白血病病毒（ALV-J）引起的以骨髓細(xì)胞瘤為特征的雞的種源性傳染病[2]，J亞群禽白病病毒是20世紀(jì)80年代末 Payne等[3]首先從肉用型雞中分離鑒定出來(lái)的禽白血病病毒新的亞群，也是發(fā)現(xiàn)最晚的亞群。AL可通過(guò)兩種方式傳播感染雞群，水平方式和垂直方式。雞群感染此病會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，一是產(chǎn)生腫瘤，導(dǎo)致雞的死亡;二是生產(chǎn)指標(biāo)下降，表現(xiàn)為產(chǎn)生非腫瘤綜合征[4]。如性成熟推遲、母雞產(chǎn)蛋率下降、蛋重下降、受精率下降和孵化率下降，由此嚴(yán)重影響?zhàn)B雞業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益。

本實(shí)驗(yàn)采用ELISA法檢測(cè)樣本，因?yàn)镋LISA法能高效檢測(cè)到蛋清中的ALSV抗原，具有敏感、簡(jiǎn)便、快捷、適用于大面積檢測(cè)的特點(diǎn)，在種群凈化中得到了廣泛的應(yīng)用。在對(duì)抗原的檢測(cè)中，我們檢測(cè)的是所有亞群病毒所共同擁有的核衣殼蛋白gp27。不論外源性病毒或內(nèi)源性的E亞群病毒都可以產(chǎn)生gp27，而且在一些雞的基因組中還可能含有能表達(dá)gp27的基因片段，也能產(chǎn)生gp27，從而干擾了檢測(cè)結(jié)果。但如果我們同時(shí)結(jié)合抗體檢測(cè)，則可確定該雞群確實(shí)發(fā)生或有過(guò)相應(yīng)的外源性禽白血病感染;另一方面，ELISA診斷試劑盒在我國(guó)還未實(shí)現(xiàn)商品化。隨著我國(guó)養(yǎng)禽業(yè)的發(fā)展以及科研、生產(chǎn)和檢疫的需要，建立高效、實(shí)用的禽白血病檢測(cè)方法，研究和控制禽白血病將是今后的重要任務(wù)。

因此，無(wú)論從經(jīng)濟(jì)角度考慮，還是從人的健康出發(fā)，研究和控制禽白血病都是至關(guān)重要的。

1 ?材料與方法

1.1 ?樣本來(lái)源 ?由徐州疾病預(yù)防控制中心的工作人員在徐州各養(yǎng)殖場(chǎng)采集的樣本。采集了徐州賈汪區(qū)、銅山縣、云龍區(qū)、泉山區(qū)、鼓樓區(qū)、睢寧縣、邳州市、新沂市、開(kāi)發(fā)區(qū)、遠(yuǎn)大雞場(chǎng)的10個(gè)品種（ 系）、1～75周齡的雞群共采集血液樣本500 份，分離后取血清，置于-20℃冰柜中保存，記錄其來(lái)源、品種（系）、周齡、發(fā)病等情況。

1.2 ?檢測(cè)方法 ?采用ELISA對(duì)采集的血清樣本先進(jìn)行g(shù)p27抗原檢測(cè)，將檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性的血清樣品再進(jìn)行ALV-J檢測(cè)，試劑盒由美國(guó)IDEXX公司生產(chǎn)，ALV-J、ALV-AB批號(hào)分別為09268-AG448、09257-EG278，具體操作方法嚴(yán)格按照檢測(cè)試劑盒的說(shuō)明書(shū)執(zhí)行。

2 ?結(jié)果

2.1 ?不同周齡雞群ALV-AB的感染情況 ?經(jīng)過(guò)調(diào)查我們知道遠(yuǎn)大雞場(chǎng)提供的100份樣品是肉種雞的血清，由表1可知，17周齡以下的30份血清中，AB亞型陽(yáng)性數(shù)2份，陽(yáng)性率為6.7%;18～47 周齡的40份血清中，AB亞型陽(yáng)性數(shù) 5份，陽(yáng)性率為12.5%;在75 周齡的30份血清中，AB亞型陽(yáng)性數(shù)7份，陽(yáng)性率為23.3%。不同周齡的雞群感染情況存在著較大的差異。

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2.2 ?不同縣區(qū)感染gp27檢測(cè)結(jié)果的比較 ?共檢測(cè)徐州鼓樓區(qū)、賈汪區(qū)、銅山縣、邳州市、泉山區(qū)、云龍區(qū)、睢寧縣、新沂市、開(kāi)發(fā)區(qū)，9個(gè)地區(qū)400份血清樣本。由表2可知，每個(gè)雞場(chǎng)都感染過(guò)gp27抗原，雞場(chǎng)感染最高陽(yáng)性率達(dá)38.3%，雞場(chǎng)感染最低陽(yáng)性率達(dá)15.6%，從表格數(shù)據(jù)也可以看出規(guī)?；B(yǎng)殖的地區(qū)的禽白血病陽(yáng)性率普遍偏高，因此我們認(rèn)為養(yǎng)殖規(guī)模也是影響禽白血病感染的重要因素。

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2.3 ?不同縣區(qū)感染ALV-J檢測(cè)結(jié)果的比較 ?通過(guò)檢測(cè)將gp27呈陽(yáng)性的血清挑選出來(lái)并標(biāo)記，再用gp85試劑盒檢測(cè)，若結(jié)果呈陽(yáng)性，則為ALV-J亞型，由表3可知，在徐州部分地區(qū)ALV-J陽(yáng)性率最高的地區(qū)是開(kāi)發(fā)區(qū)達(dá)到了23.8%，泉山區(qū)的為0，說(shuō)明禽白血病的感染情況有地區(qū)差異。

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3 ?討論

從檢測(cè)結(jié)果可以看出徐州地區(qū)普遍存在禽白血病的感染，但感染的情況并不一致。同一種雞在不同周齡的情況下比較其感染程度，從結(jié)果看出，不同周齡都出現(xiàn)了感染情況，有關(guān)資料表明自然病例可于14周齡后的任何時(shí)間發(fā)病， 但通常以性成熟時(shí)的發(fā)病率最高[5]。

比較不同品種雞的 ALV-J感染情況，由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知這與國(guó)內(nèi)近期研究結(jié)果相一致，即 ALV-J主要發(fā)生于肉用型雞[6-10]。但是此次調(diào)查也表明，徐州市的一些蛋雞已經(jīng)發(fā)生了ALV-J的感染，說(shuō)明 ALV-J的宿主范圍正在擴(kuò)大[11]。

此次調(diào)查的雞為祖代雞，是優(yōu)質(zhì)遺傳資源。盡管部分雞感染ALV-J后在臨床上未出現(xiàn)病狀，肉眼能觀察到的典型病變也很少，但對(duì)生產(chǎn)性能有十分顯著的影響，已逐漸成為制約地方品種雞產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展的瓶頸問(wèn)題之一。因此，有必要盡快采取凈化等綜合防控措施來(lái)控制其發(fā)展，為做好徐州地方品種雞的保種和選育工作奠定基礎(chǔ)。

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