宋振宇 (河南省濟(jì)源市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所 河南濟(jì)源459000) 王瑞儉 (河南省溫縣動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所 河南溫縣454850)

溫書超 (河南省濟(jì)源市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所 河南濟(jì)源459000)

雞大腸桿菌病是由致病性大腸桿菌所引起的局部或全身性感染的疾病，主要引起雞只嚴(yán)重腹瀉、蜂窩組織炎、腫頭綜合征、腹膜炎、輸卵管炎、滑膜炎和敗血癥等。近年來，隨著養(yǎng)雞業(yè)的發(fā)展，以及臨床上用藥的不合理，使大腸桿菌的耐藥譜越來越寬，耐藥菌株不斷出現(xiàn)，雞大腸桿菌病已成為危害養(yǎng)雞業(yè)的主要傳染病之一，給養(yǎng)禽業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。雞新城疫又稱亞洲雞瘟，它是一種急性烈性傳染病，常呈區(qū)域性大范圍流行，傳播迅速，損失重大，嚴(yán)重威脅著養(yǎng)雞業(yè)的發(fā)展。近年來由于各雞場都十分重視該病的免疫接種，因此，典型的新城疫已基本被控制，然而在一些雞場中卻出現(xiàn)了非典型的新城疫，往往導(dǎo)致本病的誤診。大腸桿菌易與新城疫病毒混合感染，給養(yǎng)殖戶造成巨大的損失。某發(fā)病雞場2014 年5 月發(fā)生了以呼吸困難、腹瀉和產(chǎn)蛋減少為主要特征的疾病，根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查、臨床癥狀觀察及病理剖檢變化，采用細(xì)菌分離、生化試驗(yàn)、血凝試驗(yàn)（H A）和血凝抑制試驗(yàn)（H I）進(jìn)行診斷，確診為大腸桿菌與新城疫病毒混合感染。并對大腸桿菌菌株做藥敏試驗(yàn)，通過緊急免疫接種和使用敏感性藥物對發(fā)病雞群進(jìn)行治療，病情較快得到了控制。現(xiàn)就某雞場大腸桿菌和新城疫病毒混合感染的診治情況報(bào)道如下。

1 發(fā)病情況

2014 年5 月河南省濟(jì)源市某養(yǎng)殖戶飼養(yǎng)的4 000 只200 日齡海蘭褐蛋雞，出現(xiàn)呼吸困難、拉黃綠色稀糞和產(chǎn)蛋率急劇下降為主要癥狀的疾病，禽主使用泰樂菌素及丁胺卡那霉素等治療，呼吸道癥狀有所減輕，產(chǎn)蛋率也輕微回升。但雞群5 天后再次復(fù)發(fā)，產(chǎn)蛋率下降到40% ，隨來就診。經(jīng)詢問得知，禽主在養(yǎng)殖過程中曾使用過新城疫、傳染性法氏囊病等疫苗，并在產(chǎn)蛋前注射過新支減和禽流感H 5 疫苗。

2 臨床癥狀

發(fā)病雞精神沉郁，羽毛松亂，無光澤，垂頭縮頸，翅膀下垂，眼半閉或全閉，似昏睡狀態(tài)。病雞張口伸頸，氣喘，呼吸困難，常有“呼?！甭曧懀人?；下痢，排黃白色或黃綠色稀糞。雞群的產(chǎn)蛋量急劇下降，軟殼蛋明顯增多。有的病雞出現(xiàn)神經(jīng)癥狀，頭頸向后仰翻或向下扭轉(zhuǎn)。

3 病理剖檢

病雞被毛良好，體況消瘦，倒提病雞口腔流出酸臭混濁液體，泄殖腔周圍羽毛被糞便污染。剖檢主要病變發(fā)生在生殖道、呼吸道和消化道。卵子變型、充血、出血和壞死，破裂的卵黃流入腹腔引起卵黃性腹膜炎；輸卵管內(nèi)積有多量蛋清樣物質(zhì)，觸之有波動(dòng)感。喉頭、氣管充血和出血，其內(nèi)有多量黏液，有的已呈干酪樣物，個(gè)別雞氣囊壁增厚，表面有纖維素性滲出物被覆。腺胃乳頭腫脹，十二指腸出血，卵黃蒂后2～3㎝處回腸淋巴濾泡腫脹隆起出血、潰瘍，盲腸扁桃體腫大、出血，直腸和泄殖腔黏膜呈條刷狀出血。部分病雞肝變性、壞死，表面有纖維素性滲出物被覆。

4 實(shí)驗(yàn)室檢查

4.1 細(xì)菌檢查

4.1.1 直接鏡檢將病死雞肝、脾等組織抹片、固定，革蘭氏染色后鏡檢，均可見兩端鈍圓、多數(shù)散在排列、偶爾有2～3 個(gè)連在一起的紅色革蘭氏陰性短桿菌。

4.1.2 細(xì)菌分離培養(yǎng)

無菌采集病、死雞的肝臟、心和脾等組織，接種于普通肉湯，37℃培養(yǎng)24h，劃線接種于麥康凱瓊脂平板和伊紅美藍(lán)瓊脂平板，于37℃培養(yǎng)24h，觀察結(jié)果。細(xì)菌在麥康凱瓊脂上長出紅色的菌落和在伊紅美藍(lán)瓊脂上長出黑色帶金屬光澤的菌落。挑取可疑菌落涂片，鏡檢，可見兩端鈍圓的革蘭氏陰性短桿菌。

4.1.3 生化試驗(yàn)結(jié)果

取純培養(yǎng)物直接接種做糖酵解、M R（甲基紅）、V-P（伏- 普）、靛基質(zhì)、枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)和尿素酶試驗(yàn)，均按常規(guī)方法操作，觀察結(jié)果。此菌均能發(fā)酵葡萄糖、乳糖、麥芽糖、果糖和甘露糖，產(chǎn)酸產(chǎn)氣，M R 試驗(yàn)陽性，V-P 試驗(yàn)陰性，產(chǎn)生靛基質(zhì)，枸櫞酸鹽試驗(yàn)陰性，尿素酶試驗(yàn)陰性，此結(jié)果符合大腸桿菌的特性。

4.1.4 藥敏試驗(yàn)

吸取1m L 純培養(yǎng)物在瓊脂平板上涂勻，將多余的液體倒出，待稍干燥后貼上藥敏片。置37℃，培養(yǎng)24h，測量抑菌圈大小。

由表1 可以看出，分離的大腸桿菌對環(huán)丙沙星、泰樂菌素、恩諾沙星和新霉素敏感，而對青霉素、丁胺卡那霉素和克林霉素耐藥。

4.2 病毒鑒定

4.2.1 病料處理

將病死雞的腦、肺臟、脾臟和氣管等組織沖洗后，剪碎、研磨，配成1：5 生理鹽水懸液；－20℃凍融3 次后，3 000r/m in 離心10m in，取上清，加入青霉素（使終濃度為1 000IU/m L）、鏈霉素（使終濃度為1m g/m L）。然后調(diào)節(jié)pH 7.0～7.4，置37℃作用1h，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

4.2.2 雞胚接種

無菌吸取組織培養(yǎng)液0.1m L 經(jīng)尿囊液接種9 日齡健康雞胚，雞胚均在40～50h 內(nèi)先后死亡。死亡雞胚發(fā)育不良，胚體廣泛出血。收集死亡雞胚。

4.2.3 H A 檢測結(jié)果

雞胚尿囊液能凝集雞的紅細(xì)胞，血凝價(jià)可達(dá)8log2。

4.2.4 H I檢測結(jié)果

雞胚尿囊液凝集紅細(xì)胞的作用能被新城疫陽性血清所抑制，由此診斷是新城疫病毒感染。

5 治療

隔離病雞，對假定健康雞用新城疫油乳劑滅活疫苗和IV 緊急免疫接種，并用環(huán)丙沙星、轉(zhuǎn)移因子、清瘟敗毒散和多維對發(fā)病雞群進(jìn)行輔助治療，同時(shí)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，搞好環(huán)境衛(wèi)生，進(jìn)行全面消毒，病情很快得到了控制。

表1 藥敏試驗(yàn)結(jié)果

6 小結(jié)與討論

（1）通過流行病學(xué)調(diào)查、臨床癥狀、病理變化和實(shí)驗(yàn)室診斷，可以判定本次發(fā)病是由大腸桿菌和新城疫病毒混合感染導(dǎo)致。

（2）大腸桿菌為一種條件致病菌，應(yīng)激因素、不良的衛(wèi)生條件等因素都可以導(dǎo)致雞群發(fā)病。該養(yǎng)殖戶對新城疫進(jìn)行正常的免疫接種，但又發(fā)生了新城疫，究其原因可能是該雞場飼養(yǎng)密度偏大，地面潮濕，導(dǎo)致雞大腸桿菌感染，從而導(dǎo)致雞群對新城疫的敏感性增高所致。

（3）大腸桿菌容易產(chǎn)生抗藥性，長期用藥或不正規(guī)的用藥都易導(dǎo)致其對藥物的耐受性。本次分離的大腸桿菌其藥敏譜就發(fā)生了一定的變化，特別是對丁胺卡那霉素的敏感性。標(biāo)準(zhǔn)菌株對丁胺卡那霉素較敏感，而本分離菌對丁胺卡那霉素的敏感性大大降低，產(chǎn)生了耐藥。這可能與近2 年該養(yǎng)殖戶頻繁使用該抗生素有關(guān)。廣譜抗生素對大腸桿菌病理論上來說都有抑菌或殺菌作用，但由于人們長期廣泛應(yīng)用抗生素和濫用抗生素會(huì)造成耐藥菌株迅速增加。因此，一旦發(fā)生大腸桿菌病，應(yīng)首先進(jìn)行藥敏實(shí)驗(yàn)，然后根據(jù)藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果擬定治療方案，以免貽誤治療時(shí)機(jī)造成不應(yīng)有的損失。

（4）當(dāng)雞群發(fā)病時(shí)養(yǎng)殖戶應(yīng)在對癥用藥的同時(shí)及時(shí)就診，搞清病情，根據(jù)病情針對性治療，這樣才能把損失降到最低。本次感染是病毒和細(xì)菌的混合感染，對于病毒病疫苗接種應(yīng)是控制其發(fā)生的首選方法。感染后除采取緊急預(yù)防接種外還可同步使用抗生素治療；平時(shí)應(yīng)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，做好各個(gè)環(huán)節(jié)的衛(wèi)生消毒，消除各種發(fā)病誘因，這樣才有可能減少疾病的發(fā)生。