費(fèi) 強(qiáng)(山西省汾陽(yáng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 山西汾陽(yáng)032200)

腹膜炎即腹膜發(fā)生的炎癥，雞腹膜炎不是一種獨(dú)立的疾病，發(fā)病一般由病原體直接侵害或由其他組織器官炎癥波及引起，常發(fā)生于禽流感、新城疫、傳染性支氣管炎、大腸桿菌病、雞白痢或這幾種疾病混合感染過(guò)程中。主要表現(xiàn)腹膜紅腫，有漿液性和黏液性滲出，滲出液增多有氣泡或泡沫，腹膜與腸道和其他器官組織粘連等變化。臨床上最普遍的產(chǎn)蛋雞卵黃性腹膜炎是腹膜炎的一種形式，在腹膜炎的基礎(chǔ)上出現(xiàn)卵黃物質(zhì)的增多，有蛋黃樣物質(zhì)沉積等。近年來(lái)，隨著我國(guó)養(yǎng)雞業(yè)的迅猛發(fā)展，雞腹膜炎的流行呈上升趨勢(shì)，不僅造成死淘率的增加，而且嚴(yán)重影響產(chǎn)蛋率的上升，給養(yǎng)雞業(yè)帶來(lái)了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。筆者將常見(jiàn)的幾種引起雞腹膜炎疾病的鑒別診斷介紹如下，以期為廣大養(yǎng)雞戶(hù)和獸醫(yī)工作者提供幫助。

1 病因及流行病學(xué)

1.1 禽流感

禽流感是由正黏病毒科A 型流感病毒引起的一種全身性或呼吸器官的急性傳染病。該病一年四季均可流行，但禽流感病毒在低溫下抵抗力較強(qiáng)，故冬季和春季容易流行。各種品種和不同日齡的雞都易感，且發(fā)病急、傳播快。主要依靠水平傳播，如空氣、糞便、飼料和飲水等。

1.2 新城疫

新城疫是由副黏病毒科的新城疫病毒引起的一種急性、高度接觸性及敗血性傳染病。病毒存在于病雞所有的組織器官、體液、分泌物和排泄物中。由于免疫程序不當(dāng)或免疫抑制性疾病的存在，常引起免疫雞群發(fā)生非典型癥狀和病變，其死亡率和病死率較低。各日齡的易感雞均可感染發(fā)病，但高發(fā)期在30～50 日齡之間。一年四季均可發(fā)生，但冬春季較多。

1.3 傳染性支氣管炎

傳染性支氣管炎是雞傳染性支氣管炎病毒引起的雞的一種高度接觸性呼吸道疾病。病毒主要經(jīng)飛沫和塵埃傳給易感雞，也可通過(guò)污染的飼料、飲水等經(jīng)消化道感染。病雞和帶毒雞是傳染源，病雞康復(fù)后可帶毒49 天，35 天內(nèi)具有傳染性。

1.4 大腸桿菌病

大腸桿菌病是指部分或全部由大腸桿菌所引起的局部或全身感染的疾病，主要通過(guò)呼吸道、消化道感染，也可通過(guò)污染的蛋殼侵入卵黃囊而引起雞胚感染死亡。由于大腸桿菌是條件性致病菌，且對(duì)藥物易產(chǎn)生耐藥性，所以當(dāng)飼養(yǎng)密度大、雞舍通風(fēng)不良、環(huán)境衛(wèi)生差、飼料質(zhì)量不佳或氣候驟然變化時(shí)均易誘發(fā)該病，而且不易控制。

1.5 雞白痢

雞白痢是由雞白痢沙門(mén)氏菌引起的傳染病，傳染源主要是病雞和帶菌雞，可通過(guò)種蛋垂直傳播。3 周齡以下的雛雞常為急性敗血癥，出殼后2 周內(nèi)死亡最多，耐過(guò)的病雞多發(fā)育不良，成為帶菌者；成年雞的病例主要為局部感染、隱性感染。

2 臨床癥狀

2.1 禽流感

臨床癥狀與感染的禽流感病毒的毒力、品種及日齡、有無(wú)并發(fā)或繼發(fā)感染、應(yīng)激、飼養(yǎng)管理水平和營(yíng)養(yǎng)狀況等有關(guān)。急性病例潛伏期短，多為突然發(fā)病，飼料和飲水量急劇下降，發(fā)病率、病死率高。慢性病例體溫升高達(dá)到43 ℃，采食減退或不食，出現(xiàn)明顯的呼吸道癥狀，咳嗽、羅音、打噴嚏、伸頸張口和鼻竇腫脹；頭部及眼瞼水腫；有的出現(xiàn)綠色下痢；蛋雞產(chǎn)蛋急速下降，甚至停產(chǎn)，蛋殼變薄，破蛋、砂皮蛋、軟蛋和小蛋增多。

2.2 新城疫

病雞張口伸脖，發(fā)出喘鳴聲，有搖頭和吞咽動(dòng)作，病程稍長(zhǎng)出現(xiàn)歪頭、扭頸、角弓反張、轉(zhuǎn)圈、翅和腿麻痹。排黃色、綠色糞便。

2.3 傳染性支氣管炎

雛雞發(fā)病后特征是咳嗽、噴嚏和氣管啰音，病雞羽毛松亂、怕冷、精神沉郁和迅速消瘦，厭食、飲水量增加、排白色稀糞或白色淀粉樣糊狀糞便。成年雞主要表現(xiàn)輕微的呼吸道癥狀和產(chǎn)蛋下降，產(chǎn)軟蛋、畸形蛋或粗殼蛋，蛋清如水樣，沒(méi)有正常雞蛋那種濃蛋白和稀蛋白之間的明確分界線，蛋白和蛋黃分離以及蛋白粘著于蛋殼膜上。

2.4 大腸桿菌病

大腸桿菌病表現(xiàn)輕重不一的呼吸道癥狀、腸炎。急性敗血癥表現(xiàn)突然死亡，體溫升高，飲水增多，采食銳減，腹瀉、排綠白色糞便。亞急性和慢性病情溫和，病程長(zhǎng)，精神不振，食欲減少，下痢和消瘦。

2.5 雞白痢桿菌病

病雛雞怕冷，成堆擁擠在一起，個(gè)別雞離開(kāi)雞群閉目打盹，多數(shù)呼吸困難，呈腹式呼吸；部分病雛排白色糊狀稀糞，粘在肛門(mén)羽毛周?chē)?，造成糊肛，有的雛雞尖叫，邊叫邊退；成年雞產(chǎn)蛋下降、減食、下痢、腹下垂及產(chǎn)蛋停止。

3 病理剖檢

3.1 禽流感

剖檢時(shí)可見(jiàn)胸部或腿部肌肉有散在的小出血點(diǎn)。腺胃乳頭出血，腺胃和肌胃的交界處黏膜出血。消化道黏膜廣泛出血，尤其是十二指腸黏膜和盲腸扁桃體出血更為明顯。呼吸道黏膜充血、出血。心冠脂肪、心肌出血。肝臟、脾臟、肺臟和胰腺出血，胰腺表面有少量白色或淡黃色壞死點(diǎn)。蛋雞卵泡充血、出血和萎縮，輸卵管內(nèi)可見(jiàn)乳白色分泌物或凝塊，有的見(jiàn)卵泡破裂引起的卵黃性腹膜炎。

3.2 新城疫

喉頭與器官黏膜充血、出血和黏液增多。腺胃乳頭或乳頭間點(diǎn)狀出血，有時(shí)形成小的潰瘍斑或腺胃黏膜彌漫性出血。肌胃角質(zhì)層下黏膜有潰瘍及點(diǎn)狀、斑狀出血。腸道黏膜點(diǎn)狀出血，在卵黃蒂下方2～3cm處及盲腸所夾的回腸上端約2～3cm 處出現(xiàn)棗核樣隆起或潰瘍，直腸及泄殖腔黏膜點(diǎn)狀或片狀出血。卵泡嚴(yán)重充血、出血，輸卵管變薄、松弛、柔軟及后段粗糙，發(fā)炎紅腫。輸卵管內(nèi)存有干酪樣柿子餅狀軟殼蛋，有的因卵黃掉入腹腔而引起卵黃性腹膜炎。

3.3 傳染性支氣管炎

氣管、鼻道和竇中有漿液性、卡他性和干酪樣滲出物；腎腫大、蒼白，腎小管和輸卵管充滿尿酸鹽結(jié)晶，并充盈擴(kuò)張，呈花斑狀，泄殖腔內(nèi)有大量石灰樣尿酸鹽沉積。產(chǎn)蛋雞卵泡充血、出血及變形，腹腔內(nèi)帶有大量卵黃漿。輸卵管上皮受冠狀病毒侵害可導(dǎo)致分泌細(xì)胞減少和局灶性組織阻塞、破裂，形成繼發(fā)性卵黃性腹膜炎。得了傳染性支氣管炎的雛雞，輸卵管永久性損傷；開(kāi)產(chǎn)前20 天左右的雞(這個(gè)階段是輸卵管的快速發(fā)育時(shí)期，從十幾厘米發(fā)育到60～80cm)，會(huì)造成輸卵管發(fā)育受阻，狹小、閉塞、部分缺損和囊泡化，到性成熟時(shí)，長(zhǎng)度和重量不及正常成熟的1/3～1/2，進(jìn)而影響以后排卵、產(chǎn)蛋。

3.4 大腸桿菌病

3.4.1 纖維素性心包炎

心包蓄積多量淡黃色黏液(纖維滲出物)，囊壁增厚、粗糙，心臟擴(kuò)張，表面有灰白色霉斑樣覆蓋物。

3.4.2 纖維素性肝周炎肝臟瘀血腫大，呈暗紫色，表面覆蓋1 層灰白色、灰黃色的纖維素膜。

3.4.3 纖維素性腹膜炎

腹腔中有大量淡黃色清亮腹水或膠凍樣物，有時(shí)腹膜及內(nèi)臟表面附有多量黃白色滲出物，致使器官粘連。

3.4.4 卵黃性腹膜炎

腹腔內(nèi)有大量卵黃凝固，有惡臭味；廣泛性腹膜炎，卵泡充血，卵泡變性萎縮，局部或整個(gè)卵泡紅褐色或黑褐色，輸卵管有大量分泌物，有的有黃色絮狀物或塊狀干酪樣物。

3.5 雞白痢

雛雞多為敗血型，所有臟器常有充血或出血，肺臟病變最為常見(jiàn)。成年雞最為常見(jiàn)的病變部位在生殖器官。卵泡形狀不規(guī)則，顏色墨綠，卵膜變厚，呈囊狀，內(nèi)含油脂或豆渣樣物質(zhì)。變異的卵泡仍然附在卵巢上，有的脫落于腹腔內(nèi)并為脂肪組織所包圍。有些卵泡在輸卵管內(nèi)倒行而墜入腹腔，有些卵泡則阻塞輸卵管，引起廣泛的腹膜炎及腸管、臟器等粘連。

4 實(shí)驗(yàn)室診斷

4.1 禽流感與新城疫

4.1.1 血凝試驗(yàn)(HA)與血凝抑制試驗(yàn)(HI)

禽流感病毒、新城疫病毒能選擇性地使某種或某幾種動(dòng)物的紅細(xì)胞發(fā)生凝集，此即為血凝試驗(yàn)的原理。其方法是用雞紅細(xì)胞與禽流感或新城疫標(biāo)準(zhǔn)抗原(倍比稀釋)作用，檢測(cè)出標(biāo)準(zhǔn)抗原血凝單位，為血凝抑制試驗(yàn)作準(zhǔn)備。而紅細(xì)胞凝集抑制現(xiàn)象可于禽流感或新城疫病毒懸液中加入特異性免疫血清所抑制，即為血凝抑制試驗(yàn)。方法是將檢測(cè)出血凝單位的禽流感或新城疫標(biāo)準(zhǔn)抗原4 倍(4HAU)配制后與受檢血清(倍比稀釋)反應(yīng)，再加入紅細(xì)胞作用。血凝抑制試驗(yàn)用于檢測(cè)受檢血清禽流感或新城疫抗體血凝抑制滴度，判定受檢血清抗體是否為陽(yáng)性。

4.1.2 間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)

樣本稀釋?zhuān)簩⒈粰z血清用稀釋液做1∶100 稀釋。加樣：陰性血清和陽(yáng)性血清做對(duì)照各占1 孔外，其余孔加1∶100 稀釋的被檢血清，每孔100μL，將加樣位置做好記錄，反應(yīng)板蓋上膜，置37℃環(huán)境下作用30 分鐘后洗滌3 次。加酶標(biāo)抗體：每孔加酶標(biāo)抗體液100μL，反應(yīng)板蓋上膜，置37℃環(huán)境下作用30 分鐘后洗滌3 次。加底物：加底物液，每孔100μL，置室溫避光顯色2～3 分鐘。終止：加終止液，每孔100μL，使其終止反應(yīng)，測(cè)定吸光度(OD)值。按照說(shuō)明書(shū)要求對(duì)結(jié)果判定。

4.2 傳染性支氣管炎

4.2.1 免疫熒光抗體技術(shù)

該法可用于檢測(cè)傳染性支氣管炎抗原和抗體。檢測(cè)抗體時(shí)，將病料滴在載玻片上，固定后滴加傳染性支氣管炎抗體，37℃環(huán)境下作用1 小時(shí)，沖洗20分鐘，加熒光素標(biāo)記的二抗，室溫作用1 小時(shí)，沖洗20 分鐘，鏡檢，陽(yáng)性病例出現(xiàn)熒光。

4.2.2 ELISA

將提純的抗原包被反應(yīng)板，在4℃下作用16 小時(shí)后沖洗，加入待檢血清，37℃孵育40 分鐘后洗滌，加入酶標(biāo)抗體，孵育3 小時(shí)后洗滌，加入底物，反應(yīng)顯色，測(cè)定其吸光度值。

4.3 大腸桿菌病

4.3.1 直接染色檢鏡

采取新鮮肝、脾、心或血液涂片，革蘭氏染色鏡檢，顯微鏡下見(jiàn)到兩端鈍圓、中等大小、無(wú)芽孢及莢膜、能運(yùn)動(dòng)、有鞭毛的革蘭氏陰性桿菌，可初步斷定。

4.3.2 細(xì)菌分離培養(yǎng)

無(wú)菌取病變組織，分別接種肉湯培養(yǎng)基、麥康凱培養(yǎng)基，置37℃恒溫箱中培養(yǎng)24 小時(shí)。肉湯混濁，管底有淡黃色的黏性沉淀，液面管壁有菌環(huán)；麥康凱培養(yǎng)基上形成粉紅色菌落。

4.3.3 動(dòng)物回歸試驗(yàn)

將分離純化的菌株培養(yǎng)出來(lái)的菌落用生理鹽水稀釋后，以0.2mL/只腹腔注射小白鼠3 只，同時(shí)用3只注射生理鹽水做空白對(duì)照，觀察發(fā)病情況，經(jīng)攻毒的3 只小白鼠在接種36 小時(shí)內(nèi)全部死亡；3 只對(duì)照小白鼠飼喂7 天后仍能存活。無(wú)菌操作取攻毒死亡小白鼠的肝、脾，進(jìn)行病料涂片、染色鏡檢和細(xì)菌分離后可見(jiàn)到典型的大腸桿菌菌落特征。

4.4 雞白痢桿菌病

4.4.1 直接染色檢鏡

取病死雞的心臟、肝臟和脾臟，涂片、革蘭氏染色及鏡檢，可發(fā)現(xiàn)兩端鈍圓，呈直桿狀的短小桿菌，散在或成對(duì)存在，革蘭氏染色呈紅色。

4.4.2 細(xì)菌培養(yǎng)

無(wú)菌操作取病死雞的心臟、肝臟、脾臟、膽汁和血液接種到普通瓊脂、麥康凱瓊脂、SS 瓊脂和HE瓊脂，37℃培養(yǎng)18～24 小時(shí)，觀察結(jié)果。在普通瓊脂上，形成小而透明的菌落；在麥康凱瓊脂上，形成圓形、邊緣整齊、表面光滑的無(wú)色菌落；在SS 瓊脂上，菌落有粟狀大小，呈黑色；在HE 瓊脂上，形成黑色菌落。

4.4.3 細(xì)菌培養(yǎng)

將上述單個(gè)菌落在肉湯培養(yǎng)基中進(jìn)行純培養(yǎng)后加入血清、硫代硫酸鈉、胱氨酸、葡萄糖和甘油，促進(jìn)細(xì)菌生長(zhǎng)，37℃恒溫培養(yǎng)24 小時(shí)。

4.4.4 生化試驗(yàn)

將所分離的純培養(yǎng)物，分別接種各種生化培養(yǎng)基，放置于37℃的恒溫箱中，反應(yīng)24 小時(shí)，記錄觀察結(jié)果，見(jiàn)表1。

4.4.5 全血或血清平板凝集試驗(yàn)

用移液槍各取全血(或血清)和診斷抗原50μL 在玻璃板上混勻，并涂抹成直徑2cm 左右的薄膜，室溫下2～3 分鐘內(nèi)判定，同時(shí)設(shè)立陽(yáng)性、陰性和抗原對(duì)照。凝集反應(yīng)判定標(biāo)準(zhǔn)如下：100%凝集(++++)：出現(xiàn)大片凝集，液體完全透明；75%(+++)凝集：有明顯凝集片和顆粒，液體幾乎完全透明；50%(++)凝集：有可見(jiàn)的凝集片和顆粒，液體不甚透明；25%(+)凝集：僅僅可以看見(jiàn)顆粒，液體混濁；無(wú)凝集(-)：液體均勻混濁。被檢全血(或血清)與抗原出現(xiàn)50%以上凝集為陽(yáng)性，不發(fā)生凝集則為陰性。

表1 分離細(xì)菌的生化試驗(yàn)結(jié)果

5 小結(jié)

綜上所述，通過(guò)流行病學(xué)、臨床癥狀、病理剖檢和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)等，能判斷是哪一種或幾種病原引起的腹膜炎，并積極采取有效的治療手段。在實(shí)際生產(chǎn)中，只有嚴(yán)格實(shí)行引種監(jiān)測(cè)制度，加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，將消毒工作落實(shí)到位，做好病毒性疾病的免疫接種，才能最大程度防止雞腹膜炎的發(fā)生。