李波1,#朱 俊 揚(yáng)2,#王 保健2郝 桂 英3古小 彬2,*1

(1四川 省綿 陽 市動(dòng) 物疫 病 預(yù)防 控制 中 心 四川 綿 陽621000； 2四 川 農(nóng)業(yè) 大學(xué) 成都611130； 3西 昌學(xué) 院 四 川西 昌625013)

雞異刺線蟲病是由異刺科（Heterakidae）異刺屬（Heterakis）的雞異刺線蟲（H.gallinarum）寄生于雞、火雞、珍珠雞等多數(shù)家禽及紅腹錦雞、孔雀、環(huán)頸雉等野生鳥禽類盲腸內(nèi)常見的一種腸道線蟲病[1-3]。禽類感染雞異刺線蟲后，常引起結(jié)節(jié)性盲腸炎，出現(xiàn)腹瀉、消瘦、貧血和產(chǎn)蛋率下降等癥狀，嚴(yán)重者常常衰竭死亡[4,31]。同時(shí)，雞異刺線蟲在養(yǎng)殖業(yè)上的重要意義在于作為火雞組織滴蟲（Histomonas meleagridis）的傳播者，引起火雞組織滴蟲病（histomoniasis），對(duì)養(yǎng)禽業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失

雞異刺線蟲呈世界性分布，國外已有多個(gè)國家對(duì)禽類雞異刺線蟲的感染情況進(jìn)行了報(bào)道，感染率介于7.50%～96.00%[8-23]。我國多個(gè)地區(qū)也有對(duì)雞異刺線蟲感染情況的報(bào)道，各地感染率為20.30%～76.60%[7,24-29]。但至今為止，四川地區(qū)雞異刺線蟲的感染情況還沒見報(bào)道。因此，為了解四川地區(qū)雞異刺線蟲的感染情況，本研究對(duì)四川雅安、西昌、綿陽、達(dá)州、成都、廣元和自貢7 個(gè)地區(qū)散養(yǎng)肉雞的雞異刺線蟲感染情況進(jìn)行調(diào)查，為該病的流行特征及有效預(yù)防提供參考材料。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 樣品采集

本次調(diào)查隨機(jī)采集了四川雅安、西昌、綿陽、達(dá)州、成都、廣元和自貢7 個(gè)地區(qū)本地散養(yǎng)的236 只肉雞盲腸（每只散養(yǎng)肉雞的兩條盲腸為1 組），其中雅安43 組，西昌30 組，綿陽33 組，達(dá)州35 組，成都30 組，廣元29 組，自貢36 組（圖1）。將采集好的盲腸進(jìn)行編號(hào)記錄，低溫保存帶回實(shí)驗(yàn)室待檢。

圖1 四川7個(gè)地區(qū)樣品采集分布

1.1.2 主要試劑

乳酸酚透明液，生理鹽水，清水。

1.1.3 主要儀器設(shè)備

生物顯微鏡CH20（日本OLYMPUS 公司）、載玻片、蓋玻片、培養(yǎng)皿、放大鏡、鑷子、解剖針、黑色圓盤、塑料盆、手術(shù)剪刀、冰袋、泡沫箱。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 蟲體收集

根據(jù)秦建華和李國清的方法[33]，采用循環(huán)沉淀法收集蟲體。具體操作步驟如下：（1）將編好號(hào)的每只雞的2 條盲腸放入一個(gè)塑料盆內(nèi)，在盆內(nèi)裝好一半體積的清水。（2）用剪刀將盲腸剖開，清洗出盲腸內(nèi)的所有糞便于清水中。將糞便攪碎，與水混勻，加滿清水，靜置1 h。（3）倒掉上一步驟中靜置沉淀好的液體的上層液，保留沉淀物并加滿清水混勻，靜置30 min，重復(fù)2～3 次至上層液透明為止。（4）倒掉上一步驟中的上層液，將沉淀物倒入黑色圓盤中，以肉眼或借助于放大鏡尋找蟲體。用鑷子或解剖針挑取蟲體置于培養(yǎng)皿中，用滅菌生理鹽水清洗干凈，進(jìn)行記錄和鑒定。

1.2.2 蟲體鑒定

將清洗干凈的蟲體放到滴有乳酸酚透明液的載玻片上，蓋上蓋玻片，置于顯微鏡下進(jìn)行鏡檢。根據(jù)雞異刺線蟲的交合刺形狀和長度、尾長等形態(tài)結(jié)構(gòu)特征，進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定[5-6]，將鑒定好的蟲體保存于-20℃冰箱待用。

1.2.3 判定依據(jù)

感染率的計(jì)算公式為：感染率=樣品感染數(shù)/樣品總數(shù)。

感染強(qiáng)度為從盲腸中實(shí)際采集到的雞異刺線蟲數(shù)目。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

經(jīng)循序沉淀法檢測(cè)了四川雅安、西昌、綿陽、達(dá)州、成都、廣元和自貢7 個(gè)地區(qū)共236 只本地散養(yǎng)肉雞只感染雞異刺線蟲的情況，經(jīng)過蟲種鑒定與統(tǒng)計(jì)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)所檢測(cè)的236 只雞只中有93 只雞盲腸內(nèi)雞異刺線蟲的檢測(cè)呈陽性，且每只雞的雞異刺線蟲的感染數(shù)量有較大差異；所檢測(cè)的雞只中有143 只雞盲腸內(nèi)未檢測(cè)到雞異刺線蟲蟲體。

2.1 感染率

本研究所調(diào)查的四川7 個(gè)地區(qū)本地散養(yǎng)肉雞的雞異刺線蟲感染率介于23.3%～57.6%，平均感染率為39.4%（93/236）（表1）。7 個(gè)地區(qū)中，雞異刺線蟲感染率從高到低依次為：綿陽＞雅安＞自貢＞達(dá)州＞廣元＞西昌＞成都。綿陽地區(qū)雞只的雞異刺線蟲感染率最高為57.6%（19/33），其次為雅安地區(qū)（23/43=53.5%）；而成都地區(qū)雞只的雞異刺線蟲感染率最低，僅為23.3%（7/30）（表1）。

2.2 感染強(qiáng)度

四川7 個(gè)地區(qū)的236 只本地散養(yǎng)雞盲腸內(nèi)共收集到雞異刺線蟲蟲體3 156 條（表1）。7 個(gè)地區(qū)所收集到的雞異刺線蟲總數(shù)從高到低依次為：廣元（1 324條）＞雅安（676 條）＞達(dá)州（496 條）＞自貢（466 條）＞綿陽（142 條）＞西昌（26 條）＞成都（24 條）。

93 只陽性雞只的盲腸內(nèi)雞異刺線蟲的平均感染強(qiáng)度為33.9 條/只，其中以廣元地區(qū)雞只的感染強(qiáng)度最高（52～328 條/只），而成都地區(qū)雞只的感染強(qiáng)度最低（1～5 條/只）（表2）。檢測(cè)到雞異刺線蟲的廣元地區(qū)雞只共有19 只，其中有6 只雞只的雞異刺線蟲感染數(shù)量超過100 條/只。成都和西昌地區(qū)雞只的雞異刺線蟲感染強(qiáng)度較低，每只雞的蟲體感染強(qiáng)度均未超過10 條。除廣元外，雅安、達(dá)州和自貢地區(qū)陽性雞只中亦檢測(cè)出超過100 條/只的樣品，個(gè)別雞只的雞異刺線蟲感染強(qiáng)度較大（表1 和表2）。

3 討論

目前，國內(nèi)外已有多個(gè)國家對(duì)禽類的雞異刺線蟲感染率情況進(jìn)行了調(diào)查與報(bào)道，各國雞的雞異刺線蟲感染率差異較大(7.50%～96.00%)。國外的調(diào)查中，以美國東南部肉雞的雞異刺線蟲的感染率最高，為96%[8]，其次為坦桑尼亞農(nóng)村散養(yǎng)雞的雞異刺線蟲的感染率，最高可達(dá)74%[13]，與丹麥的有機(jī)放養(yǎng)和籠養(yǎng)雞群的雞異刺線蟲的感染率相接近（分別為72.5%和68.8%）[21]，感染率緊隨其后的是津巴布韋的格羅蒙茲區(qū)的散養(yǎng)仔雞和成年雞（感染率分別為64%和62%）[14]和美國內(nèi)布拉斯加州雉雞的雞異刺線蟲的感染率最高達(dá)65%[9]。贊比亞中部、非洲西部、約旦北部和土耳其凡省4 個(gè)地區(qū)雞群的雞異刺線蟲感染率非常接近（均約30%），其中約旦北部肉雞的雞異刺線蟲感染率為33%[22]，贊比亞中部地區(qū)散養(yǎng)雞的雞異刺線蟲的感染率為32.8%（41/125）[20]，非洲西部加納地區(qū)的散養(yǎng)雞的雞異刺線蟲感染率為31%（31/100)[15]，土耳其凡省肉雞的雞異刺線蟲的感染率為30%[23]。美國肯塔基和田納西州西部的59 份野生火雞腸道樣品的雞異刺線蟲的感染率為27%[10]，與尼日利亞馬庫爾迪地區(qū)的肉雞和蛋雞的雞異刺線蟲感染率非常接近（27.7%）[17]?？夏醽喍鄠€(gè)地區(qū)雞群的雞異刺線蟲感染率非常接近（22.8%和21.33%）[18-19]。丹麥各地、埃塞俄比亞、摩洛哥及美國阿肯色州雞群的雞異刺線蟲感染率低于20.0%，其中丹麥的厚墊草法養(yǎng)殖的雞群中雞異刺線蟲的感染率為19.4%[21]，埃塞俄比亞的阿姆哈拉州散養(yǎng)雞的感染率為17.23%（46/267）[16]，摩洛哥阿爾卜地區(qū)肉雞的感染率為10%[12]，最低的是美國北阿肯色州調(diào)查籠養(yǎng)肉雞的感染率（7.5%）[11]。國內(nèi)的福建、安徽和北京等8 地（北京、天津、青島、濟(jì)南、南京、揚(yáng)州、合肥、上海）、湖南省長沙等5 地（長沙、湘潭、永州、常德和婁底）、黑龍江省綏化市及遼寧省不同地區(qū)也對(duì)雞異刺線蟲的感染情況進(jìn)行了報(bào)道，感染率為20.30%～76.60%[7,24-29]。從已報(bào)道的雞異刺線蟲感染情況可以看出，大多數(shù)情況下雞異刺線蟲的感染率較高，表明雞異刺線蟲的傳播性更大。

表1 四川7個(gè)地區(qū)的雞異刺線蟲感染情況

表2 四川7個(gè)地區(qū)分離的雞異刺線蟲數(shù)量統(tǒng)計(jì)

本次調(diào)查結(jié)果顯示四川省7 個(gè)地區(qū)雞群的雞異刺線蟲平均感染率為39.4%，在國內(nèi)外調(diào)查結(jié)果中屬于中等水平。其中，綿陽和雅安地區(qū)的感染率都高于50%（分別為57.6%和53.5%），遠(yuǎn)高于其他5 個(gè)地區(qū)。這可能是因?yàn)榫d陽和雅安地區(qū)降雨量充沛，自然環(huán)境利于雞異刺線蟲的繁殖與傳播；而成都地區(qū)的感染率最低（23.3%），可能是因?yàn)槌啥嫉貐^(qū)經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)，養(yǎng)殖水平與飼養(yǎng)管理水平較高，在預(yù)防措施及驅(qū)蟲程序上更加規(guī)范。廣元地區(qū)的感染率雖然不高，但感染強(qiáng)度最大，雞異刺線蟲寄生數(shù)量較多時(shí)，會(huì)對(duì)雞造成嚴(yán)重的危害，引起結(jié)節(jié)性盲腸炎，出現(xiàn)腹瀉、消瘦、貧血和產(chǎn)蛋率下降等癥狀，嚴(yán)重者甚至衰弱而死亡，因此感染強(qiáng)度大的地區(qū)應(yīng)高度重視該病的發(fā)生。本次調(diào)查結(jié)果顯示雞異刺線蟲的感染率在國內(nèi)外屬于中等水平，在四川7 個(gè)地區(qū)均有不同程度的發(fā)生，感染率最低的成都地區(qū)也有23.3%的感染率。因此，在四川地區(qū)的養(yǎng)禽業(yè)中，仍應(yīng)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，重視雞異刺線蟲病的防治。

[1]楊光友.動(dòng)物寄生蟲病學(xué)[M].四川出版集團(tuán),2005,3：141-142.

[2] 劉永張,李樹榮,王榮瓊,等.紅腹錦雞感染雞異刺線蟲病例[J].動(dòng)物學(xué)雜志,2006,41：121-123.

[3]Tompkins D, Greenman J, Robertson P, et al. The role of shared parasites in the exclusion of wildlife hosts：Heterakis gallinarum in the ring-necked pheasant and the grey partridge [J]. Journal of Animal Ecology, 2000, 69：829-840.

[4]呂召宏,徐廣庭,林瑞慶,等.雞異刺線蟲ITS rDNA的PCR 擴(kuò)增, 克隆及序列分析 [J]. 中國畜牧獸醫(yī),2005,32：41-44.

[5] 史梅青,張莉,張路平.山西和陜西兩省鳥類寄生異刺屬線蟲的研究 (線蟲綱：異刺科) [J].四川動(dòng)物,2010,29：527-535.

[6]徐岌南.廣東幾種鳥類寄生線蟲的研究[J].動(dòng)物學(xué)報(bào),1957,9：47-71.

[7] 顧昌棟,吳淑卿,尹文真,等.我國華北、華東地區(qū)家禽寄生吸蟲和線蟲的初步調(diào)查[J].動(dòng)物學(xué)報(bào),1964,16：581-595.

[8]Yazwinski T,Tucker C,Wray E,et al.A survey on the incidence and magnitude of intestinal helminthiasis in broiler breeders originating from the southeastern United States[J].The Journal of Applied Poultry Research,2013,22：942-947.

[9]Greiner EC. Parasites of Nebraska pheasants [J].Journal of wildlife diseases,1972,8(3)：203-206.

[10]Castle MD, Christensen BM. Blood and gastrointestinal parasites of eastern wild turkeys from Kentucky and Tennessee [J].Journal of wildlife diseases,1984,20：190-196.

[11]Wilson K,Yazwinski T,Tucker C,et al.A survey into the prevalence of poultry helminths in northwest Arkansas commercial broiler chickens [J]. Avian diseases, 1994：158-160.

[12]Hassouni T, Belghyti D. Distribution of gastrointestinal helminths in chicken farms in the Gharb region-Morocco [J]. Parasitology research, 2006, 99：181-183.

[13]Permin A, Magwisha H, Kassuku A, et al. A cross-sectional study of helminths in rural scavenging poultry in Tanzania in relation to season and climate [J].Journal of Helminthology,1997,71：233-240.

[14]Permin A, Esmann J, Hoj C, et al. Ecto-, endo- and haemoparasites in free-range chickens in the Goromonzi District in Zimbabwe[J].Preventive Veterinary Medicine,2002,54：213-224.

[15]Poulsen J, Permin A, Hindsbo O, et al. Prevalence and distribution of gastro-intestinal helminths and haemoparasites in young scavenging chickens in upper eastern region of Ghana, West Africa [J]. Preventive Veterinary Medicine,2000,45：237-245.

[16]Eshetu Y, Mulualem E, Ibrahim H, et al. Study of gastro-intestinal helminths of scavenging chickens in four rural districts of Amhara region, Ethiopia [J]. Revue scientifique et technique (International Office of Epizootics),2001,20：791-796.

[17]Ogbaje C, Agbo E, Ajanusi O. Prevalence of Ascaridia galli, Heterakis gallinarum and Tapeworm infections in birds slaughtered in Makurdi township [J].International Journal of Poultry Science, 2012, 11：103-107.

[18]Irungu LW,Kimani R,Kisia S.Helminth parasites in the intestinal tract of indigenous poultry in parts of Kenya：short communication [J]. Journal of the South African Veterinary Association,2004,75：p.58-59.

[19]Mungube E, Bauni S, Tenhagen B-A, et al.Prevalence of parasites of the local scavenging chickens in a selected semi-arid zone of Eastern Kenya [J].Tropical animal health and production, 2008, 40：101-109.

[20]Phiri I, Phiri A, Ziela M, et al. Prevalence and distribution of gastrointestinal helminths and their effects on weight gain in free-range chickens in Central Zambia[J]. Tropical animal health and production, 2007, 39：309-315.

[21]Permin A, Bisgaard M, Frandsen F, et al. Prevalence of gastrointestinal helminths in different poultry production systems [J]. British poultry science, 1999, 40：439-443.

[22]Abdelqader A, Gauly M, Wollny C, et al. Prevalence and burden of gastrointestinal helminthes among local chickens, in northern Jordan [J]. Preventive veterinary medicine,2008,85：17-22.

[23]Orunc O,Bi?ek K.Determination of parasite fauna of chicken in the Van region [J]. Türkiye Parazitoloji Dergisi,2009,33(2)：162-164.

[24]汪溥欽.福建主要家禽寄生線蟲調(diào)查報(bào)告[J].中國獸醫(yī)雜志,1962,10：3,7-8.

[25]陸鳳琳,李培英,廖圣法.安徽省家雞寄生蠕蟲調(diào)查研究[J].安徽農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào),1990,17(2)：93-98.

[26] 彭俊宇,宋海燕,陳文承,等.湖南省部分地區(qū)商品雞異刺線蟲感染情況調(diào)查 [J].中國動(dòng)物傳染病學(xué)報(bào),2009,17：51-54.

[27] 鄭長友,李覺慧,劉莉,等.綏化市雞寄生蠕蟲區(qū)系調(diào)查報(bào)告[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),1998,6：27.

[28] 楊錫林,畢勝,高立勃,等.綏化市家禽蠕蟲區(qū)系調(diào)查補(bǔ)充報(bào)告[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),1999,1：20.

[29] 劉孝剛,于金玲,于本良,等.雞寄生蟲流行區(qū)系調(diào)查[J].畜牧與獸醫(yī),2010,42(3)：75-76.

[30]Mcdougald L. Blackhead disease (histomoniasis) in poultry： a critical review [J]. Avian Diseases, 2005, 49：462-476.

[31]Bazh EK. Molecular identification and phylogenetic analysis of Heterakis gallinae from native chickens in Egypt[J].Parasitology research,2013,112：3557-3560.[32]Schwarz A, Gauly M, Abel H, et al. Pathobiology of Heterakis gallinarum mono-infection and co-infection with Histomonas meleagridis in layer chickens [J].Avian Pathology,2011,40：277-287.

[33]秦建華,李國清.動(dòng)物寄生蟲病學(xué)實(shí)驗(yàn)教程[J].中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社,2007：71-76.