劉春楊,張秀玲,李蘭會(huì)*,任二軍,周榮艷,李祥龍

(1.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 動(dòng)物科技學(xué)院，河北 保定 071001；2.石家莊市農(nóng)林科學(xué)研究院, 河北 石家莊 050041；3.河北科技師范學(xué)院，河北 秦皇島 066004)

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飼料鋅添加水平對(duì)水貂臟器組織鋅殘留的影響*

劉春楊1,張秀玲1,李蘭會(huì)1*,任二軍2,周榮艷1,李祥龍3

(1.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 動(dòng)物科技學(xué)院，河北 保定 071001；2.石家莊市農(nóng)林科學(xué)研究院, 河北 石家莊 050041；3.河北科技師范學(xué)院，河北 秦皇島 066004)

試驗(yàn)采用火焰原子吸收光譜法研究飼料中鋅添加水平10、15、30、45、60 mg/kg蛋氨酸螯合鋅、60 mg/kg無(wú)機(jī)鋅對(duì)水貂糞便、腎臟、肝臟和胰臟中鋅含量的影響。結(jié)果表明，添加45 mg/kg蛋氨酸螯合鋅的水貂腎臟鋅含量顯著低于飼料中添加30 mg/kg蛋氨酸螯合鋅處理組和60 mg/kg無(wú)機(jī)鋅處理組的(P<0.05)；同時(shí)45 mg/kg蛋氨酸螯合鋅組糞便鋅含量最低，顯著低于60 mg/kg無(wú)機(jī)鋅處理組(P<0.05)。飼料中添加45mg/kg蛋氨酸螯合鋅水貂對(duì)鋅的代謝利用率最高。飼料鋅的不同水平添加對(duì)肝臟和胰臟鋅含量影響差異不顯著(P>0.05)，估計(jì)60日齡水貂肝臟和胰臟鋅含量的95 %置信區(qū)間分別為10.98～37.12 μg/g和20.09～53.47 μg/g。隨日糧有機(jī)鋅添加水平的增加，腎臟濕重呈上升趨勢(shì)，胰臟濕重呈下降趨勢(shì)，30 mg/kg的添加水平胰臟重和腎臟鋅含量均較高。結(jié)論：水貂飼料蛋氨酸鋅的添加量在30～45 mg/kg為宜。

水貂；鋅；原子吸收光譜法；糞便；臟器

鋅作為酶的構(gòu)成成分和輔助因子，與體內(nèi)近300種酶的活性有關(guān)，廣泛參與調(diào)解和控制機(jī)體的代謝活動(dòng)，被稱為“生命元素”。鋅在動(dòng)物體內(nèi)不僅參與DNA、RNA、蛋白質(zhì)、糖類、脂類、維生素和礦物質(zhì)的代謝，而且與胰島素、胰高血糖素、前列腺素和促性腺激素等的功能和活性有關(guān)[1]。鋅是雄性動(dòng)物正常精子生長(zhǎng)發(fā)育的必需元素，可顯著提高精液品質(zhì)，缺鋅可使雄性仔獸的性腺發(fā)育成熟時(shí)間延長(zhǎng)。血漿中蛋白結(jié)合鋅是母獸奶鋅的中間來(lái)源，鋅還可以通過(guò)胎盤轉(zhuǎn)移到胎兒體內(nèi)，缺鋅可使懷孕母獸早產(chǎn)、仔獸初生重下降、胎兒成活率下降。此外，鋅還參與動(dòng)物機(jī)體的免疫功能，合理的鋅攝入可保證動(dòng)物機(jī)體的組織器官處于最佳狀態(tài)，增強(qiáng)動(dòng)物的免疫系統(tǒng)，增強(qiáng)動(dòng)物抵御疾病的能力[2]。

水貂是一種小型珍貴毛皮動(dòng)物，其毛皮珍貴，素有“裘皮之王”的美稱，是世界裘皮市場(chǎng)的主要產(chǎn)品。其貂心、貂鞭、貂油也有較高的藥用價(jià)值。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)水貂營(yíng)養(yǎng)的研究主要集中在能量、蛋白質(zhì)和脂肪等方面，對(duì)礦物質(zhì)元素的研究相對(duì)較少[3]。水貂從野生狀態(tài)到集約化的人工飼養(yǎng)，出現(xiàn)了一系列問題，其中由于采食范圍的縮小及食物種類的單一化而造成了很大損失，在一定程度上制約了水貂產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。本試驗(yàn)主要研究飼料鋅添加量對(duì)水貂糞便、肝臟、胰臟和腎臟中鋅含量的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

本試驗(yàn)所使用有機(jī)鋅為蛋氨酸螯合鋅，無(wú)機(jī)鋅為ZnSO4·7H2O。在石家莊某公司選擇60日齡體重相近(0.934±0.071) kg的雌性水貂60只。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

本試驗(yàn)采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)，60只水貂按體重隨機(jī)分為6組(每組10只)，分別飼喂添加劑量不同的水貂飼料，試驗(yàn)1至5組飼料中分別添加0、15、30、45、60 mg/kg蛋氨酸螯合鋅，6組添加60 mg/kg無(wú)機(jī)鋅。

1.3 儀器與試劑

AA-6300原子吸收分光光度計(jì)(日本島津公司)；空心陰極燈(日本島津公司)；鋅元素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(1 000 mg/L，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心)，將鋅的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液稀釋成標(biāo)準(zhǔn)溶液：0、0.5、1.0、3.0、5.0 mg/L。優(yōu)級(jí)純硝酸(65%)、高氯酸(70%)、鹽酸(36%)；實(shí)驗(yàn)用水為超純水。10%鹽酸：量取24 mL鹽酸(41%)，用水稀釋至100 mL，硝酸-高氯酸(3∶1)。

1.4 樣品處理與測(cè)定

1.4.1 測(cè)定糞便中鋅含量 水貂糞便風(fēng)干混勻，四分法縮減至約100 g粉碎，過(guò)1 mm尼龍篩。稱取1.0000 g水貂糞便于凱式燒瓶中進(jìn)行處理，加入7～8 mL硝酸，過(guò)夜，馬弗爐加熱150 ℃左右，直至燒瓶中泡沫消失，提高溫度，蒸盡硝酸，至樣品近干，取下冷卻，加硝酸-高氯酸混合酸5 mL，逐漸提高溫度，消解液呈無(wú)色透明時(shí)，再升溫使高氯酸分解，至溶液近干，取下燒瓶加10 %鹽酸2 mL和20 mL水溶解殘留物，再加熱5 min，趁熱過(guò)濾至50 mL容量瓶，冷卻后用超純水定容，混勻，測(cè)定鋅含量[4]。

1.4.2 測(cè)定腎臟、肝臟、胰臟中鋅含量 取水貂腎臟、肝臟和胰臟各1.0 g，剪碎，置于50 mL高腳燒杯中，加入硝酸與鹽酸的混合液(1：2)5～10 mL，搖勻浸泡，放置過(guò)夜，次日，置于馬弗爐上加熱消解至液體變清，再加2 mL硝酸和0.5 mL高氯酸，加熱至冒白煙，用數(shù)毫升超純水沖洗杯壁，加熱至白煙冒盡，再加幾毫升超純水，加熱以除去多余的硝酸，最后置于100 mL容量瓶中，用超純水定容。同時(shí)，取與消解樣品相同量的混合酸消解液，按上述操作做試劑空白測(cè)定。

按儀器工作條件測(cè)定Zn標(biāo)準(zhǔn)液，以樣品濃度對(duì)吸光度繪制校準(zhǔn)曲線，計(jì)算回歸方程，決定系數(shù)為0.9969，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線[5]。

1.4.3 數(shù)據(jù)處理 應(yīng)用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件中的單因素方差分析對(duì)不同處理組的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，組間差異性用Duncan法進(jìn)行多重比較，各處理組數(shù)據(jù)采用“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同鋅水平對(duì)水貂糞便、腎臟、肝臟、胰臟鋅含量的影響

從表1可知，6組水貂糞便中鋅含量顯著高于4組(P<0.05)，其他各組差異不顯著。糞便中的鋅含量隨飼料中有機(jī)鋅的增加呈上升趨勢(shì)，當(dāng)飼料中有機(jī)鋅為60 mg/kg以下時(shí)，糞便中鋅含量較低；6組添加無(wú)機(jī)鋅時(shí)糞便中的鋅含量最高。4組水貂飼料中添加蛋氨酸螯合鋅45 mg/kg時(shí)，糞便中鋅含量極顯著低于無(wú)機(jī)鋅60 mg/kg的，說(shuō)明有機(jī)鋅添加劑量45 mg/kg水貂可能對(duì)鋅的利用率最優(yōu)。

表1 糞便、腎臟、肝臟、胰臟的鋅含量

注：同列數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，相同字母表示差異不顯著(P>0.05)。下同。

Notes: In the same column, values with different lowercase letters mean significant difference (P<0.05), values with same letters mean no significant difference(P>0.05). The same as below.

3組和6組中腎臟鋅含量顯著高于4組(P<0.05),其他各組差異不顯著(P>0.05)。各組肝臟鋅含量差異不顯著(P>0.05)，由60只水貂估計(jì)60日齡水貂肝臟鋅含量的95 %置信區(qū)間為10.98～37.12 μg/g。各組胰臟的鋅含量差異不顯著(P>0.05)，由60只水貂估計(jì)60日齡水貂胰臟鋅含量的95 %置信區(qū)間為20.09～53.47 μg/g。

2.2 腎臟、肝臟、胰臟的濕重和含水量水平

從表2可知，5組腎臟濕重顯著高于2組(P<0.05)，其他組差異不顯著(P>0.05)，但隨有機(jī)鋅添加劑量的增加，水貂腎臟濕重呈現(xiàn)逐步增加的趨勢(shì)。水貂肝臟濕重各組間差異不顯著(P>0.05)，由60只水貂肝臟濕重估計(jì)水貂肝臟重量的95%置信區(qū)間為24.13～60.24 g。3組的胰臟濕重顯著高于1組(P<0.05)，其他各組差異不顯著(P>0.05)。各組腎臟含水量差異不顯著(P>0.05)，對(duì)照組0 mg/kg添加量時(shí)，腎臟的含水量較低；有機(jī)鋅水平為15～60 mg/kg時(shí)，腎臟含水量較穩(wěn)定，無(wú)機(jī)鋅添加量60 mg/kg腎臟含水量與對(duì)照組相同，由此估計(jì)腎臟含水量的95%置信區(qū)間為67%～69%。

表2 腎臟、肝臟和胰臟的濕重和含水量

各組肝臟含水量差異不顯著(P>0.05)，由60個(gè)肝臟含水量值估計(jì)水貂肝臟含水量的95%置信區(qū)間為64%～67%。對(duì)照組的胰臟含水量極顯著高于6組(P<0.01)，其他各組差異不顯著，但胰臟的含水量隨有機(jī)鋅添加量的增加呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。

3 討 論

3.1 不同鋅含量對(duì)動(dòng)物的影響及作用機(jī)理

鋅在蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、碳水化合物和核酸代謝中扮演著重要的角色，水貂的生長(zhǎng)、骨骼發(fā)育、皮毛成熟，食欲及機(jī)體的新陳代謝等都離不開鋅。當(dāng)飼料中鋅含量不足，或飼料或動(dòng)物體內(nèi)存在與鋅吸收相拮抗的因子(如鈣、銅、鎂、鐵、鉻、植酸等)時(shí)，鋅的利用率降低，容易引起鋅的缺乏。仔畜缺鋅最明顯的癥狀是食欲降低、生長(zhǎng)受阻。同時(shí)，鋅水平過(guò)高動(dòng)物機(jī)體也會(huì)出現(xiàn)不良反應(yīng)，單胃動(dòng)物可耐受超過(guò)最適需要量的20～30倍的鋅含量。有實(shí)驗(yàn)表明，高鋅會(huì)使母貂出現(xiàn)無(wú)色尿、脫毛，仔獸成活率降低等癥狀。但也有實(shí)驗(yàn)表明，高鋅不會(huì)對(duì)水貂成活率、采食量、日增重、血液指標(biāo)以及毛皮質(zhì)量等產(chǎn)生明顯不良反應(yīng)，而且組織病理學(xué)檢查沒有發(fā)現(xiàn)鋅中毒導(dǎo)致的肝臟、腎臟和胰腺的損傷。

本試驗(yàn)主要研究了飼料中不同鋅添加量對(duì)糞便、腎臟，肝臟和胰臟的影響。由于腎臟是鋅的排泄器官，隨著飼料中日糧鋅添加量的增加，腎臟的濕重也呈上升趨勢(shì)。而腎臟鋅的排泄量也隨之增加，因大部分經(jīng)糞便排出，導(dǎo)致糞便中鋅的含量也呈上升趨勢(shì)。試驗(yàn)結(jié)果顯示，水貂鋅代謝與胰臟也有一定的關(guān)系，飼料鋅添加量與胰臟含水量呈負(fù)相關(guān)，隨鋅添加量的增加，胰臟含水量呈下降趨勢(shì)。許多研究表明，外源鋅對(duì)組織鋅含量有一定的影響，各組織器官對(duì)外源鋅濃度的敏感性不同[6-7]。本試驗(yàn)中，隨飼料鋅添加量不同，腎臟鋅含量差異顯著，肝臟和胰臟鋅含量差異均不顯著，說(shuō)明腎臟對(duì)飼料鋅添加量較為敏感。

3.2 飼料中不同鋅水平對(duì)水貂糞便、腎臟、肝臟和胰臟中鋅含量的影響

許梓榮等[8]通過(guò)對(duì)仔豬的研究發(fā)現(xiàn)高鋅可以提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化率。也有研究結(jié)果表明，日糧中添加適宜水平的鋅可以顯著改善蛋雞能量和蛋白質(zhì)代謝。一般金屬絡(luò)合物中的礦物質(zhì)元素的生物學(xué)價(jià)值較高，易于被家畜消化吸收，李麗立等[9]在山羊日糧中添加蛋氨酸螯合鋅、氧化鋅后，山羊蛋白質(zhì)消化率顯著高于對(duì)照組。任二軍等[10]研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，日糧中添加蛋氨酸螯合鋅水平超過(guò)45 mg/kg后，水貂脂肪消化率呈降低的趨勢(shì)。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，水貂糞便中鋅含量呈現(xiàn)隨飼料鋅添加量的增加呈上升的趨勢(shì)，但45 mg/kg蛋氨酸鋅添加組糞便鋅含量最低，顯著低于60 mg/kg無(wú)機(jī)鋅的添加組，可能預(yù)示45 mg/kg的蛋氨酸鋅添加水貂鋅代謝水平最優(yōu)。

徐麗霞等[12]通過(guò)對(duì)家兔的研究結(jié)果表明，地塞米松磷酸鈉和硫酸鋅可使家兔肝臟的鋅含量明顯增加，且具有顯著的協(xié)同作用。梁鴻雁等[13]通過(guò)對(duì)獺兔的研究結(jié)果表明，提高日糧鋅水平可顯著提高肝臟和腎臟鋅含量；提高日糧維生素A水平，鋅與維生素A在肝臟、腎臟、胰臟、脛骨、被毛鋅沉積方面上有互作效應(yīng)。

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，肝臟和胰臟的鋅含量差異不顯著，腎臟鋅含量差異顯著。有機(jī)鋅水平為30 mg/kg時(shí)，腎臟中鋅含量最高。有機(jī)鋅水平為15～45 mg/kg時(shí)，胰臟中鋅含量較高；有機(jī)鋅水平為45～60 mg/kg時(shí)，胰臟中鋅含量較低。

3.3 腎臟、肝臟、胰臟的濕重和含水量

楊再學(xué)等[12]通過(guò)在黑線姬鼠的研究結(jié)果表明，不同的生活環(huán)境，黑線姬鼠的肝臟重量和肝臟相對(duì)重量差異不顯著，不同季節(jié)之間肝臟重量和肝臟相對(duì)重量具有一定差異，其季節(jié)變化趨勢(shì)為春季最高、夏季較高、秋季較低、冬季最低。

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，水貂腎臟濕重與飼料中鋅水平存在相關(guān)性，隨有機(jī)鋅水平的增加逐步上升的趨勢(shì)，但腎臟含水量不受飼料鋅水平的影響。飼料蛋氨酸鋅水平30 mg/kg時(shí)胰臟的濕重最高，顯著高于0 mg/kg的對(duì)照組，胰臟含水量隨鋅水平的增加呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，并且對(duì)照組的胰臟含水量顯著高于無(wú)機(jī)鋅水平60 mg/kg。水貂肝臟濕重和含水量不受飼料鋅水平的影響。

4 結(jié) 論

隨有機(jī)鋅添加劑量增加，水貂腎臟濕重呈現(xiàn)增加的趨勢(shì)，胰臟的含水量有下降趨勢(shì)，30 mg/kg的添加量胰臟重和腎臟鋅含量均較高。水貂飼料中添加45 mg/kg的蛋氨酸鋅，糞便鋅最低。推薦水貂飼料蛋氨酸鋅添加劑水平為30～45 mg/kg。

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Effect of Zinc Content in Diets on Zn Residual in Mink Visceral Organs

LIU Chun-yang1, ZHANG Xiu-ling1, LI Lan-hui1*, REN Er-jun2, ZHOU Rong-yan1, LI Xiang-long3

(1.CollegeofAnimalScienceandTechnology,AgriculturalUniversityofHebei,Baoding071001,China; 2.ShijiazhuangAcademyofAgricultureandForestrySciences,Shijiazhuang050041,China; 3.HebeiNormalUniversityofScienceandTechnology,Qinhuangdao066004,China)

To determine the effect of different zinc additive content on zinc levels in feces, kidney, liver and pancreas of mink, flame atomic absorption spectrometry was used to analyze the content of zinc. The results showed that when 45 mg/kg of methionine chelate zinc was added in the diet, the zinc content of kidney was significantly lower than that when 30 mg/kg methionine chelate zinc and 60mg/kg inorganic zinc was added; the fecal zinc residues was the lowest when 45 mg/kg zinc methionine was added in the diets, significantly lower than that when 60mg/kg inorganic zinc was added(P<0.05). The metabolic utilization of zinc peaked when 45 mg/kg methionine chelate zinc was added. With the different zinc added in the diet of mink, there was no significant difference of zinc content in liver and pancreas(P<0.05). It was estimated that the confidence interval of liver and pancreas of 60-day-old mink was 10.89～37.12 μg/g and 20.09～53.47 μg/g. There was an increasing trend of wet weight of kidney and a decreasing trend of moisture content of pancreatic while increasing organic zinc was added in the diet. Both the wet weight of pancreas and the zinc content in kidney were high when 30 mg/kg of zinc methionone was added in the diet. The results indicated that 30～45 mg/kg zinc methionine in mink diets was the recommended content.

mink; zinc; flame atomic absorption spectrometry; faeces; visceral organs

2014-11-06

2015-01-05

河北省自然科學(xué)基金(2015204176)；河北農(nóng)業(yè)大學(xué)橫向項(xiàng)目(2012-048)

劉春楊(1990-)，女，河北唐山人，碩士研究生，研究方向：動(dòng)物遺傳育種與繁殖。E-mail：1163825428@qq.com

*[通訊作者] 李蘭會(huì)(1972-)，女，河北棗強(qiáng)人，副教授，碩士生導(dǎo)師，研究方向：動(dòng)物遺傳育種。E-mail：lanhuili13@163.com

S811.6

A

1005-5228(2015)08-0041-04