韋濟友，肖玉貴，李明忠，吳文旋, 2*

(1.貴州大學(xué) 動物科學(xué)學(xué)院，貴州 貴陽 550025；2.貴州大學(xué) 新農(nóng)村發(fā)展研究院·中國西部發(fā)展能力研究中心，貴州 貴陽 550025)

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過瘤胃膽堿對黔北麻羊能量效率及血漿免疫指標(biāo)的影響

韋濟友1，肖玉貴1，李明忠1，吳文旋1, 2*

(1.貴州大學(xué) 動物科學(xué)學(xué)院，貴州 貴陽 550025；2.貴州大學(xué) 新農(nóng)村發(fā)展研究院·中國西部發(fā)展能力研究中心，貴州 貴陽 550025)

試驗旨在研究過瘤胃膽堿(rumen-protected choline, RPC)對黔北麻羊能量效率及血漿免疫指標(biāo)的影響。采用非配對試驗設(shè)計，將20只年齡、體重一致的黔北麻羊羔羊隨機分成2組，每組10只，分別飼喂0 g/(d·只)(對照組)和10 g/(d·只)(試驗組)RPC的日糧，檢測飼糧能量效率指標(biāo)(總能表觀消化率、總能利用率、消化能利用率)與血漿免疫指標(biāo)(總蛋白、白蛋白、球蛋白)水平。結(jié)果顯示：(1)與對照組相比，試驗組總能、糞能、甲烷能水平較高(P<0.05)，尿能差異不顯著(P>0.05)；試驗組消化能、代謝能水平及總能表觀消化率、總能利用率均顯著高于對照組(P<0.05)。(2)RPC對羔羊血漿總蛋白、白蛋白、球蛋白影響較小，差異均不顯著(P>0.05)。由此可見，羔羊飼糧中補飼10 g/d的RPC可提高能量效率，但對血漿免疫指標(biāo)影響較小。

過瘤胃膽堿；能量效率；免疫指標(biāo)；黔北麻羊

膽堿屬B族維生素，為三甲基氨的氫氧化物(β-羥乙基)，對促進動物生長發(fā)育、提高飼料利用率、改善脂質(zhì)代謝等均有重要的作用。反芻動物具有以瘤胃為主要特點的消化器官，與單胃動物相比對養(yǎng)分的消化吸收差異明顯，這主要是因為瘤胃內(nèi)存在種類眾多、數(shù)量巨大的微生物，使膽堿在瘤胃內(nèi)可被迅速降解，利用效率低，一般以過瘤胃保護膽堿(Rumen-protected choline, RPC)的形式添加[1-4]。吳文旋[5]研究發(fā)現(xiàn)，RPC有利于改善泌乳盛期奶牛脂質(zhì)代謝和蛋白質(zhì)利用效率。劉翔[6]報道，在圍產(chǎn)期奶牛日糧中每日添加30 g/頭的RPC，可有效緩解奶牛的能量負平衡狀態(tài)，調(diào)節(jié)體內(nèi)的能量脂肪代謝，提高生產(chǎn)性能。RPC在提高山羊生長性能[7-8]、改善血液生化指標(biāo)[9]等方面也有正面效應(yīng)，可提高養(yǎng)殖經(jīng)濟效益。黔北麻羊主產(chǎn)于貴州習(xí)水、仁懷等美酒河流域，于2009年被鑒定為新的山羊品種，極具學(xué)術(shù)研究價值。但有關(guān)該山羊品種營養(yǎng)調(diào)控的研究報道較少，目前主要常見于本課題組開展的瘤胃發(fā)酵[10-13]和RPC對黔北麻羊生長性能及血液抗氧化應(yīng)激與脂質(zhì)代謝[14]，其余則專注于遺傳育種等方面。據(jù)此，本文旨在研究RPC對黔北麻羊能量效率及血漿免疫指標(biāo)的影響，豐富黔北麻羊健康養(yǎng)殖技術(shù)。

1 材料與方法

1.1 試驗設(shè)計

選取體況健康無病，年齡、體重基本一致的4月齡(斷奶時間為90日齡)黔北麻羊羔羊進行飼養(yǎng)試驗。采用非配對試驗設(shè)計，將20只試驗動物隨機分成對照組與試驗組，每組10只。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗組飼喂在基礎(chǔ)飼糧中每只每天添加10 g的RPC。RPC購自杭州康德權(quán)飼料有限公司。試驗持續(xù)40 d，共分4個階段，即1～10 d(預(yù)飼期)、11～20 d(正試1期)、21～30 d(正試2期)、31～40 d(正試3期)。參照中國肉用山羊飼養(yǎng)標(biāo)準(2004)[15]推薦的生長育肥山羊羔羊營養(yǎng)需要量，結(jié)合當(dāng)?shù)仫暳腺Y源，配方及其營養(yǎng)成分見表1。

1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

Table 1 Components and nutrients levels of the basal diet for lambs (DM basis)

原料Ingredients含量/%Content營養(yǎng)水平Nutrientlevels含量/%Content全株玉米Whole-plantcorn75.00GE/(KJ/g)16.65酒糟Distiller'sgrains5.00CP11.36精料混合料*Concentratemixture20.00EE3.74總計Total100.00NDF74.41ADF28.66Ash6.20

*注：組成(%)：玉米66、豆粕18、麩皮12、尿素1、預(yù)混料1、磷酸氫鈣1.5、食鹽0.5。

*Note: composition (%): corn 66, soybean meal 18, wheat bran 12, urea 1, premix 1, CaHPO4 1.5%, NaCl 0.5.

1.2 飼養(yǎng)管理

羔羊分欄全舍飼，留有足夠運動空間，于每天9:00及18:00清理飼槽剩料并稱重后進行飼喂。羔羊全期自由采食，自由飲水，統(tǒng)一管理。

1.3 檢測指標(biāo)

1.3.1 飼糧營養(yǎng)成分 試驗結(jié)束后，將收集的基礎(chǔ)飼糧樣品烘干、粉碎后轉(zhuǎn)入樣品袋中置于冰箱中保存，按《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測技術(shù)》[16]方法測定飼料總能(gross energy, GE)、粗蛋白(crude protein, CP)、粗脂肪(ether extract, EE)、中性洗滌纖維(neutral detergent fiber, NDF)、酸性洗滌纖維(acid detergent fiber, ADF)和粗灰分(Ash)。

1.3.2 能量相關(guān)指標(biāo) 參照《飼料營養(yǎng)價值評定方法》[17]，在每個階段的最后1天采用全收糞收尿法收集糞樣及尿樣，待試驗結(jié)束后將4次試樣混勻作為該組山羊待測糞樣及尿樣。其中，鮮糞準確稱重，混勻，取20%作為試樣，并按重量的10%加入10%的鹽酸，置于-20 ℃保存。尿液經(jīng)4層紗布過濾后記錄體積，取10%(體積分數(shù))作為試樣，將pH調(diào)至2，記錄加酸量，置于-20 ℃保存，備測糞能(energy in feces, FE)、尿能(energy in urine, UE)。

相關(guān)計算公式如下：

消化能(DE)=總能-糞能；

代謝能(ME)=消化能-尿能-甲烷能；

總能表觀消化率(%)=消化能/總能×100%；

總能利用率(%)=代謝能/總能×100%；

消化能利用率(%)=代謝能/消化能×100%。

甲烷能(Eg)參照Pelchen和 Peters(1998)[18]建立的以每日攝入的CP、DE、粗纖維(CF)與EE的量預(yù)測出甲烷量，再根據(jù)甲烷產(chǎn)量乘以甲烷熱值(55.15 kJ/g)進行估算：

Eg(kJ/d)=[2.5325-0.0122×CP(g/d)+0.0016×DE(kJ/d)+0.0175×CF(g/d)-0.0489×EE(g/d)]×55.15(kJ/g)。

1.3.3 血漿免疫生化指標(biāo) 在各階段最后1天晨飼前頸靜脈采血10 mL于3 000 r/min離心15 min，收集血漿用于檢測總蛋白、白蛋白、球蛋白。其中，總蛋白(total protein, TP)采用考馬斯亮藍法測定；白蛋白(albumin, Alb)利用微量酶標(biāo)儀法檢測；球蛋白(globulin, Glo)利用差減法計算得出，即球蛋白=總蛋白-白蛋白。試劑盒均購于南京建成生物工程研究所。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

利用SAS 9.4統(tǒng)計處理軟件進行t檢驗分析，各組間差異性顯著水平定為P<0.05。試驗數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準差(mean±SD)表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 能量效率

由表2可見，試驗組采食量顯著高于對照組(P<0.05)，使其總能也相應(yīng)較對照組高13.99%，差異顯著(P<0.05)。試驗組羔羊糞能比對照組高10.27%，且差異達到顯著水平(P<0.05)；但2組糞能占總能百分比間差異不顯著(P>0.05)，且試驗組較對照組低3.26%。試驗組消化能比對照組高13.87%，差異顯著(P<0.05)。2組羔羊尿能差異較小，未表現(xiàn)出顯著性差異(P>0.05)，試驗組比對照組低8.03%；與之對應(yīng)，試驗組尿能占總能百分比也較對照組低19.36%(P>0.05)?？鄢蚰?、甲烷能后，試驗組比對照組多了663 kJ/d(16.05%)的代謝能，差異顯著(P<0.05)。由此，RPC對羔羊能量效率表現(xiàn)為：試驗組的總能表觀消化率、總能利用率均顯著優(yōu)于對照組(P<0.05)，分別高出1.85%、4.50%；2組消化能利用率雖然差異不顯著(P>0.05)，但也以試驗組較高。

2.2 血漿免疫生化指標(biāo)

從表3可知，飼糧補飼RPC對羔羊血漿總蛋白、白蛋白、球蛋白的影響較小，除試驗組在第11d的白蛋白水平有高于對照組的趨勢外(P<0.1)，其余各個時間點及整個試驗周期內(nèi)，2組間差異均不顯著(P>0.05)，說明RPC對羔羊的血漿免疫生化指標(biāo)效應(yīng)不明顯。

表2 過瘤胃膽堿對羔羊能量利用效率的影響Table 2 Effect of rumen-protected choline on energy efficiency for lambs

注：同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)字母不同表示差異顯著(P<0.05)。下表同。

Notes: In the same row, values with different superscripts mean significant difference (P<0.05). The same as below.

注：甲烷能為估測值。

Notes: Methane energy was expressed by the estimated value.

表3 過瘤胃膽堿對羔羊血漿免疫指標(biāo)的影響Table 3 Effect of rumen-protected choline on plasma immune response of lambs

3 討 論

3.1 過瘤胃膽堿對黔北麻羊羔羊能量效率的影響

飼糧中有效能的含量可反映飼料能量的營養(yǎng)價值。因此，通過在飼料中補飼適宜種類添加劑，減少消化代謝過程中的能量消耗，提高動物對飼料能量的消化利用率及轉(zhuǎn)化效率成為營養(yǎng)學(xué)的重要研究內(nèi)容之一。本試驗研究表明，飼糧補飼10 g/d的RPC可顯著提高試驗組羔羊的食入總能，這與其具有較高的干物質(zhì)采食量有關(guān)[14]；同時試驗組糞能雖顯著高于對照組，但糞能/總能數(shù)值差異不顯著。王玲[19]發(fā)現(xiàn)，內(nèi)蒙古白絨山羊的糞能、糞能/總能數(shù)值隨葡萄糖水平的增加呈上升趨勢，但差異也未達顯著水平，這與本文結(jié)論類似。山羊尿能變化較小，不是影響能量利用效率的主要因素。張帆等[20]對延邊奶山羊能量代謝的研究發(fā)現(xiàn)，對照組(貓尾草干草)、處理1組(狗尾草干草:苜蓿干草=4:1)、處理2組(狗尾草干草:苜蓿干草=3:2)間尿能數(shù)值差異不顯著，其值分別占總能的6.85%、6.92%、5.25%，這與本試驗結(jié)果類似。張吉鹍等[21]報道，稻草補飼不同水平(25%、50%、75%)苜蓿的山羊飼糧的甲烷能占其攝食總能的百分比隨苜蓿的遞增而呈上升趨勢(7.17%、7.36%、7.71%)，差異達到顯著水平。本研究也發(fā)現(xiàn)，試驗組甲烷能損失量顯著高于對照組，這可能與干物質(zhì)、粗脂肪、中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維及氮平衡等營養(yǎng)物質(zhì)消化代謝率有關(guān)[15]。張吉鹍等[22]研究發(fā)現(xiàn)，稻草補飼不同水平苜蓿對山羊消化能、代謝能、總能表觀消化率及總能利用率影響較大，但對消化能利用率影響有限，各項數(shù)值大小、顯著性均與本試驗結(jié)果基本相符?？傮w而言，由本試驗結(jié)果可見，飼糧補飼一定水平的RPC在提高羔羊能量效率方面有一定的效果。

3.2 過瘤胃膽堿對黔北麻羊羔羊血漿免疫指標(biāo)的影響

動物攝入的飼糧只有通過消化吸收進入血液才能被利用，血液指標(biāo)水平的高低可作為動物對營養(yǎng)物質(zhì)吸收的判斷依據(jù)?？偟鞍子砂椎鞍缀颓虻鞍捉M成，營養(yǎng)、環(huán)境等因素均會導(dǎo)致其值上升/下降，繼而影響動物生長發(fā)育。陳東東[8]分別在山羊精料補充料中補飼0%、0.1%、0.2%、0.3%的RPC，血漿免疫指標(biāo)(總蛋白、白蛋白、球蛋白)間雖差異不顯著，但有較小波動，生長性能以0.1%組較優(yōu)。本試驗結(jié)果顯示，補飼10 g/d的RPC對山羊血漿總蛋白、白蛋白、球蛋白的影響有限，與本課題前期報道RPC對其他血漿生化指標(biāo)(葡萄糖、超氧化物歧化酶、丙二醛、尿素氮、甘油三酯、極低密度脂蛋白、總膽固醇、肌酐)的效應(yīng)類似，影響不大[14]。這是因為氧化應(yīng)激與動物免疫之間存在一定的關(guān)聯(lián)性[23]，符合本試驗前期報道結(jié)果。陳東東和王春維[24]報道，飼糧補飼不同水平的RPC，對8月齡麻城黑山羊血液總蛋白、白蛋白及球蛋白影響也較小(P>0.05)，與本試驗結(jié)論相近。這說明RPC對山羊血液免疫指標(biāo)的效果有限。

4 結(jié) 論

本試驗條件下，飼糧補飼10 g/d的RPC可提高黔北麻羊羔羊能量效率，但對血漿免疫能力沒有顯著影響。

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Effect of Rumen-Protected Choline on Energy Efficiency and Plasma Immune Index of Qianbeima Lambs

WEI Ji-you, XIAO Yu-gui, LI Ming-zhong, WU Wen-xuan

(1.CollegeofAnimalScience,GuizhouUniversity,Guiyang550025; 2.InstituteofNewRuralDevelopment,ChinaCenterforWesternDevelopmentCapacityResearch,GuizhouUniversity,Guiyang550025)

To evaluate the effect of rumen-protected choline (RPC) on energy efficiency and plasma immune index of goats, twenty Qianbeima lambs with similar age and body weight allocated to 2 groups with 10 lambs in each were fed 0 (control) and 10 g/d (treatment) RPC, respectively. Dietary energy efficiency measurements (gross energy digestibility, gross efficiency, and digestibility efficiency) and plasma immune index (total protein, albumin, and globulin) were detected. Results showed that compared with the control group, feeding of RPC resulted in higher levels (P<0.05) of gross energy intake, fecal energy, and methane energy for treatment, but did not affect the urine energy (P>0.05). Lambs in RPC experiment group had higher digestible energy and metabolizable energy intake levels, and gross energy apparent digestibility and gross energy efficiency than those in control group (P<0.05). Plasma concentrations of total protein, albumin, and globulin were not affected (P>0.05) by RPC treatment. The above-mentioned results indicate that adding of 10 g/d RPC could increase energy efficiency but had little effect on plasma immune index of lambs.

rumen-protected choline; energy efficiency; immune index; Qianbeima lambs

2014-11-25，

2014-12-13

國家自然科學(xué)基金(31360563)；貴州大學(xué)SRT項目(貴大SRT字(2013)088)

韋濟友(1990-)，男，貴州獨山人，本科生，研究方向：動物營養(yǎng)與飼料科學(xué)。E-mail: 1335568116@qq.com

*[通訊作者] 吳文旋(1979-)，貴州安順人，博士，教授，碩士生導(dǎo)師，主要從事反芻動物營養(yǎng)與飼料科學(xué)方面的教學(xué)、科研工作。E-mail: wwx3419@126.com

S811.6

A

1005-5228(2015)04-0035-05