姜建陽，遠德龍，朱紹偉，宋春陽*，于光輝，韓先杰（.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，山東青島6609；.滕州市畜牧獸醫(yī)局，山東滕州77500）

低蛋白日糧添加合成氨基酸對魯萊生長豬氮平衡和氨基酸消化率的影響

姜建陽1，遠德龍1，朱紹偉2，宋春陽1*，于光輝1，韓先杰1
（1.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，山東青島266109；2.滕州市畜牧獸醫(yī)局，山東滕州277500）

試驗旨在研究低蛋白日糧添加不同種類合成氨基酸對培育品種魯萊豬生長豬氮平衡及氨基酸消化率的影響。采用4×4拉丁方設(shè)計，選用平均體重為（35.00±1.05）kg的健康魯萊閹公豬4頭，回腸末端手術(shù)安裝簡單T型瘺管。對照組飼喂高蛋白質(zhì)水平（粗蛋白為16.50%，可消化賴氨酸為0.78%）日糧，3個試驗組分別飼喂添加賴氨酸+蘇氨酸+蛋氨酸、賴氨酸+蘇氨酸和賴氨酸+蛋氨酸的低蛋白質(zhì)水平（粗蛋白為13.50%，可消化賴氨酸為0.78%）日糧。結(jié)果表明：低蛋白添加3種合成氨基酸組糞氮排出量顯著低于其他各組（P＜0.05），尿氮排出量顯著低于高蛋白組（P＜0.05），與其他低蛋白組相比差異不顯著（P＞0.05），氮表觀消化率、氮沉積各組間差異均不顯著（P＞0.05）；低蛋白日糧添加3種合成氨基酸組總氨基酸消化率顯著高于其他各組（P＜0.05）。采用低蛋白（粗蛋白為13.50%）并同時添加適量合成氨基酸日糧飼喂魯萊豬，可以顯著降低糞氮和尿氮的排出，對氮利用率和回腸末端總氨基酸消化率影響不顯著。

魯萊豬；低蛋白日糧；氨基酸平衡；氮平衡

目前，規(guī)模化養(yǎng)豬場中約有60%～70%的氮以糞、尿的形式排出體外，對養(yǎng)殖場周邊環(huán)境造成污染［1］。為減輕養(yǎng)豬場的環(huán)境污染，減少養(yǎng)豬場氮的排放，前人進行了大量的研究［2-3］，一般而言，賴氨酸（Lys）、蛋氨酸（Met）和蘇氨酸（Thr）是豬最重要的3種限制性氨基酸，日糧粗蛋白水平降低3個百分點時3種氨基酸又極易缺乏。按照理想蛋白質(zhì)模式，引進品種豬或三元雜交豬通過添加適宜的合成氨基酸降低日糧的粗蛋白水平，并不影響豬的生長性能，還能節(jié)約有限的蛋白質(zhì)原料、降低豬糞氮污染［4］。

魯萊豬是利用我國優(yōu)良地方品種萊蕪豬和引進品種大約克夏豬，通過雜交建系、橫交固定、定向培育而成的優(yōu)質(zhì)黑豬新品種，具有我國地方豬種的種質(zhì)特性，其氨基酸需求模式是否與洋三元雜交豬一致，尚未見報道。通過前期試驗研究表明［5］，魯萊生長豬在粗蛋白為16.5%、可消化賴氨酸為0.78%時，飼養(yǎng)效果較佳，本試驗在此基礎(chǔ)上，參考NRC（1998）豬飼養(yǎng)標準，通過研究在低蛋白日糧中添加賴氨酸、蘇氨酸、蛋氨酸對魯萊生長豬氮平衡和回腸內(nèi)氨基酸表觀消化率的影響，探討魯萊豬這一地方品種豬氨基酸需求模式，為后續(xù)確定魯萊生長豬在低蛋白日糧下的適宜的理想蛋白模式提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗動物及日糧試驗選擇體重（35.00±1.05）kg的魯萊閹公豬4頭，手術(shù)安裝回腸末端簡單T型瘺管，按外科手術(shù)常規(guī)護理方法進行護理，每天用氧化鋅軟膏擦拭創(chuàng)口，防止傷口感染。高蛋白日糧組試驗日糧參照NRC（1998）豬飼養(yǎng)標準和魯萊豬地方飼養(yǎng)標準配制，在高蛋白日糧基礎(chǔ)上，低蛋白日糧組蛋白降低3個百分點并分別添加Lys+Thr、Lys+Met、Lys+Thr+Met。日糧配方與營養(yǎng)成分見表1。

1.2 試驗設(shè)計與飼養(yǎng)管理試驗分為4個處理組，采用4×4拉丁方設(shè)計。試驗期每期7 d，前4 d為預(yù)試期，后3 d為為正試期。單體代謝籠飼養(yǎng)于青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動單胃動物試驗基地，室內(nèi)溫度20～23℃。每天定量采食飼喂2次（08：00、17：00），自由飲水，試驗前進行驅(qū)蟲，每天觀察豬群健康狀況。

1.3 樣品采集及處理

1.3.1 飼料樣品的采集日糧配制前采集飼料原料樣品；配制后采集試驗日糧樣品。

表1 試驗日糧及營養(yǎng)成分（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3.2 糞尿樣的采集試驗正試期第1天08：00開始收集糞尿，持續(xù)3 d。稱量記錄每頭豬的采食量、尿樣體積和糞樣鮮重，取新鮮糞樣1 000 g、尿樣1 000 mL，按糞樣重的10%和尿樣體積的10%加入10%的硫酸固氮后，保存在-20℃冰箱中。試驗結(jié)束后將每頭豬正試期采集的糞樣和尿樣分別混合，將糞樣于65℃烘箱中烘干，混合、粉碎處理后取樣進行實驗室分析。

1.3.3 食糜樣的采集食糜的收集從第1次飼喂開始，直到第2次飼喂時結(jié)束。排出的食糜通過簡單T型瘺管收集到事先加入10 mL10%硫酸的封口袋中。每隔1～2 h收集食糜1次，采集的食糜樣品立即置于-20℃冰箱保存。經(jīng)冷凍干燥、粉碎后，存于樣品袋中待測。

1.3.4 血樣的制備在每期試驗結(jié)束的最后1 d，使用真空采血管前腔靜脈采血10 mL，3 000 r/min離心10 min分離血清、血漿，-20℃冰箱保存，備測。

1.4 檢測指標及測定方法血清尿素氮采用脲酶法進行測定；日糧和食糜中的氨基酸含量使用氨基酸自動分析儀（日立L-8800，日本）測定；日糧、糞樣和尿樣中氮含量測定方法參照GB/T 6432—1994飼料中粗蛋白測定方法測定，回腸末端氨基酸表觀消化率采用酸不溶灰分法測定，酸不溶灰分含量測定方法參照GB/T 23742—2009方法測定。

1.5 氮沉積（NR）、氮表觀利用率和消化率計算公式：

式中，NR表示氮沉積（g/d），NI表示食入氮（g/d），NF表示糞氮排泄量（g/d），NU表示尿氮排泄量（g/d）。1.6回腸末端氨基酸表觀消化率 計算公式［6］：氨基酸表觀消化率（%）=100-（C1×P2）/（C2×P1）×100式中，C1為飼料中鹽酸不溶灰分的含量（%），C2食糜中鹽酸不溶灰分的含量（%），P1飼料中氨基酸含量（%），P2食糜中氨基酸含量（%）。

1.7 統(tǒng)計分析試驗數(shù)據(jù)采用Excel 2007進行預(yù)處理，采用統(tǒng)計軟件SPSS 17.0的單因素方差分析（One-Way ANOVA）過程進行數(shù)據(jù)分析，用LSD法進行多重比較，統(tǒng)計顯著性水平為P＜0.05。結(jié)果均以平均值±標準差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 添加合成氨基酸對氮平衡和血清尿素氮（BUN）的影響由表2可見，低蛋白添加3種合成氨基酸組糞氮、尿氮最低，糞氮與高蛋白日糧組相比顯著降低了35%（P＜0.05），尿氮與高蛋白日糧組相比降低了28.93%（P＞0.05）；沉積氮以高蛋白日糧組最高，但與其他各組間差異不顯著（P＞0.05）；氮的表觀消化率和表觀利用率以低蛋白添加3種合成氨基酸組最好，血清尿素氮濃度也以其最低，但與其他各組相比差異均不顯著（P＞0.05）。

2.2 添加合成氨基酸對氨基酸消化率的影響由表3可以看出，低蛋白添加3種合成氨基酸組的賴氨酸、蘇氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、組氨酸、精氨酸回腸表觀消化率均略高于其他各組（P＞0.05）；總氨基酸消化率低蛋白添加3種合成氨基酸組顯著高于其他各組。

表2 日糧中添加氨基酸對氮平衡和血清尿素氮的影響

表3 魯萊豬回腸氨基酸表觀消化率%

3 討論

3.1 添加合成氨基酸對氮平衡和血清尿素氮的影響由試驗結(jié)果可以看出，與高蛋白日糧組相比，日糧蛋白含量降低3個百分點并適量添加3種合成氨基酸顯著降低了糞氮和尿氮的排出量，氮的表觀消化率和利用率雖然略有提高；在血清尿素氮上，低蛋白組BUN水平比高蛋白組顯著降低10.4%，該試驗結(jié)果與以往的諸多研究結(jié)果一致。Kerr等［7］報道，生長豬日糧中補充0.35%賴氨酸、0.16%蘇氨酸和0.06%色氨酸，可在蛋白質(zhì)水平16%的基礎(chǔ)上降低4個百分點，使尿氮排出減少47%，糞氮排出減少29.3%；Quiniou等［8］研究報道，初始體重為36 kg的豬日糧中蛋白質(zhì)降低4個百分點并添加合成賴氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸和色氨酸，總氮和尿氮的排泄量分別減少了50%和40%；Pfeiffer等［9］觀察到攝入的蛋白質(zhì)與尿氮排出之間存在很強的相關(guān)關(guān)系，指出蛋白質(zhì)供應(yīng)過量及氨基酸不平衡是導(dǎo)致大量尿氮排出和氮利用效率下降的一個重要原因，飼喂低蛋白質(zhì)水平日糧，糞氮排出也下降，不同蛋白質(zhì)水平日糧間氮的表觀消化率差異顯著。Gatel等［10］研究表明，僅通過補充賴氨酸，生長豬（44 kg體重）日糧中可節(jié)約蛋白質(zhì)1.3%，育肥豬（84 kg）日糧中可節(jié)約蛋白質(zhì)1.1%，額外補充平衡賴氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸和色氨酸可節(jié)約蛋白質(zhì)2.6%。王建明［11］和Le Bellego等［12］也有類似報道，這些與本試驗的研究結(jié)果相符。本試驗中低蛋白日糧組氮沉積有所降低，但與高蛋白組沒有達到差異顯著水平，梁福廣等［13］以可消化理想氨基酸模式配制日糧，結(jié)果表明氮沉積16%CP組顯著高于18%CP組，與本試驗結(jié)果不太一致，這可能是由于試驗所用日糧蛋白含量以及魯萊豬為培育品種豬不同所致。

3.2 添加合成氨基酸對氨基酸消化率的影響Figueroa等［14］在氨基酸需要量和氨基酸間的比例的研究中，用氮平衡的方法比用生長性能來確定更敏感、更準確，原因是生長性能是一個綜合指標，受到多種因素的影響。試驗結(jié)果顯示，在低蛋白日糧中添加合成氨基酸，尤其是添加3種合成賴氨酸、蘇氨酸、蛋氨酸組，賴氨酸、蘇氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、組氨酸、精氨酸的表觀消化率有所提高，這與氮平衡試驗結(jié)果完全一致。Brudevold等［15］報道，補充合成氨基酸可以使賴氨酸的表觀消化率顯著提高；王丹等［16］總結(jié)前人研究結(jié)果，認為對于任何一種實用型日糧，其表觀消化率往往被低估，因為在測定表觀消化率時使用的是低蛋白日糧，在低蛋白日糧水平下，內(nèi)源氨基酸的排出量在回腸排出氨基酸總量中所占比例很高。這與本試驗中低蛋白質(zhì)缺乏蛋氨酸或蘇氨酸的2個處理組中蛋氨酸和蘇氨酸的消化率沒有提高反而降低相符合。

4 結(jié)論

魯萊豬作為培育品種豬，其氨基酸需求模式與引進品種豬一致。本試驗條件下，采用低蛋白（粗蛋白為13.50%）并同時添加適量的賴氨酸、蘇氨酸和蛋氨酸可以顯著降低魯萊豬糞氮和尿氮的排出，對氮利用率和回腸末端總氨基酸消化率影響不顯著。

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Effects of Low Protein Diet Supplemented with Compound Amino Acids on Nitrogen Balance and Amino Acid Digestibility of Lulai Growing Pigs

JIANG Jian-yang1，YUAN De-long1，ZHU Shao-wei2，SONG Chun-yang1*，YU Guang-hui1，HAN Xian-jie1
（1.College of Animal Science and Technology，Qingdao Agricultural University，Shandong Qingdao 266109，China；2.Tengzhou Bureau of Animal Husbandry and Veterinary，Shandong Tengzhou 277500，China）

The experiment was conducted to study the effects of different kinds of synthesis amino acids adding in the low protein diet to nitrogen balance and amino acid digestibility of Lulai growing pigs.A total of 4 Lulai healthy growing barrows with an average initial body weight of（35.00±1.50）kg were used in a 4 x 4 Latin square designs. Simple T-cannula were installed on the terminal ileum.The level of high protein feed was added lysine，threonine and methionine with crude protein in 16.5%and digestible lysine in 0.78%.The lower in protein level was added lysine，threonine，lysine and methionine containing crude protein content 13.5%and digestible lysine 0.78%.The resultsshowed that the amount of fecal nitrogen excretion was significantly lower than that of other groups（P＜0.05），and urine nitrogen was significantly lower than that of the high protein group（P＜0.05），and showed no significant difference（P＞0.05）compared with other low protein group in the low protein group with three compound amino acid. Nitrogen apparent digestibility and nitrogen deposition were higher than other groups，but the differences between groups were not significant（P＞0.05）.The total amino acid digestibility of low protein adding three compound amino acid group was significantly higher than that of other groups（P＜0.05）.Low protein（crude protein 13.50%）adding synthetic amino acids diet fed Lulai pigs，cowld significantly reduce the excrerion of fecal nitrogen and urine nitrogen. But the utilization efficiency of nitrogen and total amino acid digestibility of the terminal ileum was not significant.

Lulai pigs；low protein diet；amino acid balance；nitrogen balance

S828.5

：A

：0258-7033（2015）19-0029-04

2014-11-04；

2014-11-29

山東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系生豬創(chuàng)新團隊資助（SDAIT-06-022-09）；山東省農(nóng)業(yè)良種工程（2011LZ 13-04）

姜建陽（1970-），男，山東榮成人，博士，副教授，從事動物營養(yǎng)與飼料科學(xué)教學(xué)科研研究等工作，E-mail：jeff226701@163.com

*通訊作者：宋春陽，教授，E-mail：songchunyang2006@163.com