華月琴

(常州市第七人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇常州213011)

一例B(A)血型患者的家系調(diào)查

華月琴

(常州市第七人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇常州213011)

目的對(duì)1例B(A)表型患者的家系進(jìn)行調(diào)查，了解該血型在家系中的傳遞情況。方法對(duì)患者家系中的5人分別進(jìn)行ABO正反血型鑒定、抗體篩選試驗(yàn)以及血型基因檢測(cè)。結(jié)果患者與患者的兒子為B(A)型，患者的姐姐和小妹妹為AB3型，患者的大妹妹為正常A型。結(jié)論在分子生物學(xué)還不能普及的醫(yī)院采用家系調(diào)查的方法，觀察弱抗原在家系中的傳遞情況，可推測(cè)弱抗原的性質(zhì)，對(duì)血清學(xué)診斷不明確的亞型標(biāo)本的鑒定具有一定幫助。

B(A)；家系;調(diào)查;血清學(xué)

B(A)血型是一種罕見的ABO亞型，其紅細(xì)胞上不僅存在B抗原，而且存在很弱的A抗原，血清中含有高度活性的B型糖基轉(zhuǎn)移酶，同時(shí)也有少量的A型糖基轉(zhuǎn)移酶[1]。筆者在做血型鑒定時(shí)檢出1例B(A)血型并進(jìn)行家系調(diào)查，現(xiàn)報(bào)道如下：

1 材料與方法

1.1 臨床病例患者，男性，58歲，2013年7月27日以冠心病、高血壓收治入院。血型鑒定時(shí)出現(xiàn)正反定型不一致，正定型AB型，反定型B型，經(jīng)血型血清學(xué)及分子生物學(xué)試驗(yàn)證實(shí)該患者血型為B(A)型，家系調(diào)查結(jié)果顯示患者兒子也為B(A)型。

1.2 試劑抗-A、抗-B、抗-H單克隆抗血清、抗-A1血清、ABO標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞、抗體篩選細(xì)胞、A2細(xì)胞均由上海血液生物醫(yī)藥有限公司提供；抗人球蛋白卡由美國強(qiáng)生公司提供。

1.3 方法血型鑒定、抗體篩選試驗(yàn)以及血型基因檢測(cè)按試劑說明書和文獻(xiàn)[2]進(jìn)行操作。

2 結(jié)果

2.1 ABO血型鑒定顯示A抗原較弱，B抗原很強(qiáng)，血清中有不規(guī)則抗A，紅細(xì)胞與抗-A1不反應(yīng)，此反應(yīng)格局可能為A×B或者B(A)，見表1。

表1 ABO血型鑒定

2.2 患者不規(guī)則抗體篩選試驗(yàn)抗體篩選試驗(yàn)結(jié)果陰性，排除ABO血型系統(tǒng)以外的不規(guī)則抗體的影響，驗(yàn)證血清中不規(guī)則抗A的存在。

2.3 患者血清和A2標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞反應(yīng)選擇抗-A+A2細(xì)胞作為陽性對(duì)照，抗-A1+A2細(xì)胞作為陰性對(duì)照，顯示患者血清與A2細(xì)胞反應(yīng)呈陽性結(jié)果，說明該抗體不同于ABO亞型中的不規(guī)則抗-A1，排除A×B，此點(diǎn)可區(qū)分A×B和B(A)，見表2。

表2 患者血清與A2標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞反應(yīng)

2.4 抗-H與患者紅細(xì)胞反應(yīng)選擇正常成人新鮮O型、B型、AB型紅細(xì)胞各1份(作為平行對(duì)照)以及患者紅細(xì)胞分別與抗-H反應(yīng)，顯示患者紅細(xì)胞與抗-H的凝集強(qiáng)度等同于O細(xì)胞，進(jìn)一步排除A× B，此點(diǎn)是區(qū)分B(A)與A×B非常重要的標(biāo)記，見表3。

表3 抗H與患者紅細(xì)胞反應(yīng)

2.5 家系調(diào)查結(jié)果患者與患者的兒子為B(A)型，患者的姐姐和小妹妹為AB3型，患者的大妹妹為正常A型，見表4。

表4 家系血型血清學(xué)及基因檢測(cè)結(jié)果

2.6 分子生物學(xué)試驗(yàn)通過PCR-REFP方法測(cè)得該患者基因型為BO，克隆測(cè)序證實(shí)為B(A)O2/O，其核苷酸序列B等位基因在正常B*101基礎(chǔ)上發(fā)生單堿基錯(cuò)義突變700C→G。

3 討論

正常A型、B型和AB型等位基因分別位于9號(hào)同源染色體的ABO位點(diǎn)上，分別從父方或母方遺傳得到。極少數(shù)人類個(gè)體的一條9號(hào)染色體上存在一個(gè)B(A)基因，它編碼的酶具有雙功能活性，可以同時(shí)催化A抗原和B抗原的合成，表現(xiàn)為AB型的特性，稱之為B(A)血型，是在1985年被發(fā)現(xiàn)的[3]，同cisAB的遺傳方式相似，是一種罕見的ABO亞型，其分子機(jī)理被認(rèn)為是遺傳學(xué)上的B型，在B基因基礎(chǔ)上發(fā)生錯(cuò)義突變，由于單堿基突變，變異的B基因具有編碼雙功能活性酶的能力，血清學(xué)除了表現(xiàn)為B抗原特異性外，還表現(xiàn)為少量A抗原特異性。血清學(xué)特點(diǎn)表現(xiàn)為較弱的A抗原和接近正常的B抗原特異性，血清中存在針對(duì)弱抗原產(chǎn)生的比較強(qiáng)的不規(guī)則抗A，與抗H反應(yīng)強(qiáng)度僅次于甚于接近與O型細(xì)胞[4]。血清學(xué)方法判斷為AB亞型，且其血清學(xué)初步鑒定結(jié)果和A×B亞型血清學(xué)格局相似，容易誤判為A×B，但可通過與抗-H以及A2細(xì)胞的反應(yīng)來區(qū)分，B(A)紅細(xì)胞同抗-H的凝集強(qiáng)度比較強(qiáng)，一般為3+～4+，而A×B與抗H的凝集強(qiáng)度較弱，一般為±～1+，此外B(A)血清常與A2細(xì)胞反應(yīng)，而A×B與A2細(xì)胞不反應(yīng)，這是區(qū)分兩者的兩個(gè)關(guān)鍵試驗(yàn)，最后血型的確認(rèn)仍需分子生物學(xué)驗(yàn)證，將血清學(xué)方法和DNA技術(shù)結(jié)合起來，相互補(bǔ)充。B(A)是從一個(gè)親本遺傳而來的，因此基因型是B (A)/O，表現(xiàn)型為AB型，帶有B(A)等位基因的個(gè)體，若與O型血的人(基因型O/O)生育，子女的血型可能表現(xiàn)為AB型或O型，而不像通常AB型血與O型血的父母只能生出A或B型血的子女。

本文中的患者為B(A)/O，其兒子也為B(A)/O，其姐姐和妹妹均攜帶B(A)基因，從這個(gè)家庭中可以看到B(A)等位基因在上下代傳遞的過程。國外已報(bào)道的B(A)等位基因有六種，國內(nèi)已報(bào)道的有B(A)O2、B (A)O4、B(A)O5、B(A)O6四種，其中以B(A)O2[5]和B (A)O4[6]多見。本文所發(fā)現(xiàn)的B(A)之前已有報(bào)道，屬B(A)*O2類，又稱B(A)700，核苷酸序列在B基因基礎(chǔ)上發(fā)生單堿基錯(cuò)義突變(C被G取代)，nt700位的核苷酸突變導(dǎo)致234位氨基酸的置換，變成Pro234Ala。

在本病例中，B(A)基因在家系中呈穩(wěn)定的遺傳趨勢(shì)，采用家系調(diào)查的方法，觀察弱抗原在家系中的傳遞情況，可推測(cè)弱抗原的性質(zhì)，對(duì)血清學(xué)診斷不明確的亞型標(biāo)本的鑒定具有一定幫助。此外，家系調(diào)查在分子生物學(xué)還不能普及的基層醫(yī)院有應(yīng)用價(jià)值。如果是亞型，在家系調(diào)查中應(yīng)該有相同的血型傳遞，否則，很有可能是疾病導(dǎo)致的抗原減弱，必要時(shí)進(jìn)行分子生物學(xué)鑒定。

[1]胡麗華.臨床輸血檢驗(yàn)[M].北京∶中國醫(yī)藥科技出版社,2004∶63-64.

[2]劉達(dá)莊.免疫血液學(xué)[M].上?！蒙虾？茖W(xué)技術(shù)出版社,2002∶194-222.

[3]Yamamoto F,McNeill PD,Yamamoto M,et al.Molecular genetic analysis of the ABO blood gurop system 3.A(X)and B(A)alleles [J].Vox Sang,1993,64∶171.

[4]杰夫·丹尼爾[英]編,朱自嚴(yán)譯.人類血型[M].北京∶科學(xué)出版社,2007∶45-46.

[5]Yu LC,Lee HL,Chan YS,et al.The molecular basis for the B(A)allele∶an amino acid alteration in the human histoblood group B a-1, 3-galactosyltransferase increase its intrinsic a-1,3-N-acetylgalactosamyl transferase activity[J].Biochem Biophys Res Commun, 1999,262(2)∶487.

[6]郭忠惠,向東,朱自嚴(yán),等.中國漢族人群檢出新的B(A)641T＞C等位基因[J].中國輸血雜志,2006,19(1)∶18-19.

Investigation on the family of one patient of B(A)phenotype.

HUA Yue-qin.Department of Clinical Laboratory,the Seventh People's Hospital of Changzhou,Changzhou 213011,Jiangsu,CHINA

ObjectiveTo investigate the family of one patient of B(A)phenotype in order to understand the transmission of the blood type in genealogy.MethodsThe four family members of the patient of B(A)phenotype all suffered ABO blood group identification,antibody detection,and blood type detection and genotype detection.ResultsThe patient and his son were found to be of B(A)phenotype,patient's elder sister and youngest sister are of AB3 phenotype,and the patient's younger sister is of A phenotype.ConclusionIn hospitals that molecular biology are not popularized,investigation of family members to observe the transmission of weak antigen can speculate the characters of weak antigen.It is of certain value for identifying subtypes specimens which can not be diagnosed by serology.

B(A);Family;Investigation;Serology

R457.1+1

A

1003—6350（2015）12—1784—02

2014-11-24)

華月琴。E-mail：1531028735@qq.com

doi∶10.3969/j.issn.1003-6350.2015.12.0638