韓進(jìn)輝

（吉林省蛟河市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，吉林蛟河 132500）

雞減蛋綜合征的現(xiàn)場(chǎng)診斷、實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)及防制

韓進(jìn)輝

（吉林省蛟河市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，吉林蛟河 132500）

雞減蛋綜合征是20世紀(jì)70年代后期發(fā)現(xiàn)的由減蛋綜合征病毒（EDSV）引起的世界性的商品蛋雞和母雞產(chǎn)蛋下降的病毒性疾病。其臨診特征為雞群產(chǎn)蛋突然下降，大量出現(xiàn)軟皮蛋和畸形蛋，蛋殼顏色變淺。該病在世界范圍內(nèi)都有流行和發(fā)生，給養(yǎng)雞業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。

雞減蛋綜合征；實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)；防制

1 現(xiàn)場(chǎng)診斷

（1）流行病學(xué)：各種年齡的雞對(duì)本病病毒都易感，但主要侵害26～32周齡雞，35周齡以上則較少發(fā)病，幼齡雞感染后不表現(xiàn)癥狀。鴨、鵝是自然宿主。病毒經(jīng)受精卵垂直傳播是本病病毒的主要傳播方式。雞與雞之間接觸以及被病毒污染的飲水、飼料和器具，帶毒的鴨、鵝和某些野禽，也起到傳播的作用，但病毒水平傳播的速度較慢，且有時(shí)呈間斷性。雞感染本病的特征，當(dāng)病毒侵入雞體后，在性成熟前，幼雞不表現(xiàn)致病性，在產(chǎn)蛋初期由于應(yīng)激反應(yīng)致使病毒活化而使產(chǎn)蛋雞發(fā)病。

（2）臨診癥狀：病初有色蛋殼的顏色消褪，隨后可能生薄殼、軟殼和無殼蛋。發(fā)病雞群產(chǎn)蛋量下降通常突然發(fā)生于產(chǎn)蛋高峰期前后，下降幅度可達(dá)20～50%，持續(xù)期為4～10周左右。

2 實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)

雞產(chǎn)蛋下降綜合征檢疫常用的檢驗(yàn)方去有病毒分離鑒定、血凝與血凝抑制試驗(yàn)、血清中和試驗(yàn)、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)等。

（1）病毒分離鑒定：①樣品采集及處理。取減產(chǎn)母雞的輸卵管、子宮、卵巢，或咽喉部、泄殖腔棉拭子，或劣質(zhì)蛋的蛋清等，冰凍保存。全測(cè)時(shí)將病料加2～5倍的pH7.2、0.1mol/L磷酸鹽緩沖液，研磨制成懸液，凍融2～3次，以3000轉(zhuǎn)/min離心20min，取上清液，按500～2000單位（μg）/ml加入青、鏈霉素，37℃處理30min。泄殖腔拭子浸入含有青、鏈霉素沖液中充分?jǐn)D壓后取出拭子，將溶液凍融2～3次，離心取上清液。蛋清則加入適量的含有青、鏈霉素的磷酸鹽緩沖液（以可暢通吸入注射器即可），37℃處理30min。

（2）病毒分離：取處理后的樣品上清液0.2ml，經(jīng)絨毛尿囊腔接種10日齡左右的無減蛋綜合征抗體的健康鴨胚，每份病料接種4枚，培養(yǎng)48～120h，收取鴨胚（棄去48h以內(nèi)死亡的鴨胚），無菌收集尿囊液，置-20℃保存，供盲傳或病毒鑒定用。

（3）病毒鑒定：采用血凝與血凝抑制試驗(yàn)方法鑒定病毒。如果被檢尿囊液能凝集雞血細(xì)胞，且這種血凝活性又能夠被標(biāo)準(zhǔn)陽性血清抑制，則分離物含有本病病毒。

（2）血凝與血凝抑制試驗(yàn)：本試驗(yàn)用于病毒鑒定和血清抗體測(cè)定。

①器材準(zhǔn)備：96孔U型微量板、微型振蕩器、50μl移液器?？乖?、陽性和陰性標(biāo)準(zhǔn)血清由指定單位提供。1%雞紅細(xì)胞懸液：采集成年雞血，用20倍體積的生理鹽水洗滌3～4次，每次以2000轉(zhuǎn)/min離心3～4min，反復(fù)吸棄上層血漿及白細(xì)胞。最后一次離心5min，棄去上清液，加入生理鹽水制成1%的紅細(xì)胞懸液。②血凝試驗(yàn)（抗原血凝效價(jià)測(cè)定）在血凝板上每孔加入50μl生理鹽水，取抗原或被檢物尿囊液（病毒鑒定）加入每排第一孔，每孔50μl，混合后取50μl加入第二孔，從左至右依次倍比稀釋至第十一孔，從第十一孔中吸50μl棄去，第十二孔為紅細(xì)胞對(duì)照。每孔加入1%雞紅細(xì)胞懸液50μl，置微量振蕩器震蕩1min，放置室溫下（18～20℃）作用30min，觀察血凝圖像。每排第十二孔紅細(xì)胞對(duì)照應(yīng)不出現(xiàn)凝集現(xiàn)象。以紅細(xì)胞出現(xiàn)完全凝集的抗原最大稀釋度為該抗原的血凝價(jià)。測(cè)定抗原的血凝價(jià)時(shí)應(yīng)并列做四排，取四排平均值確定。③血凝抑制試驗(yàn)：A.計(jì)算出含4個(gè)血凝單位的抗原濃度：抗原稀釋倍數(shù)=血凝滴度（血凝價(jià)）/4。B.在微量板上每排第一孔加入生理鹽水50μl，第二孔加入濃度為8個(gè)血凝單位的抗原50μl；第三至十一孔加入濃度為4個(gè)血凝單位的抗原50μl。C.每排第一孔分別加被檢血清50μl，混勻后吸取50μl加入第二孔，依次倍比稀釋至第十一孔，混勻后棄去50μl。D.每孔加入1%紅細(xì)胞懸液50μl，振蕩后室溫靜置10min，然后進(jìn)行結(jié)果判定。④結(jié)果判定：當(dāng)被檢血清孔和紅細(xì)胞對(duì)照孔的紅細(xì)胞全部沉于孔底，陰性血清對(duì)照孔凝集紅細(xì)胞，抗原對(duì)照孔出現(xiàn)凝集現(xiàn)象，陽性血清對(duì)照孔抑制滴度≥1：16，抗原對(duì)照孔出現(xiàn)紅細(xì)胞凝集時(shí)，本試驗(yàn)成立。以完全抑制紅細(xì)胞凝集的最大稀釋度，為該血清的血凝抑制抗體滴度。被檢血清抗體滴度≥1：16，判為陽性。

3 防制措施

本病是一種腺病毒，可經(jīng)種蛋垂直傳播，用0.5%的福爾馬林處理即喪失感染性?？刂票静〉挠行Х椒ㄊ且呙缃臃N。疫苗有雞減蛋綜合征油乳劑滅活苗、雞減蛋綜合征蜂膠苗等，一般于雞產(chǎn)蛋前2～4周注射，劑量按使用說明。治療可采用利巴韋林原粉飲水，1g加水10kg，連用3～5d。配合使用復(fù)方增蛋靈，每袋250g拌料80kg，連用7～10d。同時(shí)飼料中應(yīng)添加適量的蛋白質(zhì)和微量元素，提高雞群的抗病能力，可以防止其他感染發(fā)生。重癥酌情加量，預(yù)防劑量減半。

中藥治療：黃連、黃柏、黃芩、金銀花、大青葉、板蘭根、甘草各50g，黃藥子、白藥子各30g，混合加水5000ml，煎二次，合并后加白糖1000g，可供500只雞飲用。一日一劑，連用3～5d。注意，喂前要禁水、禁食半天，這樣可提高治療效果。

預(yù)防措施，應(yīng)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理及衛(wèi)生管理等措施。加強(qiáng)種雞和產(chǎn)蛋雞的免疫，配合中草藥進(jìn)行預(yù)防，對(duì)肉雞采用“全進(jìn)全出的”的養(yǎng)殖方法，空舍后進(jìn)行清理并徹底消毒，空置一段時(shí)間后再進(jìn)雞。

[1] 胡青海，謝三星.雞減蛋綜合癥實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)研究進(jìn)展[J].中國(guó)動(dòng)物檢疫，1994，（4）：26-28.

韓進(jìn)輝（1977—），男，大學(xué)，助理獸醫(yī)師，主要從事工作動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督工作。