陳龍勝，許舒雯，彭麗華

(1.安徽省科學(xué)技術(shù)研究院，安徽合肥230031;2.安徽省應(yīng)用技術(shù)研究院，安徽合肥230031)

南瓜又稱番瓜、倭瓜、金瓜等，系葫蘆科南瓜屬中1年生蔓性普通而又古老的蔬菜種類，是人類最早栽培的作物之一。南瓜是世界上形態(tài)變異最大，色彩最為豐富的蔬菜。南瓜中富含糖類、β-胡蘿卜素、氨基酸、蛋白質(zhì)、維生素和微量元素，現(xiàn)代研究表明，南瓜含有降脂、降糖、防癌等多種功能性因子［1］。南瓜加工產(chǎn)品種類眾多，國內(nèi)外已開發(fā)出的產(chǎn)品主要包括南瓜汁、南瓜粉、南瓜茶、南瓜汁、南瓜糊等數(shù)十種南瓜食品。南瓜籽所含的高含量亞油酸［2］，能夠有效地降低血糖，是糖尿病患者的良藥。南瓜中含有豐富的南瓜多糖，南瓜多糖能提高機體免疫功能，促進細(xì)胞因子生成，直接參與降血糖、降血脂等有關(guān)活動，對預(yù)防糖尿病有明顯功效［3－6］。因此，對南瓜中多糖進行分析研究有一定的實際意義。

我國南瓜資源豐富，種類繁多，品種不同，理化性質(zhì)會有一定的差異性［7］。筆者對南瓜中的主要成分多糖進行分析研究，比較不同品種南瓜中多糖含量差異，篩選出多糖含量較高的品種，為南瓜多糖的進一步開發(fā)利用奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料 供試原料南瓜，由安徽江淮園藝提供的34個品種新鮮成熟南瓜。主要試劑:葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品、蒽酮、濃硫酸、蒸餾水、無水乙醇，均為分析純試劑。主要儀器設(shè)備:真空干燥箱，高速粉碎機，恒溫水浴鍋，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，722G可見分光光度計，電子分析天平。

1.2 方法

1.2.1 南瓜多糖樣品溶液制備。將各品種待測南瓜洗凈后去皮、切片，放置于60℃真空干燥箱中干燥24 h。將干燥后的南瓜片用高速粉碎機粉碎處理，過20目篩得到干燥南瓜粉。精密稱取各品種干燥南瓜粉0.25 g，加入150 ml無水乙醇在80℃恒溫水浴鍋中回流2 h，過濾后殘渣用無水乙醇洗滌，回收乙醇。將瀝干后的南瓜粉轉(zhuǎn)移至燒瓶中，加入100 ml蒸餾水在沸水浴中提取2 h，過濾后取濾液。重復(fù)一次后將濾液合并，轉(zhuǎn)移至250 ml容量瓶中，用蒸餾水定容后即得到待測多糖溶液。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制。準(zhǔn)確配制0.332 mg/ml葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液以及0.2%蒽酮－硫酸溶液(現(xiàn)配現(xiàn)用)。精密量取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 ml分別加入 10 ml具塞刻度管中，加入蒸餾水至2.0 ml刻度處，搖勻。在冰水浴中緩慢加入0.2%蒽酮－硫酸溶液至10 ml刻度處，放冷后置沸水浴中保溫10 min。取出后立即置冰水浴中靜置10 min。以蒸餾水為空白，在波長582 nm處用可見分光光度計測定吸光度。以葡萄糖含量為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.3 測定方法。采用蒽酮－硫酸比色法［8］測定待測液中南瓜多糖含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線 根據(jù)“1.2.2”的方法，以葡萄糖含量為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(圖1)，經(jīng)線性回歸處理得到回歸方程:Y=0.003 6X+0.049 4，R2=0.997 5。

圖1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.2 方法學(xué)驗證

2.2.1 精密度試驗。精密量取葡糖糖標(biāo)準(zhǔn)溶液和南瓜品種香-1的樣品溶液各5份，葡萄糖溶液每份0.2 ml，樣品溶液每份2.0 ml，按照“1.2.2”項下方法操作顯色，測定吸光度。結(jié)果組內(nèi)RSD分別為1.32%和1.35%(n=5)，均小于5%，符合分析要求。

2.2.2 穩(wěn)定性試驗。取南瓜品種香-1的樣品溶液2.0 ml，經(jīng)過“1.2.2”項下操作顯色后，從0 h 開始每隔0.5 h 測定一次吸光度，連續(xù)測定4次，結(jié)果RSD=2.24%(n=4)，表明樣品溶液在2 h內(nèi)穩(wěn)定性良好，在該段時間內(nèi)完成測定結(jié)果符合要求。

2.2.3 加樣回收試驗。精密量取南瓜品種香-1樣品溶液1.0 ml，分別加入 0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 ml葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，用蒸餾水均定容至2 ml。按照“1.2.2”項操作方法顯色后測定吸光度，計算加樣回收率。由表1可見，加樣回收率在98%～102%范圍內(nèi)波動，均接近于100%，平均值為100.41%，RSD=1.51%。

表1 加樣回收率試驗結(jié)果

2.3 樣品溶液測定 分別取各待測溶液2.0 ml于10 ml具塞刻度管中按照“1.2.2”項中操作方法在波長582 nm處測定吸光度，以蒸餾水作為空白。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程以及取樣量計算南瓜中多糖含量，測定結(jié)果見表2。

3 討論

南瓜多糖是一種水溶性雜多糖，熱水浸提法簡單實用、提取率高，故該試驗選用熱水浸提法進行樣品溶液的制備。因測定方法為蒽酮－硫酸比色法，南瓜中色素含量較多，直

表2 不同品種南瓜中多糖含量 mg/g

接采用水提法制備多糖溶液，其中的色素對多糖測定會有干擾。所以先采用無水乙醇提取然后再用水提法制備多糖溶液，以減少色素對于測定結(jié)果的影響。該試驗采用較成熟的蒽酮－硫酸比色法進行測定，顯色劑采用常見的蒽酮－硫酸，以保證測定結(jié)果準(zhǔn)確可靠，可重復(fù)性和可驗證性強。

該試驗結(jié)果表明，不同品種的南瓜之間其多糖含量差異性較大。其中中國南瓜♂的多糖含量最高，達(dá)到74.11 mg/g;JHX-20的多糖含量最低，只有13.42 mg/g。通過不同品種中多糖含量的比較，可篩選出多糖含量最高的中國南瓜♂作為多糖提取工藝研究的材料。試驗結(jié)果體現(xiàn)出了品種對于南瓜品質(zhì)的影響，為南瓜多糖的開發(fā)利用提供了依據(jù)，也為新品種的開發(fā)和培育提供參考。有關(guān)多糖的生理活性以及藥理作用還需進行更深一步研究。

［1］盧穎，王永勤，任智捷.南瓜功能成分研究的進展及在醫(yī)藥領(lǐng)域中的應(yīng)用［J］.食品與藥品，2005，7(7):29 －32.

［2］孫欣，徐雅琴，崔崇士.南瓜籽油的化學(xué)組成及開發(fā)利用［J］.中國糧油學(xué)報，2008，23(2):124－126.

［3］刁文超，吳昊，楊紹蘭，等.南瓜多糖的分離、純化及抗氧化活性研究［J］.中國食品學(xué)報，2012(11):24 －31.

［4］游見明，李光輝.南瓜多糖的提取工藝研究［J］.現(xiàn)代食品科技，2005，21(2):107－108.

［5］KO?T'áLOVá Z，HROMáDKOVá Z，EBRINGEROVá A.Structural diversity of pectins isolated from the Styrian oil-pumpkin(Cucurbita pepo var.styriaca)fruit［J］.Carbohydrate Polym，2013，93(1):163 －171.

［6］SONG Y，YANG Y，ZHANG Y，et al.Effect of acetylation on antioxidant and cytoprotective activity of polysaccharides isolated from pumpkin(Cucurbita pepo，lady godiva)［J］.Carbohydr Polym，2013，98(1):686 －691.

［7］趙婧，袁馳，周春麗，等.南瓜多糖降血糖作用研究進展［J］.食品研究與開發(fā)，2014(7):108 －110.

［8］王黎明，夏文水.蒽酮－硫酸法測定茶多糖含量的研究［J］.食品科學(xué)，2005(7):185－188.