常亞飛，黃淑萍，劉京鑫

(長(zhǎng)安大學(xué) 環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院 化工系，陜西 西安 710054)

洋蔥(Onion)又名球蔥、圓蔥、玉蔥、蔥頭，屬百合科蔥屬，為二年生草本植物［1］，在我國(guó)分布很廣，2006 年我國(guó)洋蔥的種植面積達(dá)到90.1 萬公頃，洋蔥的干產(chǎn)量達(dá)到1 904.7 萬t［2］，是目前我國(guó)主栽蔬菜之一。

作為天然的食品和保健原料，洋蔥中含有很少量的精油物質(zhì)，主要是各種含硫化合物［3-4］，約0.05%，雖然量很少，但卻構(gòu)成了洋蔥特有的風(fēng)味和催淚作用。洋蔥還含有少量的類黃酮化合物［5］、各種苯丙素酚類化合物［6］、甾體皂苷類化合物［7-8］、含氮化合物、前列腺素類及其它成分，這類化合物大多數(shù)具有顯著的生理藥理活性，在營(yíng)養(yǎng)保健和預(yù)防、治療慢性病等方面具有多種功效［9-10］。隨著人們對(duì)自身保健意識(shí)的增強(qiáng)，對(duì)洋蔥生理活性的研究成為了焦點(diǎn)。

據(jù)悉，國(guó)外對(duì)洋蔥的研究主要集中在日本、印度、德國(guó)和美國(guó)等國(guó)家，但由于洋蔥的特有氣味，在臨床試驗(yàn)時(shí)往往被西方國(guó)家禁止使用。隨著中草藥市場(chǎng)的國(guó)際化，許多中草藥將走向國(guó)際藥品市場(chǎng)，因此對(duì)洋蔥抑菌性的研究將會(huì)為降血糖、降血脂［11］、抗血栓、預(yù)防癌癥、維護(hù)心血管健康、降低膽固醇、抗氧化、防止老化、預(yù)防感冒、幫助消化、殺菌等［12-13］天然藥物的開發(fā)利用提供新的線索。目前，國(guó)內(nèi)對(duì)洋蔥的研究較少，主要集中于含硫化合物研究，而抑菌、抗菌等作用研究還有待進(jìn)一步發(fā)展。本研究采用乙醇提取紅皮洋蔥，其提取物再以石油醚、乙酸乙酯和正丁醇分段萃取，通過進(jìn)行各段萃取物對(duì)土壤細(xì)菌、真菌及放線菌影響的分析，研究探討紅皮洋蔥的抑菌活性［14］，以期為開發(fā)天然、安全的功能性食品及提升紅皮洋蔥的藥用價(jià)值提供數(shù)據(jù)支持。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 材料與儀器

新鮮紅皮洋蔥2 個(gè)，購(gòu)于西安市翠華路菜市場(chǎng)，并將去皮、洗凈、烘干脫水、粉碎備用;無水乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、牛肉膏、蛋白胨、KH2PO4MgSO4·7H2O、葡萄糖、氯化鈉、KNO3、FeSO4·7H2O、K2HPO4、淀粉、孟加拉紅(Rose Bebgal)、鉻酸鉀、乳酸等均為分析純;卡拉膠，工業(yè)品。

RE-52A 型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀;KDM 型調(diào)溫電熱套;DHP120 型恒溫培養(yǎng)箱;SHZ-82 型恒溫振蕩器;YX-280 型高壓滅菌鍋;CS102-2 型電熱干燥箱;BS224S電子天平。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 洋蔥提取物的制備 以料液比1∶5，采用70%的乙醇提取50 g 脫水干紅皮洋蔥3 次，每次1 h，過濾、合并3 次濾液。濾液減壓濃縮得浸膏，浸膏加水分散后依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，萃取液分別用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮蒸發(fā)，最后分別用蒸餾水定容至50 mL，經(jīng)高壓濕熱滅菌后，置冰箱待用。

1.2.2 菌懸液的制備 采用多點(diǎn)法于雁塔校園的草坪上取土樣500 g，過2 mm 篩，并測(cè)定其含水量。準(zhǔn)確稱取該土樣2 g，在超凈工作臺(tái)上，將其裝入含有9 mL 蒸餾水和7 ～8 顆玻璃珠的50 mL 錐形瓶里(錐形瓶、蒸餾水及玻璃珠事先已滅菌)，用滅過菌的紗布將錐形瓶瓶口包好，置于搖床上振蕩10 min得土壤懸液原液，并按照一定的梯度將其稀釋至所需濃度即可用于接種。

1.2.3 洋蔥不同溶劑萃取物抑菌活性研究

1.2.3.1 培養(yǎng)基的制備 細(xì)菌;真菌;放線菌。

1.2.3.2 抑菌活性測(cè)定 在無菌實(shí)驗(yàn)臺(tái)上將合適稀釋梯度的土壤稀釋懸液1 mL 和1 mL 不同溶劑萃取液置于培養(yǎng)皿中，再倒入適量的培養(yǎng)基并迅速混合均勻，每組設(shè)3 個(gè)重復(fù)，并做無提取物的土壤空白對(duì)照組。將培養(yǎng)皿置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)研究的細(xì)菌、真菌、放線菌都來自土壤懸液經(jīng)過不同菌種的選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)，其中細(xì)菌采用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基［15］，于37 ℃下培養(yǎng)3 d 后計(jì)數(shù);真菌采用馬丁氏(Martin)培養(yǎng)基［16］于28 ℃下培養(yǎng)3 d 后計(jì)數(shù)，放線菌采用改良高氏一號(hào)培養(yǎng)基［17］于28 ℃下培養(yǎng)5 d 后計(jì)數(shù)。

1.4 數(shù)據(jù)處理

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均為3 個(gè)平行的平均值，采用SPSS15.0 結(jié)合Excel 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。

2 結(jié)果與討論

2.1 紅皮洋蔥石油醚萃取物抑菌活性

紅皮洋蔥石油醚萃取物抑菌活性，見圖1。

圖1 紅皮洋蔥石油醚萃取物抑菌活性Fig.1 Antibacterial activity of petroleum ether extract from red onion

由圖1 可知，紅皮洋蔥的石油醚萃取物無論是對(duì)土壤細(xì)菌、真菌還是放線菌抑制性都極顯著(p ＜0.01)，且對(duì)土壤放線菌抑制性最強(qiáng)，其抑制率達(dá)到51.1%，其次為細(xì)菌，抑制率為47.3%，對(duì)土壤真菌抑制率為40.0%。

2.2 紅皮洋蔥乙酸乙酯萃取物抑菌活性

紅皮洋蔥乙酸乙酯萃取物抑菌活性，見圖2。

圖2 紅皮洋蔥乙酸乙酯萃取物抑菌活性Fig.2 Antibacterial activity of ethyl acetate extract from red onion

由圖2 可知，紅皮洋蔥的乙酸乙酯萃取物對(duì)土壤細(xì)菌、真菌和放線菌抑制性也極顯著(p ＜0.01)，且對(duì)不同的菌體抑菌率也不相同，對(duì)土壤細(xì)菌抑制性最強(qiáng)，其抑菌率為75.1%，對(duì)真菌抑制率為71.1%，對(duì)放線菌抑制率64.8%。

2.3 紅皮洋蔥正丁醇萃取物抑菌活性

紅皮洋蔥正丁醇萃取物抑菌活性，見圖2。

圖3 紅皮洋蔥正丁醇萃取物抑菌活性Fig.3 Antibacterial activity of n-butanol extract from red onion

由圖3 可知，紅皮洋蔥正丁醇萃取物對(duì)土壤細(xì)菌、真菌和放線菌抑制性極顯著(p ＜0.01)，且對(duì)真菌抑制率最高，為77.3%，對(duì)細(xì)菌抑制率為73.7%，對(duì)放線菌抑制率為64.6%。

2.4 紅皮洋蔥不同萃取物抑菌活性比較

紅皮洋蔥不同萃取物抑菌活性比較，見表1。

表1 紅皮洋蔥不同萃取物抑菌活性比較Table 1 Antibacterial activity of different extracts from red onion

由表1 可知，紅皮洋蔥乙酸乙酯和正丁醇萃取物對(duì)土壤微生物的抑制性顯著(p ＜0.01)高于石油醚萃取物，且乙酸乙酯萃取物對(duì)土壤細(xì)菌和放線菌抑制率最高，對(duì)真菌抑制率最高的是正丁醇萃取物;這可能與不同極性溶劑的萃取物成分不同有關(guān)，其中石油醚部分極性最低，可能主要是洋蔥中的脂溶性成分，而微生物對(duì)脂類具有一定的利用能力，故這部分表現(xiàn)出較低的抑菌能力;隨著萃取溶劑極性的增加，乙酸乙酯部分活性成分種類和含量較石油醚部分增加，這部分可能主要是一些酚酸類、黃酮類等物質(zhì)，而這部分物質(zhì)能被微生物利用的種類不多，對(duì)微生物主要起化感作用，因此，表現(xiàn)出了極強(qiáng)的抑菌性;同樣，正丁醇萃取部分的極性最大，主要成分可能會(huì)有一些黃酮類、生物堿類、香豆素類等化合物，這些化合物均對(duì)微生物有明顯的抑制性，因此，紅皮洋蔥的正丁醇萃取物亦表現(xiàn)出了明顯的抑制土壤微生物活性。

3 結(jié)論

(1)紅皮洋蔥不同萃取物對(duì)土壤微生物的抑制性不同，其中石油醚萃取物抑菌性較乙酸乙酯和正丁醇萃取物低。

(2)對(duì)土壤放線菌抑制率最高的是乙酸乙酯萃取物，對(duì)真菌抑制率最高的是正丁醇萃取物，但乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物對(duì)土壤真菌和放線菌抑制率差異不顯著。

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