劉育清 顧 輝 方國斌 周 揚 劉全科

（湖北省農藥檢定管理所 武漢 430070）

1 前言

百草枯（英文名paraquat）屬滅生性除草劑,我省沙隆達股份有限公司和仙隆化工股份有限公司是該產品母藥和水劑出口的定點生產企業(yè)。該產品極性較強,極易溶于水,幾乎不溶于大多數有機溶劑，在中性和酸性介質中穩(wěn)定，在堿性介質中迅速水解，其水溶液在紫外光照射下發(fā)生光分解。雖然現有國標中已有百草枯的高效液相色譜(HPLC)的定性定量分析方法，但在實際操作中存在使用試劑昂貴、不易購買且色譜峰存在拖尾現象等問題，我們通過多次試驗用KH2PO4緩沖溶液（pH=1.9）作為流動相，采用耐水性強的C18反相柱，在保留值的重現、柱效和色譜峰的對稱性各方面都得到較好的效果。該方法線性關系好，準確度高，結果精密度好，操作簡便易行，節(jié)約分析成本，適于企業(yè)的生產質量控制。

2 實驗部分

2.1 儀器與試劑

Waters515/996PDA高效液相色譜儀，帶化學工作站；

百草枯標樣：已知百草枯二氯鹽的質量分數99.2%。使用前于 105℃烘 2h。（農業(yè)部農藥檢定所提供）；

甲醇：色譜純；

磷酸二氫鉀：分析純。

2.2 色譜操作條件

色譜柱：AQ C18，粒徑5 m，250mm×4.6mm（id）；

流動相：0.74g磷酸二氫鉀用840mL水溶解，再加160mL甲醇，混勻，用磷酸調至pH1.9，并經0.45 m的濾膜過濾；

流速：1.0mL/min；

檢測波長290nm；

進樣量：10uL；

保留時間：百草枯約2.6min。

2.3 測定步操

標樣溶液的配制：稱取百草枯二氯鹽標樣0.06g（精確至0.0002g）于50mL容量瓶中，用流動相溶解稀釋至刻度，搖勻備用。

試樣溶液的配制：稱取約含百草枯陽離子0.04g的試樣（精確至0.0002g）于50mL容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻。用孔徑0.45 m的有機相針式濾器過濾備用。

測定：在上述色譜條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數針標樣溶液，待相鄰兩針百草枯陽離子的峰面積響應值變化<1.5%時，按照標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的順序進樣測定。典型液相色譜圖如下：

2.4 計算

將測得的兩針試樣溶液與試樣前后兩針標樣溶液中百草枯陽離子的峰面積分別進行平均，試樣中，有效成分百草枯陽離子的質量分數x（%）按下式計算：

3 結果與討論

3.1 流動相的選擇

采用國標的分析方法，調整流動相中庚磺酸鈉的用量，色譜峰拖尾現象有一定的改善。但為了更好的優(yōu)化色譜峰，結合我們工作實際，我們嘗試用磷酸二氫鉀緩沖溶液做流動相進行測定，使用不同用量的磷酸二氫鉀與調整不同的pH的流動相進樣試驗后，通過峰型比較，發(fā)現用0.74g磷酸二氫鉀加840ml水溶解，再加160ml甲醇，用磷酸調pH=1.9的緩沖溶液做流動相，效果最好。

3.2 分析方法的線性相關性測定（表1）

表1 分析方法的線性相關性試驗數據

稱取百草枯二氯鹽標樣0.2g（精確至0.0002g）于100ml容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻。用移液管分別移取標準溶液5.00ml、10.00ml、15.00ml、20.00ml、25.00ml于 5 個 25ml容量瓶中，分別用流動相稀釋至刻度，配成5種不同濃度的溶液。按前述規(guī)定的色譜條件測定，以質量濃度為橫坐標，以其峰面積為縱坐標作圖。其線性方程為：Y=1290.9X+7491.9，r=0.9998。

3.3 分析方法精密度的測定（表2）

表2 分析方法的精密度試驗數據

在上述色譜條件下，對同一試樣進行5次平行測定。檢測結果經統計，該方法的標準偏差、變異系數分別為0.069和0.23%。

3.4 分析方法準確度的測定（表3）

表3 分析方法的準確度試驗數據

稱取已知質量分數的試樣5份，加入一定量的標樣，測定其回收率，本方法測定百草枯的回收率為98.91%～100.87%。

3.5 采用國標分析測定與本方法測定結果的比較（表 4）

表4 分析方法的測定結果比較

對同一百草枯母液試樣，分別采用國標方法和本方法進行分析測定，測定結果表明，本方法的測定結果與采用國標測定的結果一致。

4 結論

試驗結果表明，該方法具有分離效果好，準確度與精密度高，線性范圍較寬，操作簡便、分析成本低等特點，符合定量要求，適于企業(yè)的生產質量控制。