亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        HPLC法測定蛹蟲草中蟲草素的研究

        2015-03-25 00:59:54何巍繆奇劉君四川理工學(xué)院四川自貢643000
        化工管理 2015年21期
        關(guān)鍵詞:蟲草腺苷色譜法

        何巍 繆奇 劉君(四川理工學(xué)院,四川 自貢 643000)

        HPLC法測定蛹蟲草中蟲草素的研究

        何巍 繆奇 劉君(四川理工學(xué)院,四川 自貢 643000)

        本文采用超聲波法提取蛹蟲草子實(shí)體中的蟲草素,并利用高效液相色譜法測定蟲草素。當(dāng)選擇ZORBAX Extend-C18為色譜柱,水-甲醇(95:5)為流動(dòng)相,流速1.00mL/min,檢測波長260nm,進(jìn)樣量10μL作為色譜條件時(shí),蟲草素在10-1000μg/mL范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系(y=3×107-41890,R= 0.9999),檢測限:0.2μg/mL,回收率:102.91%-105.75%,RSD: 2.2616%。

        蛹蟲草子實(shí)體;蟲草素;高效液相色譜法

        蛹蟲草又稱北蟲草與冬蟲夏草同屬異種,主要來源于人工培養(yǎng)[1-2]。Yoo、Chor等人發(fā)現(xiàn)蛹蟲草中的活性成分對人黑色素瘤B16細(xì)胞、人白血病HL-60細(xì)胞、喉癌細(xì)胞具有較好抑制效果,且部分作用優(yōu)于冬蟲夏草[3-4]。蛹蟲草子實(shí)體已廣泛用于蟲草類保健品中。目前檢測蟲草素的方法主要有薄層色譜法[5]、紫外分光光度法及高效液相色譜法。蛹蟲草子實(shí)體中蟲草素含量較低,主要檢測方法為用于微量檢測的高效液相色譜法。

        1 實(shí)驗(yàn)部分

        1.1 儀器與試劑

        蛹蟲草子實(shí)體;日立L-2000高效液相色譜儀;GBC Cintra-4040紫外-可見分光光度計(jì);AS-5150B超聲波清洗器;甲醇為色譜純;水為超純水;乙醇、甲苯為分析純;蟲草素(中國藥品生物制品鑒定所)。

        1.2 色譜條件

        色譜柱:ZORBAX Extend-C18柱(Analytical 4.6×250nm 5-Micron 80A);柱溫:35℃;流速:1.00mL/min;流動(dòng)相:水:甲醇(95: 5);進(jìn)樣量:10μL;檢測波長:260nm。采用峰面積外標(biāo)法定量。

        1.3 樣品處理

        取冷凍后的蛹蟲草,取出粉碎,過篩,脫脂,恒溫干燥后備用。準(zhǔn)確稱取樣品10g于100mL錐形瓶中,加入適量甲苯-乙醇混合液,放入超聲振蕩器中,震蕩1h,取提取液除去一些含量較高的多糖、蛋白質(zhì)等雜質(zhì),濃縮成浸膏,配成50%的甲醇溶液,定容至10mL,過0.45μL有機(jī)微孔濾膜后供色譜分析用。

        2 結(jié)果與討論

        2.1 檢測波長的選擇

        對蟲草素標(biāo)準(zhǔn)品200-400nm波長范圍內(nèi)進(jìn)行紫外掃描,結(jié)果表明蟲草素在260nm有最大吸收,故選擇260nm作為檢測波長,此時(shí)其他物質(zhì)的干擾?。ㄏ佘赵诖艘灿形?,但在HPLC時(shí)能有效分離),方法有較高的靈敏度。

        2.2 流動(dòng)相的確定

        在實(shí)驗(yàn)過程中選用了水-乙腈、水-甲醇、磷酸緩沖溶液-甲醇不同pH作為流動(dòng)相,結(jié)果表明:中性條件下分離效果較佳且色譜純有機(jī)溶劑用量少、操作簡便,節(jié)約成本。當(dāng)水:甲醇體積比為95:5作流動(dòng)相,保留時(shí)間出在可信度較高區(qū)域、峰形對稱尖銳、檢測靈敏度高。其余組分效果均不理想,故選擇水:甲醇體積比為95:5作為流動(dòng)相。以此對提取液進(jìn)行測定,蟲草素與其他雜質(zhì)能夠有效的分開,無干擾,出峰時(shí)間適宜,分析穩(wěn)定。

        由于子實(shí)體中含有的腺苷和蟲草素的結(jié)構(gòu)極其相似,在相同色譜條件下進(jìn)樣腺苷標(biāo)準(zhǔn)品,比較可見,腺苷和蟲草素的分離度相當(dāng)大。

        2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

        準(zhǔn)確稱取蟲草素標(biāo)準(zhǔn)品5.0mg,用50%色譜純甲醇溶解定容于5mL比色管中,得到1.0mg/mL標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液。取儲(chǔ)備液分別稀釋成0.2、0.15、0.10、0.05、0.01mg/mL的蟲草素標(biāo)準(zhǔn)待測甲醇溶液。按照1.2的色譜條件得到峰面積S,以峰面積S對濃度C(μg/mL)作標(biāo)準(zhǔn)曲線,通過線性回歸得到回歸方程:S=3× 107-41890(R=0.9999)。實(shí)驗(yàn)表明:當(dāng)蟲草素濃度在10-1000μg/ mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。檢出限0.2μg/mL。

        3 結(jié)語

        本文采用超聲波法提取蛹蟲草子實(shí)體中的蟲草素,建立了高效液相色譜測定樣品中蟲草素含量的方法,樣品預(yù)處理簡單,結(jié)果準(zhǔn)確,重現(xiàn)性好,精密度高,效果令人滿意。本方法對于蟲草素的提取生產(chǎn)和質(zhì)量檢測都具有重要的現(xiàn)實(shí)指導(dǎo)意義。

        [1]溫魯,夏敏等.液體培養(yǎng)蛹蟲草蟲草素和腺苷的代謝量[J].微生物學(xué)通報(bào),2005,32(3):91-94.

        [2]張緒璋.北冬蟲夏草的人工培植及其營養(yǎng)成分分析[J].中國食用菌,2003,22(2):19.

        [3]Chor SY,Hui AY,To KF et al.J.Ethnopharmacol,2005, 100:180-186.

        [4]Heuy-Ling Chu,Jui-Chuan Chien,et al.Protective effect of Cordyceps militaris against high glucose-induced oxidative stress in human umbilical vein endothelial cells.Food Chemistry 129(2011)871–876.

        [5]袁永生,張莉,許效楓,等.反相高效液相色譜法測定蟲草菌粉中核苷類成分的含量[J].中國藥學(xué)雜志,2002,37(10): 776.

        何?。?989—),男,漢族,四川閬中市人,在讀研究生,單位:四川理工學(xué)院化學(xué)與制藥工程學(xué)院制藥工程專業(yè),研究方向:藥物合成。

        猜你喜歡
        蟲草腺苷色譜法
        蟲草素提取物在抗癌治療中顯示出巨大希望
        中老年保健(2022年2期)2022-08-24 03:20:44
        為什么越喝咖啡越困
        蟲草素提取物在抗癌治療中顯示出巨大希望
        高效液相色譜法測定水中阿特拉津
        反相高效液相色譜法測定食品中的甜蜜素
        環(huán)磷腺苷葡胺治療慢性充血性心力衰竭臨床研究
        蛹蟲草液體發(fā)酵培養(yǎng)基的篩選
        α-硫辛酸聯(lián)合腺苷鈷胺治療糖尿病周圍神經(jīng)病變效果觀察
        反相高效液相色譜法快速分析紫脲酸
        超高效液相色譜法測定藻油中的DPA和DHA
        伊香蕉大综综综合久久| 免费人成在线观看网站| 欧美性巨大╳╳╳╳╳高跟鞋| 国产最新网站| 亚洲国产一区久久yourpan| 女优av一区二区在线观看| 亚洲熟妇av一区| 无遮高潮国产免费观看| 欧美成人a视频免费专区| 人妻中文字幕一区二区视频| 玩弄放荡人妇系列av在线网站| 国产精品区一区第一页| 国产精品无码mv在线观看| 在线观看一区二区三区在线观看| 又嫩又硬又黄又爽的视频| 国产思思99re99在线观看| 97色人阁俺也去人人人人人| 国产高清在线一区二区不卡| 精品丰满人妻无套内射| 日本午夜福利| 一区二区三区视频偷拍| 成午夜福利人试看120秒| 无码人妻丰满熟妇区毛片| 福利网在线| 亚洲国产区中文在线观看| 国产福利视频一区二区| 国产精品久久国产精品99gif| 一本大道综合久久丝袜精品| 亚洲av精二区三区日韩| 国产成年女人特黄特色毛片免| 国产91一区二这在线播放| 天涯成人国产亚洲精品一区av| 男人的天堂免费a级毛片无码| 免费国产交换配乱淫| 日韩成精品视频在线观看| 欧美国产激情18| 欧洲日本一线二线三线区本庄铃| 成人国产精品高清在线观看| 日本一区二区三区光视频| 国产成人av大片大片在线播放 | 手机av在线播放网站|