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        乳腺癌脈管浸潤檢測中雙重免疫組化染色的應(yīng)用分析

        2015-03-24 09:39:53高鵬
        當(dāng)代醫(yī)學(xué) 2015年16期
        關(guān)鍵詞:脈管組織化學(xué)雙重

        高鵬

        乳腺為纖維組織、皮膚、脂肪以及乳腺腺體組成的,乳腺癌則是出現(xiàn)在乳腺上皮組織上的惡性腫瘤。乳腺雖不是人體重要的生命活動器官,且原位的乳腺癌并不會危及患者生命[1-2]。但是乳腺癌的細(xì)胞因失去正常細(xì)胞特性,使細(xì)胞之間較為松散,出現(xiàn)脫落的癥狀,當(dāng)癌細(xì)胞脫落后,其通過淋巴液或者血液散播到患者全身,出現(xiàn)轉(zhuǎn)移,則會導(dǎo)致死亡[3-4]。癌細(xì)胞入侵到血管或者淋巴管時(shí),才能轉(zhuǎn)移到遠(yuǎn)端部位或者局部的淋巴結(jié),所以乳腺癌患者通過對腫瘤脈管進(jìn)行浸潤檢測,才可指定準(zhǔn)確良好的治療方案[5]。本研究選取61例乳腺癌患者進(jìn)行分析,現(xiàn)報(bào)道如下。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料 選取2012年8月~2014年1月南省南陽市中心醫(yī)院收治的61例乳腺癌患者進(jìn)行研究,采取乳腺浸潤性導(dǎo)管癌的手術(shù)切除標(biāo)本,所有患者均為女性,年齡33~74歲,平均(47.31±3.18)歲,患者在手術(shù)前沒有進(jìn)行放療、化療或者抗腫瘤的其他治療,對患者給予重新切片以及HE染色,病理醫(yī)生給予確診。

        1.2 方法

        1.2.1 檢測方法 所有患者在免疫組織化學(xué)的試劑中選擇CD 34和CKpan,以及Dako公司的雙重免疫組織化學(xué)的試劑盒。將患者的標(biāo)本采用4%的中性緩沖的甲醛給予固定,并采用常規(guī)石蠟的包埋,給予4μm的連續(xù)切片,并給予雙重免疫組織化學(xué)的染色和常規(guī)HE染色,在免疫組織化學(xué)使用SP法,使用堿性磷酸酶和DAB(二氨基聯(lián)苯胺)進(jìn)行雙重染色,并給予封固,每個(gè)步驟都按照相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行操作。并對檢測結(jié)果進(jìn)行詳細(xì)記錄。

        1.2.2 結(jié)果判定 CD 34若為棕黃色則陽性結(jié)果,則定位在內(nèi)皮細(xì)胞;CK若為紅色則評為陽性,可定位在瘤細(xì)胞胞質(zhì)。HE和免疫組織化學(xué)切片要求2名病理醫(yī)生進(jìn)行獨(dú)立檢驗(yàn),若HE切片中有明確的被覆內(nèi)皮細(xì)胞腔隙,且有腫瘤細(xì)胞時(shí),則為LVSI(+),在免疫組織化學(xué)的染色切片中,若在CD 34變?yōu)樽攸S色染成紅色的腫瘤細(xì)胞的患者內(nèi)皮細(xì)胞腔隙為LVSI(+)[3]。

        1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 14.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料比較采用t檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        61例乳腺癌患者中,在HE染色判斷中,有16例判斷為LVSI(+)。而在雙重免疫組織化學(xué)染色證實(shí)的有:10例患者為LVSI(+),6例患者為LVSI(-),而在HE染色判斷中,有45例患者沒有確定為LVSI(+)的,在雙重免疫組織化學(xué)染色的檢測后,13例患者為LVSI(+)。兩種檢測方法的診斷結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

        3 討論

        乳腺癌患者在早期沒有明顯的體征和癥狀,很多人是通過體檢而發(fā)現(xiàn)的,其主要癥狀有乳腺腫塊、乳頭溢乳、皮膚改變,乳腺癌會導(dǎo)致皮膚失去彈性,以及橘皮樣的改變,而且乳頭、乳暈出現(xiàn)異常,若腫瘤在乳頭深部,會使乳頭出現(xiàn)回縮,但若腫瘤與乳頭的距離較遠(yuǎn),則會導(dǎo)致乳頭抬高或者回縮[6-7],對患者正常的工作和生活造成嚴(yán)重的不良影響,一旦腫瘤出現(xiàn)轉(zhuǎn)移,還會造成生命危險(xiǎn)。腫瘤轉(zhuǎn)移這個(gè)過程較為復(fù)雜,且脈管浸潤為中藥緩解,當(dāng)腫瘤細(xì)胞到達(dá)脈管腔,則就會通過淋巴和血液進(jìn)入到遠(yuǎn)處的器官和淋巴結(jié)中,造成轉(zhuǎn)移瘤的形成,所以在對實(shí)體瘤的診斷中,LVSI為重要指標(biāo),根據(jù)其來判斷患者的病情、復(fù)發(fā)以及生存時(shí)間。腫瘤脈管浸潤這種方法為:采用光鏡對HE切片進(jìn)行觀察,在被覆的內(nèi)皮細(xì)胞腔隙中對瘤細(xì)胞進(jìn)行明確觀察,但在有些狀態(tài)下不能給予較好判斷[8]。比如,若制片中,腫瘤細(xì)胞團(tuán)因?yàn)槭湛s導(dǎo)致的裂隙和血管真正的間隙難以辨別;如果血管腔隙的瘤細(xì)胞陶紹,則HE染色不能將其在背景血液細(xì)胞中進(jìn)行區(qū)分;而且若瘤細(xì)胞團(tuán)填滿血管的腔隙,則不能和間質(zhì)侵潤的瘤細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行區(qū)分。為了較好避免上述的問題,則在檢測中使用免疫組織化學(xué)雙重標(biāo)記的方法,對瘤細(xì)胞上皮性的標(biāo)志物與血管內(nèi)皮的細(xì)胞標(biāo)志物在同1張切片上展示,并和常規(guī)的HE染色給予比較,從而得出乳腺癌脈管浸潤檢測中雙重免疫組織化學(xué)染色的應(yīng)用效果。

        雙重免疫組織化學(xué)染色的原理為,利用抗體和抗原之間特異性的結(jié)合以及特殊標(biāo)記的技術(shù),并對細(xì)胞和組織內(nèi)給予抗體或者特定抗原的定性、定位和定量檢測[9]。在HE檢測中,雖然可區(qū)分腫瘤細(xì)胞團(tuán)因收縮造成的裂隙和血管腔的間隙,可是若血管腔隙中瘤細(xì)胞較少,則會診斷為血細(xì)胞,而導(dǎo)致漏診現(xiàn)象的出現(xiàn)。而雙重免疫組織化學(xué)染色這種檢測方法,在同一張切片上對瘤細(xì)胞給予血管內(nèi)皮細(xì)胞物和上皮性的標(biāo)記,可明顯直觀地看到腫瘤組織與血管之間的關(guān)系,促進(jìn)檢出率和診斷準(zhǔn)確率的提高。

        綜上所述,乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者在檢測中雙重免疫組織化學(xué)染色的檢出率,明顯比HE觀察的檢出率高,只有在早期判斷出癌細(xì)胞是否轉(zhuǎn)移或者復(fù)發(fā), 才可進(jìn)行積極有效的預(yù)后治療,達(dá)到較好的預(yù)后效果,延長患者的生存時(shí)間和生活質(zhì)量。

        [1] 賀莉,丁彥青,王蔚,等.免疫細(xì)胞在SARS病變組織中的表達(dá)及其作用[J].第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),2013,24(15):142-143.

        [2] 陳慧,徐琳瑜,鐘曉怡,等.雙重免疫組化技術(shù)在乳腺癌組織芯片中的應(yīng)用[J].中國醫(yī)藥生物技術(shù),2013,2:150-153.

        [3] 丁貴坡.乳腺癌脈管浸潤的檢測及其臨床病理學(xué)意義[D].廣州:南方醫(yī)科大學(xué),2009.

        [4] 王虎霞,盛薇,王光輝,等.乳腺癌VEGF-C mRNA的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系[J].西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2012,13(11):124-125.

        [5] 張濤.乳腺癌前哨淋巴結(jié)活檢及其微小轉(zhuǎn)移的檢測[D].北京:中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué),2005.

        [6] 邱東民,周士福,蔡鳳林,等.乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中COX-2、MMP-2的表達(dá)與細(xì)胞增殖的關(guān)系[J].蘇州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2012,14(10):129-130.

        [7] 耿艦,丁彥青,蔡俊杰,等.雙重免疫組化染色在乳腺癌脈管浸潤檢測中的應(yīng)用[J].診斷病理學(xué)雜志,2008,1:40-41,46.

        [8] 李蘭,楊紅鷹,張鐵毅.乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生性病變的病理學(xué)特點(diǎn)及其與浸潤性癌的關(guān)系[J].診斷病理學(xué)雜志,2011,31(19):162-163.

        [9] 楊莉,何奇,王嘯,等.Ki-67、C-erbB-2、P53蛋白在乳腺癌組織中的表達(dá)及其臨床意義[J].診斷學(xué)理論與實(shí)踐,2009,1:87-90.

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