牟巖濤，郝建學(xué)，杜喬偉

應(yīng)用自體和同種異體半肌腱重建兔前交叉韌帶對血管生成狀態(tài)的初步研究

牟巖濤1，郝建學(xué)2，杜喬偉3

兔；半肌腱重建前交叉韌帶手術(shù)；自體；同種異體；血管生成

前交叉韌帶的主要作用是穩(wěn)定膝關(guān)節(jié)，一旦該韌帶斷裂，則導(dǎo)致膝關(guān)節(jié)穩(wěn)定性喪失，臨床上多采用前交叉韌帶膝關(guān)節(jié)重建手術(shù)進行治療[1]。手術(shù)過程中，重建材料多選擇肌腱，肌腱的選擇途徑較為廣泛，主要有自體肌腱與同種異體肌腱兩種。而肌腱與骨骼的融合將直接影響血管的正常生長，對后期恢復(fù)意義重大[2]。本研究以兔作為試驗對象，研究應(yīng)用自體和同種異體半肌腱重建兔前交叉韌帶過程中血管生成的變化，為臨床治療提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料 選取健康新西蘭種兔48只，雌雄不限，依次編號為1～48號，按照隨機數(shù)字法將其平均分為自體組與異體組，每組24只。自體組兔月齡為3.5～5個月，平均(4.6±0.8)個月，體重2～3 kg，平均(2.6±0.3)kg；異體組兔月齡3～5個月，平均(4.3±0.6)個月，體重2～3.5 kg，平均(2.8±0.4)kg。兩組月齡、體重差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

1.2 肌腱摘取 自體組取脛骨結(jié)節(jié)內(nèi)后，大腿內(nèi)側(cè)分離出的半腱肌腱，保留遠端止點，剔除肌性部分，近端用3-0滌綸編織線縫編作為牽引備用。異體組移植所用材料：在手術(shù)開始實施前10 d時，無菌環(huán)境下將健康新西蘭種兔趾長屈肌腱取出，長度5 cm左右，放置于無菌容器內(nèi)保存，于-80～-70 ℃環(huán)境中冷凍備用。選用深圳瑞格爾儀器有限公司生產(chǎn)的RCT-10微機控制萬能拉力試驗機。

1.3 半肌腱重建前交叉韌帶手術(shù) 在手術(shù)開始前1 h，將冷凍保存的同種異體肌腱取出，解凍備用，手術(shù)開始前30 min，采用苯巴比妥對種兔是實施全身麻醉，暴露后肢，將小腿近端正中央皮膚縱向切開，切口為3 cm，并將切口下組織剝離，暴露種兔的脛骨上端部分，取出8 mm×5 mm的骨膜塊，做出清晰標記，放置在0.9%氯化鈉溶液中留作備用；于同側(cè)的干骺端，取脛骨平臺5 mm位置做一2.5 mm直徑的骨隧道，將同種異體的肌腱用取好的骨膜塊包裹起來，間斷縫合于肌腱的表面，固定；將肌腱間與骨膜兩端縫合3～4針，確保骨膜不發(fā)生返轉(zhuǎn)的狀況；在處理好上述步驟后，將肌腱近端縫合于內(nèi)側(cè)的入口肌腱部位，準確固定好；創(chuàng)面采用0.9%氯化鈉溶液沖洗手術(shù)創(chuàng)面，縫合切口，包扎，手術(shù)完畢。自體組手術(shù)方法同上。應(yīng)用影像學(xué)手段，對兩組種兔移植手術(shù)后的血管生成狀態(tài)進行檢測；同時，觀察兩組手術(shù)后3個月前交叉韌帶的最大拉出或拉斷強度情況，并記錄分析。

1.4 觀察指標 血管生成狀態(tài)分為良好、一般、較差。良好：血管全部正常，血運狀態(tài)良好；一般：血管部分恢復(fù)正常，血運狀態(tài)一般；較差：血管未能正常生成，或生成后血運狀態(tài)較差等。

2 結(jié) 果

2.1 兩組種兔血管生成情況 異體組血管生成狀態(tài)良好的種兔所占比例高于自體組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=6.28，P<0.05，表1)。

表1 兩組半肌腱重建前交叉韌帶種兔血管生成情況 (n；%)

注：與自體組相比，①P<0.05。

2.2 兩組前交叉韌帶的最大拉出或拉斷強度情況 經(jīng)方差齊性分析顯示，兩組力學(xué)參數(shù)服從正態(tài)分布，異體組種兔接受手術(shù)后3個月前交叉韌帶的最大拉出強度(35.31±1.24)N/cm及拉斷強度(43.13±1.57)N/cm，與自體組種兔前交叉韌帶的最大拉出強度(31.64±1.42)N/cm或拉斷強度(39.76±1.74)N/cm相比明顯提高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=9.53、7.04，P<0.05)。

3 討 論

前交叉韌帶斷裂是骨科常見損傷，其斷裂后造成的原發(fā)性關(guān)節(jié)不穩(wěn)和繼發(fā)性關(guān)節(jié)損害正引起臨床重視。筆者以新西蘭種兔為研究對象，對其進行自體和同種異體肌腱移植手術(shù)發(fā)現(xiàn)，異體組血管生成狀態(tài)良好的種兔所占比例(75.00%)明顯高于自體組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。分析原因為異體組種兔的血管生成狀態(tài)良好，由冷凍條件下取出的肌腱，均未使用任何免疫抑制藥，且后續(xù)恢復(fù)過程中未出現(xiàn)炎性反應(yīng)、組織壞死及液體滲出等，且經(jīng)過冷凍保存后，對肌腱表面的抗原物質(zhì)進行破壞，降低了移植過程的抗原抗體反應(yīng)，安全性較高[3]。同種異體肌腱移植后，促進血管的正常生成，有利于血液循環(huán)的恢復(fù)，進而增加了肌腱組織的血液供給[4]。

本研究顯示，與自體組相比，異體組種兔手術(shù)后3個月前交叉韌帶的最大拉出強度或拉斷強度明顯增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。異體組種兔在接受手術(shù)治療后，經(jīng)過3個月的恢復(fù)，其韌帶拉伸強度恢復(fù)較好。筆者認為，種兔的同種異體肌腱移植過程中，對骨膜起到了保護的作用，同時，確保了肌腱與骨膜的正常融合，促進了軟骨組織的生成，并使其進一步生長分化成為骨組織等[5]。同種異體肌腱的應(yīng)用，可提高前交叉韌帶中纖維組織的能力，有利于纖維組織發(fā)揮其正常的作用，為骨間滑液的形成奠定了堅實的基礎(chǔ)，導(dǎo)致肌腱與骨間組織的充分融合，其作用相當于強大的誘導(dǎo)劑，提高纖維組織的能力，縮短成骨組織形成的時間，加速肌腱與骨骼組織的愈合[6]。

綜上所述，在半肌腱重建前交叉韌帶手術(shù)中采用同種異體移植，療效十分顯著，能夠改善血管生成狀態(tài)，對韌帶拉伸強度有較大提升，提高了治療過程的安全性。同種異體肌腱的移植術(shù)其主要的優(yōu)點在于減少了治療后膝關(guān)節(jié)的并發(fā)癥，對膝關(guān)節(jié)的正常屈伸活動有一定的保護作用，手術(shù)時間大大縮短，降低了膝關(guān)節(jié)僵硬的發(fā)生率，使膝關(guān)節(jié)治療后的外觀得到了較大的改善等[7]。隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)水平的提高，同種異體肌腱移植技術(shù)還有待進一步研究，以改善手術(shù)中存在的問題，避免治療后并發(fā)癥的發(fā)生，滿足患者對治療效果的要求，提高患者治療后的生活質(zhì)量。

[1] 盧啟貴，王 平，黃東紅，等.鏡下自體梋繩肌與同種異體半腱肌重建膝前交叉韌帶對比研究[J].實用骨科雜志，2013，19(8)：709-712.

[2] Samsell B J，Moore M A.Use of controlled low dose gamma irradiation to sterilize allograft tendons for ACL reconstruction：biomecbanical and clinical perspective[J].Cell Tissue Bank，2012，13(2)：217-223．

[3] 李 皓，王大平，陸 偉，等.關(guān)節(jié)鏡下前交叉韌帶重建300例臨床研究[J].中華臨床醫(yī)師雜志(電子版)，2012，6(8)：2020-2023.

[4] 劉遠宏.56例關(guān)節(jié)鏡下同種異體肌腱重建膝關(guān)節(jié)前后交叉韌帶的臨床觀察[J].局解手術(shù)學(xué)雜志，2013，22(1)：91-92.

[5] 張 明，王巖峰，韓曉銳，等.關(guān)節(jié)鏡下膝關(guān)節(jié)前交叉韌帶斷裂同種異體肌腱重建的臨床研究[J].中國矯形外科雜志，2011，272(6)：10-12.

[6] 劉曉暉，周 敏，朱建平，等.關(guān)節(jié)鏡下自體半腱肌腱移植重建前交叉韌帶的療效[J].江蘇醫(yī)藥，2013，39(18)：2203-2204.

[7] 董向輝，凌 鳴，馮偉樓，等.關(guān)節(jié)滑液對兔前交叉韌帶重建后腱骨愈合生物力學(xué)和組織學(xué)的影響[J].中國組織工程研究，2012，16(11)：1937-1940.

(2015-08-20收稿 2015-09-20修回)

(責(zé)任編輯 尤偉杰)

牟巖濤,本科學(xué)歷，主治醫(yī)師，E-mail:63404202@qq.com

1.071000，保定市骨科醫(yī)院骨二科；2.071000，保定市第一醫(yī)院；3.400038 重慶，第三軍醫(yī)大學(xué)

郝建學(xué)，E-mail:13833047882@163.com

R686.5