黃艷萍，祝 峰，王新元，鄒皓琳，許 諾

乙型肝炎前S1、S2抗原與HBV-DNA的相關(guān)性分析

黃艷萍，祝 峰，王新元，鄒皓琳，許 諾

目的 對比分析乙型肝炎(乙肝)前S1、S2抗原和HBV-DNA的相關(guān)性，探討乙肝前S1、S2抗原的臨床應(yīng)用價值。方法 隨機選取乙肝患者420例，采用ELISA法對前S1、前S2抗原進行檢測，采用熒光定量PCR對HBV-DNA進行檢測，從血清學(xué)標志類型、HBV-DNA載量和HBV感染類型角度對HBV-DNA和前S1、S2抗原檢測結(jié)果進行分析。結(jié)果 乙肝大三陽患者乙肝前S1、S2抗原和HBV-DNA陽性率分別為98.48%、95.45%、100.0%；小三陽患者乙肝前S1、S2抗原和HBV-DNA陽性率分別為53.25% 、45.45% 、46.75%。HBsAg(+)HBcAb(+)患者乙肝前S1、S2抗原和HBV-DNA陽性率分別為53.75%、43.28%、44.78%。在高HBV-DNA載量組中乙肝前S1、S2抗原檢出率較高。結(jié)論 乙肝前S1、S2抗原與HBV-DNA有較好的相關(guān)性，可作為反映病毒感染與復(fù)制的指標。

前S1抗原；前S2抗原；HBV-DNA

病毒性肝炎是由多種病毒引起的以肝臟損害為主的一組全身性傳染病[1,2]，全球約3/4的肝細胞癌和1/3的肝硬化與乙肝病毒(HBV)感染有關(guān)[3]。文獻[4]報道，慢性HBV感染是肝細胞癌最重要的病因，其先進展為肝硬化、肝壞死，最終發(fā)展為肝癌。肝炎是嚴重威脅人類健康的世界性疾病，也是我國當(dāng)前流行最為廣泛、危害性最嚴重的一種疾病，有1.2億人為慢性HBV攜帶者[5]。故早診斷、早治療成為研究熱點。HBV-DNA常作為實驗室檢測HBV感染最敏感、最特異的指標，但文獻[6]報道，在阿瓦士、伊朗等國家，HBV感染者血清HBsAg檢測為陰性，這成為HBV在整個社會傳播的潛在危險因素。前S1抗原和前S2抗原均是HBV復(fù)制的指標，本研究旨在探討前S1、S2抗原蛋白與HBV-DNA的關(guān)系及其聯(lián)合檢測的臨床價值，為臨床應(yīng)用提供依據(jù)。

1 對象與方法

1.1 對象 收集本院2013-09至2014-09門診及住院乙肝患者420例，年齡18～65歲，男283例，女137例。

1.2 試劑與方法 乙肝五項定性、乙肝前S1抗原和前S2抗原用ELISA方法檢測，試劑分別采用上?？迫A生物試劑盒和北京貝爾生物試劑盒。HBV-DNA用熒光定量PCR法檢測，分別用RT-6500酶標儀和美國PE57700熒光PCR檢測儀進行測定。實驗方法均嚴格按照說明書進行操作。結(jié)果分析采用定性方式(拷貝數(shù)<103/ml為陰性，>103/ml為陽性)，根據(jù)乙肝感染的不同模式，不同HBV-DNA載量，不同HBV感染類型分別分組，比較各組前S1、S2抗原和HBV DNA陽性率。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS19.0軟件進行統(tǒng)計分析，各組檢測指標的陽性率比較采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 乙肝感染不同模式比較 乙肝感染不同模式下，HBV-DNA和前S1、S2抗原檢測結(jié)果比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(表1)。

表1 乙肝感染者不同模式下HBV-DNA和前S1、S2抗原檢測結(jié)果 (n；%)

2.2 不同HBV-DNA載量比較 隨HBV-DNA載量的增高，乙肝前S1、S2抗原陽性率也逐漸提高。其中，高HBV-DNA載量(>107和105～107)組乙肝前S1、S2抗原單獨檢測的陽性率，與兩者同時陽性的概率比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。低HBV-DNA載量(103～105和<103)組，乙肝前S1、S2抗原的陽性率與其兩者同時陽性的概率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(表2)。

表2 乙肝感染者不同HBV-DNA載量下HBV-DNA和前S1、S2抗原檢測結(jié)果 (n；%)

2.3 不同疾病種類比較 急、慢性肝炎和HBsAg攜帶者中乙肝前S1、S2抗原陽性率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義；肝硬化乙肝前S1、S2抗原陽性率與HBsAg攜帶者比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01，表3)。

表3 乙肝感染者不同HBV感染類型前S1、S2抗原檢測結(jié)果 (n；%)

3 討 論

前S1抗原是急性病毒性肝炎早期感染的標志，前S蛋白參與HBV的組裝、分泌和侵入肝細胞的過程。文獻[7]報道，病毒附著于肝細胞上，最主要的介導(dǎo)部位是乙肝前S1蛋白的氨基酸(AA)21～47片段，變異的病毒只要保留此區(qū)段就具有傳染性。前S1蛋白也是急性肝炎預(yù)后的判斷指標，越早轉(zhuǎn)陰，預(yù)后越好[8]。研究表明，前S2抗原測定有助于急性肝炎的早期診斷，而且通過對患者急性期前S2蛋白進行連續(xù)的動態(tài)監(jiān)測，可早期了解急性乙肝的轉(zhuǎn)歸和預(yù)后[9]。

本研究表明，乙肝感染者不同模式下HBV-DNA和前S1、S2抗原檢測結(jié)果比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。但大三陽患者陽性檢出率明顯大于后兩組，而后兩組為HBeAg陰性，但仍能檢出部分前S1、前S2抗原陽性，這可能是因為HBV前C區(qū)1896發(fā)生G-A突變產(chǎn)生1個終止密碼子阻止了HBeAg的合成[10]，因此測定血清中HBeAg陰性，導(dǎo)致此抗原漏檢，將其陰轉(zhuǎn)作為疾病好轉(zhuǎn)不是太準確；而前S1、前S2抗原可以彌補這種缺陷，將其作為病毒復(fù)制的標志優(yōu)于HBeAg[11]。但它們的特異性稍差，故將其聯(lián)合檢測可以更好地反映病毒復(fù)制情況。故當(dāng)血清中HBeAg陰性時不能片面地認為未感染HBV，要結(jié)合前S1、S2抗原綜合分析，考慮是否存在漏檢的可能。

不同HBV-DNA載量的比較結(jié)果，體現(xiàn)了乙肝前S1、S2抗原能較好地表達HBV的感染和復(fù)制情況。在HBV-DNA陰性標本中依然有乙肝前S1、S2抗原陽性，其陽性率分別為18.75%、12.50%，主要原因是乙肝感染者血清中存在三種顆粒：完整的病毒顆粒Dane顆粒、球形顆粒和管型顆粒，只有Dane顆粒有傳染性。而前S1、S2抗原不僅存在于病毒顆粒表面，還存在于不具有傳染性的管形顆粒表面，所以在患者病情好轉(zhuǎn)時，雖然HBV-DNA濃度很低但仍能檢出前S1、S2抗原陽性。所以臨床上檢測出HBV-DNA低表達，血清前S1、S2抗原陽性時，提示該患者體內(nèi)HBV處于低感染甚至不具備傳染性。僅通過血清前S1、S2抗原定性來判斷病毒的復(fù)制情況，這是誤區(qū)。不同HBV感染類型比較結(jié)果顯示，肝硬化中乙肝前S1、S2抗原陽性率與HBsAg攜帶者相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，說明前S1、S2抗原陽性在肝硬化患者中的檢出率高，并隨病情的嚴重程度而增高。

綜上所述，作為HBV外膜蛋白的前S1、S2抗原在感染宿主細胞過程中起重要作用，與HBV-DNA有良好的相關(guān)性，可作為HBV感染和復(fù)制的重要依據(jù)，且比HBeAg更能較好地反映病毒的復(fù)制情況。定量HBV表面抗原(qHBsAg)也可用于監(jiān)測慢性HBV感染者體內(nèi)病毒復(fù)制和治療的情況，但是qHBsAg水平在判斷慢性HBV感染診斷和預(yù)后時要考慮出現(xiàn)pre-S缺失突變體[12]。故采用前S1、S2抗原可完善和補充其他血清學(xué)檢測指標。

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(2014-09-23收稿 2015-01-21修回)

(責(zé)任編輯 尤偉杰)

Relationship between hepatitis B virus former S1 antigen,former S2 antigen, and HBV-DNA, and their clinical significance

HUANG Yanping, ZHU Feng, WANG Xinyuan,ZOU Haolin, and XU Nuo.

Department of Clinical Laboratory, Jiangsu Provincial Corps Hospital,Chinese People’s Armed Police Forces, Yangzhou 225003, China

Objective To study the relationship between HBV Pre-S1 antigen,HBV Pre-S2 antigen and HBV-DNA and investigate the clinical significance of the hepatitis B virus (HBV). Methods The markers Pre-S1 antigen, Pre-S2 antigen were determined by ELISA and HBV-DNA by the fluorescence quantitative PCR in 420 patients with HBV collected from September 2013 to May 2014. HBV, Pre-S1 antigen and Pre-S2 antigen results were analysed in different aspects, such as serum indices, HBV-DNA amounts and HBV-DNA infection types. Results In “big sanyang” patients the positive rates of Pre-S1, S2 antigen and HBV-DNA were 98.48%, 95.45%, 100%,respectively.In “small Sanyang” patients, the positive rates of Pre-S1, S2 antigen and HBV-DNA were 53.25%, 45.45%, 46.75%,respectively.In HBsAg+ HBcAb+ patients the positive rate of Pre-S1, S2 antigen and HBV-DNA were 53.75%, 43.28%, 44.78%,respectively.And the detection rates of HBV Pre-S1 antigen, HBV Pre-S2 antigen were higher in patients infected with high level of HBV-DNA. Conclusions There is a good correlation between HBV Pre-S1 antigen, HBV Pre-S2 antigen and HBV-DNA, which can reflect virus infection and replication.

Pre-S1Ag；Pre-S2Ag；HBV-DNA

醫(yī)學(xué)期刊常用字詞正誤對照表

黃艷萍，本科學(xué)歷，主管技師，E-mail:765511283@qq.com

225003 揚州，武警江蘇總隊醫(yī)院檢驗科

祝 峰，E-mail:zfwjjszd@163.com

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