任慧梅，杜冰潔，盛 萍

(新疆醫(yī)科大學(xué) 中醫(yī)學(xué)院，新疆 烏魯木齊 830011)

響應(yīng)曲面法優(yōu)化伊貝母總生物堿提取工藝

任慧梅，杜冰潔，盛 萍*

(新疆醫(yī)科大學(xué) 中醫(yī)學(xué)院，新疆 烏魯木齊 830011)

目的： 采用響應(yīng)曲面法(Box-Behnken)優(yōu)化伊貝母中總生物堿的提取工藝。方法： 在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上，選取乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取時(shí)間和液料比3個(gè)因素進(jìn)行Box-Benhnken中心組合設(shè)計(jì)，以總生物堿含量和浸膏率的綜合評(píng)分為響應(yīng)值，利用響應(yīng)曲面法對(duì)其提取工藝參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果： 優(yōu)選出的伊貝母總生物堿最佳提取工藝為加43.14倍pH 2的69.78% 乙醇提取1次，每次1.86 h，考慮到生產(chǎn)實(shí)際操作，故將實(shí)驗(yàn)條件確定為加40倍pH 2的70% 乙醇提取1次，每次1.5 h。在此條件下，伊貝母總生物堿含量達(dá)到11.04%，浸膏率達(dá)到13.75%，綜合評(píng)分為98.90。結(jié)論： 實(shí)測(cè)值與響應(yīng)曲面法回歸模型的預(yù)測(cè)值相近，與模型擬合良好，優(yōu)化的提取工藝準(zhǔn)確可靠，具有一定的實(shí)用價(jià)值，可用于伊貝母總生物堿的提取工藝。

伊貝母；總生物堿；提取工藝；響應(yīng)曲面法

伊貝母是我國(guó)常用名貴大宗藥材，收載于《中華人民共和國(guó)藥典》歷屆版本中，為百合科植物新疆貝母FritillariawalujewiiRegel 或伊犁貝母F.pallidifloraSchrenk 的干燥鱗莖。性微寒，味苦，歸肺、心經(jīng)，具有清熱潤(rùn)肺，化痰止咳之功效，臨床上常用于肺熱燥咳，干咳少痰，陰虛勞咳，咳痰帶血等癥[1]，在臨床應(yīng)用方面與藥材川貝母相同，是中醫(yī)處方和中成藥生產(chǎn)常用的名貴藥材。

大量研究證明，伊貝母中所含主要有效成分為甾醇類生物堿，具有鎮(zhèn)咳、祛痰、抗炎、平喘和抑菌的作用，目前對(duì)其總生物堿的提取方法多為親脂性溶劑提取法，但提取效率普遍較低，文獻(xiàn)報(bào)道其提取含量多為0.11%～0.23%之間[2-6]。響應(yīng)曲面分析法(Box-Behnken)是一種優(yōu)化工藝條件的有效方法，可用于確定各因素及其交互作用在工藝過(guò)程中對(duì)指標(biāo)的影響，精確地表述因素與響應(yīng)值的關(guān)系，其實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果表達(dá)較正交設(shè)計(jì)更為優(yōu)良[7-8]。目前，采用響應(yīng)曲面法優(yōu)化伊貝母總生物堿提取工藝方面的研究未見(jiàn)報(bào)道，故本實(shí)驗(yàn)在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，選取乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取時(shí)間和液料比為考察因素，進(jìn)行中心組合設(shè)計(jì)，利用響應(yīng)面分析法優(yōu)化伊貝母總生物堿的提取工藝，以期為伊貝母總生物堿的工業(yè)化生產(chǎn)提供實(shí)踐依據(jù)。

1 材料與儀器

1.1 材料

實(shí)驗(yàn)所用伊貝母藥材購(gòu)自新疆奇康哈博維藥有限公司，經(jīng)新疆醫(yī)科大學(xué)資源教研室盛萍教授鑒定為百合科植物新疆貝母F.walujewiiRegel 或伊犁貝母F.pallidifloraSchrenk 的干燥鱗莖。藥材粉碎，過(guò)60 目篩，備用。對(duì)照品西貝素(批號(hào)YY20100311)購(gòu)于上海源葉生物科技有限公司。氯仿、鹽酸、無(wú)水硫酸鈉等，所用試劑均為分析純。

1.2 儀器

ME204E電子天平(梅特勒-托利多儀器有限公司 )；DHG-9123A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(上海齊欣科學(xué)儀器有限公司)；GBC-40紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)(澳大利亞產(chǎn))；KQ5200DE型數(shù)控超聲波清洗器；雷磁pH計(jì)；水浴鍋等。

2 方法與結(jié)果

2.1 伊貝母總生物堿含量及浸膏率測(cè)定

2.1.1 對(duì)照品溶液制備 精密稱取0.005 2 g西貝素至25 mL容量瓶中，用少量氯仿溶解，并用氯仿定容至刻度，制成濃度為0.208 mg/mL的儲(chǔ)備液。

2.1.2 供試品溶液制備 精密稱取伊貝母藥材適量，按照單因素試驗(yàn)及響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)方案的方法提取，合并濾液，濾液置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中于80 ℃水浴上蒸干，60 ℃烘箱中干燥3 h，得到干浸膏，稱重。精密稱取干浸膏粉適量，加濃氨試液密塞浸潤(rùn)12 h后，精密加入三氯甲烷-甲醇(4∶1)混合溶液，混勻，回流提取4 h，濾過(guò)，用三氯甲烷-甲醇(4∶1)混合溶液洗滌2～3次，洗滌液與樣品液一起過(guò)濾后，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在60 ℃水浴上蒸干后，于烘箱中60 ℃干燥3 h，殘?jiān)由倭柯确路执稳芙猓恳迫?5 mL容量瓶中，加氯仿至刻度，搖勻，作為供試品溶液，備用。

2.1.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精密量取15 mL對(duì)照品儲(chǔ)備液至25 mL容量瓶中，并用氯仿定容至刻度(0.1248 mg/mL)。從中精密量取0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 mL，分別置于25 mL容量瓶中，分別加pH 5.0的溴麝香草酚蘭4 mL，氯仿定容，劇烈振搖，靜置分層30 min，氯仿層分液于裝有0.25 g無(wú)水硫酸鈉的具塞錐形瓶中，于414 nm的波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(A)，以A為縱坐標(biāo)，質(zhì)量分?jǐn)?shù)(C)為橫坐標(biāo)，得回歸方程A=0.0084C+0.0762(r=0.9997)，結(jié)果表明，西貝素在12.48～74.88 μg與吸光度呈良好的線性關(guān)系。

2.1.4 含量測(cè)定方法 精密吸取供試溶液1 mL至25 mL容量瓶中，按2.1.3項(xiàng)下方法進(jìn)行測(cè)定，自“加pH 5.0的溴麝香草酚蘭4 mL，氯仿定容，劇烈振搖，靜置分層30 min，氯仿層分液于裝有0.25 g無(wú)水硫酸鈉的具塞錐形瓶中，于414 nm的波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度”，計(jì)算總生物堿含量。

2.1.5 浸膏率測(cè)定方法 精密稱取伊貝母藥材約1 g，按照單因素試驗(yàn)及響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)方案的提取方法進(jìn)行制備，得到的濾液在80 ℃水浴上蒸干后，在60 ℃烘箱中干燥3 h，得到干浸膏，置干燥器中冷卻至室溫，迅速精密稱定重量，按下式計(jì)算浸膏率：浸膏率 =(浸膏重量/原藥材重量)×100%

2.2 單因素考察

2.2.1 提取方法考察

(1)回流提取法。精密稱取樣品粉末(過(guò)60目篩)約1.000 0 g置100 mL圓底燒瓶中，加入70%乙醇30 mL，輕搖混勻，浸潤(rùn)30 min，置90℃水浴加熱回流提取1 h，冷卻，補(bǔ)足減失的重量，室溫下濾紙濾過(guò)，用70%乙醇洗滌燒瓶2～3次，洗滌液一起過(guò)濾，按2.1.2項(xiàng)下制備供試品溶液，按2.1.4和2.1.5項(xiàng)下方法進(jìn)行伊貝母總生物堿含量和浸膏率的測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表1。

(2)超聲提取法。精密稱取樣品粉末(過(guò)60目篩)約1.0000 g置100 mL圓底燒瓶中，加入70%乙醇30 mL，輕搖混勻，浸潤(rùn)30 min，超聲提取1 h(100 Hz)，冷卻，補(bǔ)足減失的重量，室溫下濾紙濾過(guò)，用70%乙醇洗滌燒瓶2～3次，洗滌液一起過(guò)濾。按2.1.2項(xiàng)下制備供試品溶液，按2.1.4和2.1.5項(xiàng)下方法進(jìn)行伊貝母總生物堿含量和浸膏率的測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表1。

(3)滲漉提取法。精密稱取樣品粉末約15.000 0 g藥材粉末，用70%乙醇450 mL，浸漬48 h后開(kāi)始滲漉， 0.5 mL/min，直至可溶性成分全部漉出(用碘化鉍鉀試劑檢查為陰性)，60℃下回收至稠膏狀，按2.1.2項(xiàng)下制備供試品溶液，按2.1.4和2.1.5項(xiàng)下方法進(jìn)行伊貝母總生物堿含量和浸膏率的測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 不同方法考察結(jié)果表(n=3)

從表1的結(jié)果可以看出：回流提取法平均總生物堿含量為9.27%，平均浸膏率為13.83%，均高于滲漉提取和超聲提取法，故選擇回流提取法開(kāi)展下列單因素實(shí)驗(yàn)考察。

2.2.2 不同pH值考察 分別設(shè)定提取液pH值為l、2、3、4、5，固定乙醇體積分?jǐn)?shù)為70%，料液比為1∶30，提取時(shí)間1.0 h，采用回流提取法提取伊貝母總生物堿，提取1次，過(guò)濾，按2.1.2項(xiàng)下制備供試品，按2.1.4和2.1.5項(xiàng)下方法進(jìn)行伊貝母總生物堿含量和浸膏率的測(cè)定。從結(jié)果中可看出以pH 2.0的70%乙醇提取伊貝母總生物堿成分，其平均含量為9.30%，平均浸膏率為13.83%，總生物堿含量均高于其他pH值，但浸膏率低于pH 1.0的16.20%，綜合考慮選擇pH 2.0的70%乙醇為提取溶劑。

2.2.3 不同乙醇體積分?jǐn)?shù)的考察 分別設(shè)定乙醇體積分?jǐn)?shù)為50%、60%、70%、80%、90%，固定pH值為2，料液比為1∶30，提取時(shí)間1.0 h，采用回流提取法提取伊貝母總生物堿，提取1次，過(guò)濾，按2.1.2項(xiàng)下制備供試品，按2.1.4和2.1.5項(xiàng)下方法進(jìn)行伊貝母總生物堿含量和浸膏率的測(cè)定。結(jié)果表明，當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)為70% 和80% 時(shí)伊貝母總生物堿含量較高，分別為9.45%、9.48%，當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)為50%、60%、70% 時(shí)伊貝母藥材提取物浸膏率較高，分別為13.51%、12.15%、12.42%，綜合考慮，選取體積分?jǐn)?shù)為70%的乙醇進(jìn)行試驗(yàn)。

2.2.4 不同提取時(shí)間的考察 設(shè)定回流時(shí)間為0.5、1、1.5、2、3、4 h，固定pH值為2，乙醇體積分?jǐn)?shù)為70%，料液比為1∶30，采用回流提取法提取伊貝母總生物堿，提取1次，過(guò)濾，按2.1.2項(xiàng)下制備供試品，按2.1.4和2.1.5項(xiàng)下方法進(jìn)行伊貝母總生物堿含量和浸膏率的測(cè)定。結(jié)果表明當(dāng)回流時(shí)間在0.5～4.0 h之間時(shí)，浸膏率相當(dāng)，介于14.20%～15.09%之間，當(dāng)回流時(shí)間為1.5～4.0 h時(shí)，伊貝母總生物堿含量較高，介于8.59%～10.67%之間，綜合實(shí)際效益考慮，選取回流時(shí)間為1.5 h進(jìn)行試驗(yàn)。

2.2.5 料液比考察 分別設(shè)定料液比為1∶10、1∶20、1∶30、1∶40、1∶50、1∶60，固定pH值為2，乙醇體積分?jǐn)?shù)為70%，提取時(shí)間為1.5 h，采用回流提取法提取伊貝母總生物堿，提取1次，過(guò)濾，按2.1.2項(xiàng)下制備供試品，按2.1.4和2.1.5項(xiàng)下方法進(jìn)行伊貝母總生物堿含量和浸膏率的測(cè)定。從結(jié)果中可看出當(dāng)料液比在1∶10～1∶40之間時(shí)，伊貝母總生物堿含量及浸膏率變化明顯，總生物堿含量從8.12%上升為10.95%，浸膏率從12.60%上升為14.54%，當(dāng)料液比在1∶40～1∶60之間，伊貝母總生物堿含量變化不顯著且收率相當(dāng)，故選擇料液比為1∶40進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。

2.2.6 提取次數(shù)考察 分別設(shè)定提取次數(shù)為1、2、3次，固定pH值為2，乙醇體積分?jǐn)?shù)為70%，料液比為1∶40，提取時(shí)間為1.5 h，采用回流提取法提取伊貝母總生物堿，過(guò)濾，按2.1.2項(xiàng)下制備供試品，按2.1.4和2.1.5項(xiàng)下方法進(jìn)行伊貝母總生物堿含量和浸膏率的測(cè)定。由結(jié)果可知，當(dāng)提取次數(shù)為1、2、3次時(shí)，伊貝母總生物堿含量及收率變化不顯著，綜合實(shí)際效益及實(shí)驗(yàn)所用時(shí)間，選擇提取次數(shù)為1次開(kāi)展后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

2.3 響應(yīng)曲面法優(yōu)化試驗(yàn)

2.3.1 模型建立及顯著性檢驗(yàn) 為進(jìn)一步考察伊貝母總生物堿最佳提取工藝，在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，固定pH值為2，提取次數(shù)為1次，選取乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取時(shí)間及料液比3個(gè)影響伊貝母總生物堿提取的因素，以伊貝母總生物堿含量及浸膏率的綜合評(píng)分為響應(yīng)值，權(quán)重系數(shù)[9]依次為80%、20%，綜合評(píng)分 = 總生物堿含量×80% + 浸膏率×20%，采用Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)原理進(jìn)行響應(yīng)面分析試驗(yàn)[7-8]，具體試驗(yàn)設(shè)計(jì)方案及結(jié)果見(jiàn)表2～4。

表2 響應(yīng)面分析因素和水平

表3 響應(yīng)面分析試驗(yàn)及結(jié)果

由表3可知，響應(yīng)值中實(shí)測(cè)值與回歸方程預(yù)測(cè)值接近，模型適用性高。利用Design Expert 8.0.4軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行二次多元回歸擬合，得到以伊貝母總生物堿浸膏率和含量的綜合評(píng)分為響應(yīng)值，乙醇體積分?jǐn)?shù)(X1)、提取時(shí)間(X2)、料液比(X3)之間的二次多元回歸模型：綜合評(píng)分=98.89-0.037X1+1.33X2+3.37X3-0.39X1X2+1.18X1X3-1.08X2X3-6.61X12-0.68X22-4.07X32。對(duì)該模型進(jìn)行方差分析，結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 響應(yīng)面回歸模型方差分析表

由表4方差分析可得：F回歸=43.64>F0.01(9，4) =14.66，P<0.0001，表明二次多元回歸模型達(dá)到了極顯著水平；模型一次項(xiàng)X1不具有顯著性，X2、X3具有一定顯著性，從F值可知單因素的影響順序?yàn)閄3>X2>X1，即提取料液比>提取時(shí)間>乙醇體積分?jǐn)?shù)；二次項(xiàng)X12、X32均有顯著性，X22不具有顯著性；交互項(xiàng)均不具有顯著性。

2.3.2 響應(yīng)曲面分析

利用Design Expert軟件對(duì)表3中的數(shù)據(jù)進(jìn)行二次多元回歸擬合，所得到的二次回歸方程的曲面圖及等高線見(jiàn)圖2～4。根據(jù)響應(yīng)曲面圖可以確定各因素的最佳水平范圍，根據(jù)等高線的形狀可以評(píng)價(jià)試驗(yàn)因素之間的交互作用強(qiáng)度，圓形表示兩因素交互作用不顯著，橢圓表示兩因素交互作用顯著。

圖2 乙醇體積分?jǐn)?shù)和提取時(shí)間對(duì)總生物堿含量及 浸膏率影響的曲面圖和剖面圖

圖3 乙醇體積分?jǐn)?shù)和料液比對(duì)總生物堿含量及 浸膏率影響的曲面圖和剖面圖

圖4 料液比和提取時(shí)間對(duì)總生物堿含量及 浸膏率影響的曲面圖和剖面圖

從圖2中的響應(yīng)曲面可知，當(dāng)料液比為1∶40，提取時(shí)間在1.5 h附近，乙醇體積分?jǐn)?shù)在70 %附近時(shí)，綜合評(píng)分達(dá)到最大值，說(shuō)明最佳提取時(shí)間和乙醇體積分?jǐn)?shù)在試驗(yàn)所選的范圍內(nèi)；從等高線可看出，沿提取時(shí)間變化方向移動(dòng)，等高線密度大于沿乙醇體積變化方向，說(shuō)明提取時(shí)間對(duì)綜合評(píng)分的影響較為顯著，與方差分析結(jié)果相吻合。

從圖3中的響應(yīng)曲面可知，當(dāng)提取時(shí)間為1.5 h，料液比為1∶40時(shí)，隨著乙醇體積分?jǐn)?shù)的增大，綜合評(píng)分變化不顯著，曲線平滑，說(shuō)明乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)綜合評(píng)分的影響不顯著；從等高線呈圓形，說(shuō)明料液比和乙醇體積分?jǐn)?shù)的交互影響不顯著，與方差分析結(jié)果吻合。

由圖4中的響應(yīng)曲面可知，當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)為70%，提取時(shí)間一定的條件下，料液比在1∶30～1∶40增大時(shí)，綜合評(píng)分急劇增加，并在1∶40附近達(dá)到極大值后保持平穩(wěn)，這與單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果相吻合；從等高線可看出，沿料液比變化方向移動(dòng)，等高線密度大于提取時(shí)間變化方向，說(shuō)明料液比對(duì)綜合評(píng)分的影響極顯著，與方差分析結(jié)果相吻合。

由3組圖比較結(jié)果可知，提取時(shí)間和料液比對(duì)綜合評(píng)分的影響最為顯著，曲線較陡，而乙醇體積分?jǐn)?shù)顯著性較低，曲線較為平滑，且隨其數(shù)值的變化，綜合評(píng)分無(wú)顯著性變化。

經(jīng)Design Expert軟件分析篩選，得到伊貝母總生物堿的最佳提取工藝條件為：加43.14倍pH 2的69.78% 乙醇提取1次，每次1.86 h，綜合評(píng)分為99.911，考慮到實(shí)際操作，故將實(shí)驗(yàn)條件確定為加40倍pH 為2的70% 乙醇提取1次，每次1.5 h。

2.4 驗(yàn)證試驗(yàn)

按照上述確定的最佳提取工藝進(jìn)行伊貝母總生物堿的提取，即精密稱取伊貝母藥材3份，每份約1.0000 g，加40倍pH 為2的70% 乙醇提取1次，每次1.5 h。結(jié)果表明，伊貝母總生物堿平均浸膏率13.75%，總生物堿平均含量11.04%，平均綜合評(píng)分98.90，RSD為0.91%，實(shí)測(cè)值與預(yù)測(cè)值接近，且差異小于5%，說(shuō)明該模型優(yōu)選出的工藝穩(wěn)定可行，可用于伊貝母總生物堿的提取。

3 討 論

3.1 在提取工藝優(yōu)化的最優(yōu)點(diǎn)附近，自變量和應(yīng)變量一般呈非線性關(guān)系[10]，因此，在選擇提取工藝優(yōu)化方法時(shí)，本實(shí)驗(yàn)采用響應(yīng)曲面法(Box-Behnken)考察了乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取時(shí)間、料液比對(duì)伊貝母總生物堿提取的影響。建立的二次方程模型回歸差異極顯著，說(shuō)明本實(shí)驗(yàn)建立的二次回歸方程能正確的反應(yīng)所考察因素與響應(yīng)值之間的關(guān)系。通過(guò)對(duì)回歸模型及響應(yīng)曲面圖的分析，得到伊貝母總生物堿最佳提取工藝為：加40倍pH 為2的70% 乙醇提取1次，每次1.5 h。在此基礎(chǔ)上對(duì)該工藝進(jìn)行了驗(yàn)證，伊貝母總生物堿平均浸膏率為13.75%，總生物堿平均含量為11.04%，平均綜合評(píng)分為98.90，RSD為0.91%，實(shí)測(cè)值與預(yù)測(cè)值接近，且差異小于5%，說(shuō)明該模型優(yōu)選出的工藝穩(wěn)定可行，可用于伊貝母總生物堿的提取。

3.2 傳統(tǒng)的提取工藝優(yōu)化通常采用正交設(shè)計(jì)、均勻設(shè)計(jì)[7]。雖然正交設(shè)計(jì)、均勻設(shè)計(jì)可同時(shí)考慮幾個(gè)因素且實(shí)驗(yàn)次數(shù)較少，但其精度不夠，響應(yīng)曲面法雖然試驗(yàn)次數(shù)相對(duì)較多，但能把因素與響應(yīng)值的相互關(guān)系函數(shù)化，建立連續(xù)變量曲面模型，通過(guò)中心組合試驗(yàn)研究各因素間交互作用的一種回歸分析方法，能求得高精度的回歸方程?？疾斓囊蛩夭粌H僅局限于所設(shè)計(jì)的水平，比正交設(shè)計(jì)、均勻設(shè)計(jì)更直觀、精確的得到最優(yōu)組合條件，由此得到最優(yōu)的提取工藝，因此該優(yōu)化提取方法可以在伊貝母總生物堿提取工藝研究及生產(chǎn)中推廣應(yīng)用。

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Optimazation of Extraction Process of Total Alkaloids from Fritillariapallidiflorae Bulbus by Response Surface Methodology

Ren Huimei, Du Bingjie, Sheng Ping*

(School of Traditional Chinese Medicine, Xinjiang Medical University, Urumqi 830011, China)

Objective:Using response surface methodology to optimize extraction technology of total alkaloids from Fritillaria pallidiflorae bulbus. Method : Based on single factor test, ethanol concentration, effects of extraction time and liquid-solid ratio on yield of total alkaloids from Fritillaria pallidiflorae bulbus was investigated with a three-factor Box-Behnken center-united design. The comprehensive score of the total alkaloid content and extract yield as response value was optimized by response surface methodology. Result:Optimized extraction technology conditions was as following:43.14 times of 69.78% ethanol , pH 2.0, extract 1 times, each time 1.86 h. According to actual situation in production, optimum extraction parameters were modified as 40 times of 70% ethanol , pH 2.0, extract 1 times, each time 1.5 h, the total alkaloid content reached 11.04%. The total alkaloids of Fritillaria extract rate reached 13.75%, the comprehensive score of 98.90 under these conditions.Conclusion:actual value which was in consistency with the theoretic value. This modified extraction parameters were credible and reliable with some practical value, and can be used for the extraction of alkaloids from Fritillaria.

Fritillaria pallidiflorae bulbus; total alkaloids; extraction technology ; response surface methodology

2015-03-18

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81160544)。

任慧梅(1989—)，女，在讀碩士研究生，研究方向：從事特色中藥資源質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。

*通訊作者：盛萍(1967—)，女，博士，教授，碩士生導(dǎo)師。研究方向：主要從事特色中藥資源質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。 E-mail: xjsphwy@163.com

10.3969/j.issn.1006-9690.2015.06.007

R284. 2

A

1006-9690(2015)06-0024-05