夏凡

摘 要：以百合為原料制備百合多糖，研究百合多糖的超聲波提取條件。取5.0 g百合碎片，超聲波提取，濾去飽和殘渣，合并提取液，減壓濃縮至原溶液的1/4，加入5倍量無水乙醇沉淀，得到多糖粗品。將多糖粗品溶解，采用Sevag法除去蛋白質(zhì)，得到百合多糖。以苯酚-硫酸法測定百合多糖含量。在超聲波功率500 w時，提取條件為提取時間30 min，料液比1：10，提取次數(shù)1次，得到的百合多糖含量最高。通過對百合多糖的超聲波提取條件的研究，為百合多糖的進一步開發(fā)利用提供了實驗依據(jù)和有價值的參考。

關(guān)鍵詞：百合 多糖 超聲波 提取條件

中圖分類號：R284.2 文獻標(biāo)識碼：A 文章編號：1672-3791（2014）12（b）-0063-02

百合既是珍貴蔬菜，又是著名的觀賞球根類花卉，更是藥食兼有的滋補佳品?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，百合為常用中藥，性味甘寒，具有養(yǎng)陰清肺、清心安神、補中益氣之功效。百合多糖與其他植物多糖一樣，具有較為廣泛的藥理作用，主要包括抗氧化、抗腫瘤、降血糖與免疫調(diào)節(jié)[1-13]。為促進百合多糖的進一步開發(fā)和應(yīng)用，該文研究了百合多糖的超聲波提取條件，并對超聲波提取百合多糖的最優(yōu)化工藝條件進行了研究。

1 材料與方法

1.1 原材料與主要試劑

百合產(chǎn)自湖南，符合2010年藥典。切小片。苯酚，濃硫酸（98%），正丁醇，氯仿，所用水為三級純水。

1.2 實驗方法

1.2.1 超聲波提取

取5.0 g百合碎片，加入蒸餾水，超聲波提取，濾去飽和殘渣，合并提取液，減壓濃縮至原溶液的1/4，加入5倍量無水乙醇沉淀，得到多糖粗品。將多糖粗品溶解，采用 Sevag法[14]除去蛋白質(zhì)，得到百合多糖。采用苯酚-硫酸[15]法測定多糖含量和得率。

1.2.2 苯酚-硫酸測定法

精密量取供試品溶液1mL，置具塞試管中，加水1.0mL，精密加入5%苯酚溶液1mL搖勻，迅速精密加入硫酸5mL，搖勻，放置10 min，置40 ℃水浴中保溫18 min，取出后迅速冷卻至試溫，以相應(yīng)的試劑為空白，照紫外-可見分光光度法，在490 nm的波長處測定吸光度。以Y=0.5423X+0.0154計算[15]。

2 超聲波提取工藝及優(yōu)化

使用超聲波細(xì)胞破碎儀進行超聲波提取，超聲波提取功率為500 w。

2.2.1 提取時間對多糖得率的影響

超聲波功率為500 w，稱取百合小片5.0 g，加入蒸餾水50 mL，料液比1：10，分別提取 10、20、30、40、50、60 min，測定多糖得率，結(jié)果如表1和圖1。

由圖1可見，在0～30 min，多糖的得率隨時間的增加而增加，這是由于超聲時間較短時，溶出物較少，多糖含量較低；隨時間增加，細(xì)胞膜破碎程度增強，溶出物增多，多糖得率也就增高。

當(dāng)時間大于30 min時，有效成分已完全溶出，細(xì)胞壁進—步破碎，雜質(zhì)相應(yīng)增加，多糖得率呈現(xiàn)下降趨勢。

2.2.2 料液比對多糖得率的影響

超聲波功率500 w，稱取百合小片5.0 g，分別加入30 mL，40 mL，50 mL，60 mL，75 mL，100 mL蒸餾水，提取30 min，合并提取液，得到百合多糖，測定其含量和得率。結(jié)果如表2和圖2。

由圖2可見，當(dāng)提取液固比在6∶1～10∶1時，多糖的得率隨料液比的增加而增加。隨后，得率隨液固比的增加而下降。在液固比為10∶1時得率最高，為2.9773%?？芍軇┝窟^小時多糖不能完全溶出；溶劑量稍大時，超聲波輻射可能被溶劑大量吸收，不能完全作用于物料，從而影響多糖得率。而當(dāng)溶劑量為1：20時，多糖得率又有大幅上升，可能此時多糖溶出較完全。

2.2.3 提取次數(shù)對多糖得率的影響

在超聲波功率500 w時，提取時間30 min，料液比1：10條件下，稱取百合小片5.0 g，研究提取次數(shù)對多糖得率的影響，見表3和圖3。

3 結(jié)語

百合多糖超聲波提取的影響因素很多，如料液比、提取時間、提取次數(shù)、提取溫度、超聲波頻率，但由于該實驗室超聲波提取設(shè)備的可調(diào)節(jié)因素的限制，該研究在超聲波功率固定為500 w，選取了影響百合多糖超聲波提取的3個主要影響因素進行試驗，通過單因素實驗初步研究了超聲波功率500 w時，百合多糖超聲波提取的條件，確定了超聲波功率500 w時，最優(yōu)條件為提取時間30 min，料液比1：10，提取次數(shù)1次，在此條件下，百合多糖得率為2.9773%。為百合多糖的進一步開發(fā)利用提供了實驗依據(jù)和有價值的參考。

參考文獻

[1] 中國科學(xué)院植物研究所.中國經(jīng)濟植物志（上冊）[M].北京：北京出版社，1961：629.

[2] 唐傳核，彭志英.天然功能性植物化學(xué)成分開發(fā)現(xiàn)狀[J].糧食與油脂，2001（3）：39-40.

[3] 胥京宜.百合的開發(fā)與利用[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，1999（4）：44.

[4] 劉成梅，付桂明，涂宗財，等.百合多糖降血糖功能研究[J].食品科學(xué)，2002，23 （6）：113-114.

[5] 翟范.抗癌明星百合[J].醫(yī)藥與保健，2001（10）：55.

[6] 張金炎，劉玲，劉小燕，等.百合藥用評價及加工方法[J].中國民間療法，1997 （5）：23.114-117.

[7] 劉成梅，付桂明，游海，等.百合多糖的純化與化學(xué)結(jié)構(gòu)鑒定研究[J].食品科學(xué)，2002，23（5）.

[8] 姜茹，匡永清，吳少華.百合免疫活性多糖的分離及其組成[J].第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報，1998，19（2）：188.

[9] 趙國華，李志孝，陳宗道.百合多糖的化學(xué)結(jié)構(gòu)及抗腫瘤活性[J].食品與生物技術(shù)，2002，21（1）：62-66.

[10] 張繼敏，匡永清，吳少華，等.百合多糖對小鼠免疫功能的影響[J].中國中醫(yī)藥科技，1996，3（5）：15-17.

[11] 苗明三，楊林莎.百合多糖免疫興奮作用[J].中藥藥理與臨床，2003，19（1）：15-16.

[12] 苗明三.百合多糖抗氧化作用研究[J].中藥藥理與臨床，2001，17（2）：12-13.

[13] 滕利榮，孟慶繁，劉培源，等.酶法提取百合多糖及其體外抗氧化活性[J].吉林大學(xué)學(xué)報：理學(xué)版，2003，41（4）：538-542.

[14] 吳立軍，吳繼洲.天然藥物化學(xué)（2003版）[M].北京：人民衛(wèi)生出社，2003.

[15] 聶凌鴻.淮山活性多糖的分離純化、結(jié)構(gòu)與生物活性的研究[D].廣州：華南理工大學(xué)食品科學(xué)院，2002.endprint