賽默飛世爾科技(以下簡(jiǎn)稱賽默飛)近日發(fā)布了基于全方位質(zhì)譜平臺(tái)的肉類(lèi)檢測(cè)解決方案,建立了從摻假發(fā)現(xiàn)到定量多肽選擇,以及定量實(shí)現(xiàn)的完整流程,并對(duì)發(fā)現(xiàn)的部分多肽進(jìn)行了摻假實(shí)驗(yàn)與定量能力考察。
目前最常用的肉類(lèi)檢測(cè)方法:基于核酸的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)(PCR)和基于抗體抗原結(jié)合的酶聯(lián)免疫法(ELISA)。前者受到DNA降解,復(fù)雜基質(zhì)的干擾和樣品提取與擴(kuò)增方法的影響,會(huì)對(duì)定性和定量的準(zhǔn)確性造成干擾;后者往往受制于抗體制備,加工過(guò)程中蛋白變性,復(fù)雜基質(zhì)和近親緣種屬之間同源干擾導(dǎo)致的假陽(yáng)性影響。
隨著生物質(zhì)譜技術(shù)的發(fā)展,大規(guī)模定性和定量研究蛋白表達(dá)譜的技術(shù)已經(jīng)成熟。因此利用質(zhì)譜技術(shù)尋找不同肉類(lèi)樣品特征性蛋白或者多肽,并進(jìn)行定量,能夠避免現(xiàn)在常用的PCR技術(shù)和ELISA所面臨的種種問(wèn)題,質(zhì)譜技術(shù)不受食品加工的過(guò)程影響,因?yàn)榘被嵝蛄斜群怂嵝蛄性诩庸み^(guò)程中更容易保存;同時(shí)實(shí)現(xiàn)定性與定量,避免假陽(yáng)性且定量結(jié)果更加準(zhǔn)確可靠;能夠同時(shí)監(jiān)測(cè)多種摻假。
賽默飛基于Thermo ScientificTM超高分辨Q Exactive質(zhì)譜平臺(tái),研究了5種常見(jiàn)肉類(lèi)彼此之間的特征性專屬多肽, 各自找到了數(shù)百條相對(duì)于其它4個(gè)物種的特征性多肽。選取其中找到的部分多肽,通過(guò)人為將幾種不同的肉類(lèi)進(jìn)行混合研究,模擬現(xiàn)實(shí)中摻假的情況,通過(guò)利用Thermo ScientificTM TSQ QuantivaTM三重四極桿質(zhì)譜儀建立了基于SRM(Selected Reaction Monitoring)的摻假比例定量方法。
基于實(shí)驗(yàn)結(jié)果,對(duì)于每一個(gè)物種,為避免假陰性的結(jié)果,賽默飛研究人員同時(shí)選取雞和鴨的6條特征性多肽,分別對(duì)兩種禽類(lèi)肉摻假進(jìn)行了監(jiān)測(cè),并確定了最低的摻假檢測(cè)限,遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)了實(shí)際檢測(cè)的需求。
與傳統(tǒng)基于PCR和抗體的檢測(cè)方法相比,質(zhì)譜具有大致相當(dāng)?shù)撵`敏度,擁有更好的避免假陰性與假陽(yáng)性結(jié)果的能力,且能夠避免由于加工所帶來(lái)的PCR或者抗體相關(guān)空間結(jié)構(gòu)破壞所帶來(lái)的影響。
與上述摻假相比,還有一種相對(duì)而言更為嚴(yán)重、性質(zhì)更惡劣的摻假——病死肉的摻假。基于上述方法,通過(guò)進(jìn)一步系統(tǒng)研究,質(zhì)譜也能夠成為一種監(jiān)測(cè)病死肉的手段,斬?cái)嗖∷廊饬魃喜妥赖哪ё?,與全方位的農(nóng)殘篩查與檢測(cè)手段一起,為食品安全提供全方位的保障。同時(shí),利用該研究方法還能幫助有機(jī)肉類(lèi)產(chǎn)品生產(chǎn)商,提供肉類(lèi)良種選擇依據(jù)及肉類(lèi)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)建立的可行性等。 (中國(guó)分析計(jì)量網(wǎng))