郭 珍 李 蕾 劉 靜 盛 剛

陜西中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院 (咸陽(yáng) 712000 )

頭痛寧膠囊對(duì)小鼠鎮(zhèn)痛抗炎作用的實(shí)驗(yàn)研究

郭 珍 李 蕾△劉 靜▲盛 剛◇

陜西中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院 (咸陽(yáng) 712000 )

目的：觀察頭痛寧膠囊對(duì)小鼠的鎮(zhèn)痛、抗炎作用，為頭痛寧膠囊的臨床應(yīng)用和藥物開發(fā)提供依據(jù)。方法：圍繞頭痛寧膠囊的主要藥效學(xué)研究，應(yīng)用機(jī)械性施壓刺激致小鼠鼠尾壓痛進(jìn)行鎮(zhèn)痛試驗(yàn)，應(yīng)用二甲苯致小鼠耳腫脹進(jìn)行了抗炎試驗(yàn)，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果：頭痛寧大、中劑量組小鼠鼠尾壓痛痛閾明顯高于空白組，頭痛寧大劑量組、中劑量組均有顯著的抑制小鼠耳腫脹的作用；并且大劑量對(duì)小鼠耳腫脹的抑制作用明顯。結(jié)論：頭痛寧膠囊對(duì)于機(jī)械刺激所致的疼痛具有鎮(zhèn)痛作用，具有一定的抗炎作用。

偏頭痛是一種常見和慢性的神經(jīng)-血管性疾患,流行病學(xué)顯示偏頭痛流行廣泛,并具有一定危害,它不僅因頻繁和嚴(yán)重的頭痛導(dǎo)致患者的學(xué)習(xí)與工作能力下降、生活質(zhì)量降低[1]，表現(xiàn)通常呈一側(cè)或兩側(cè)疼痛，常伴惡心、嘔吐。頭痛寧膠囊源自清·陳士鐸《辨證錄·頭痛篇》中“散偏湯”，是陜西省名中醫(yī)楊秀清教授在中醫(yī)理論指導(dǎo)下，在“散偏湯”基礎(chǔ)上加減化裁研制而成的純中藥制劑，藥物組成有川芎、生白芍、香附、地龍等九味藥物。本文通過(guò)藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)研究，觀察其鎮(zhèn)痛、抗炎的作用。

1 實(shí)驗(yàn)材料 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康昆明種小鼠50只，雌雄各25只，體重范圍在20±2g左右。由第四軍醫(yī)大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。適應(yīng)性飼養(yǎng)7d，按體重隨機(jī)分成空白組、陽(yáng)性對(duì)照正天丸組、頭痛寧膠囊大劑量組、頭痛寧膠囊中劑量組、頭痛寧膠囊小劑量組，每組10只。

1.2 藥物與實(shí)驗(yàn)儀器 1.2.1實(shí)驗(yàn)用藥及陽(yáng)性對(duì)照藥:頭痛寧膠囊，由陜西中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院制劑中心提供，配制成藥物混懸液后根據(jù)大中小劑量組0.5g/kg、1.0g/kg、2.0g/kg分組給藥。正天丸，由三九醫(yī)藥股份公司生產(chǎn)，每袋凈重6g，按小鼠體重1.736g/kg給藥。100%二甲苯：西安化學(xué)試劑廠。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器: YLS-3E電子壓痛儀：安徽淮北正華儀器有限公司。

2 實(shí)驗(yàn)方法 2.1頭痛寧膠囊對(duì)小鼠鼠尾壓痛閾值的影響[2]空白組灌胃生理鹽水0.2mL/10g，陽(yáng)性對(duì)照正天丸組灌胃正天丸0.2mL/10g；頭痛寧膠囊大、中、小劑量組，分別按0.2mL/10g灌胃。各組動(dòng)物每天灌胃給藥1次，連續(xù)用藥7d，末次給藥前禁食不禁水12h。各組末次給藥30min后，將小白鼠放入固定筒內(nèi)，露出鼠尾，調(diào)整好尾根部受壓位置(約離尾根1cm處)，用YLS-3E電子壓痛儀，逐加壓力于上，當(dāng)小鼠尾部受壓疼痛(指標(biāo)為四肢亂動(dòng)或足爪縮回，全身縮團(tuán)抖動(dòng))停止加壓。所加壓力重量即為痛閾值，痛反應(yīng)閾值可用重量(g)表示，測(cè)用藥前后的變化。

2.2 頭痛寧膠囊對(duì)二甲苯致小鼠耳腫脹的影響[3]空白組灌胃生理鹽水0.2mL/10g，陽(yáng)性對(duì)照正天丸組灌胃正天丸0.2mL/10g；頭痛寧膠囊大、中、小劑量組，分別按0.2mL/10g灌胃。各組動(dòng)物每天灌胃給藥1次，連續(xù)用藥7d，末次給藥前禁食不禁水12h。各組末次給藥30min后，用二甲苯(0.02mL/只)涂抹右耳兩面致炎。致炎2h后，頸椎脫臼處死小鼠，剪下小鼠耳片，分別稱重，并記錄左右耳重量差，其結(jié)果為耳腫的程度，取各組耳腫程度的均數(shù)與對(duì)照組作比較。并計(jì)算各組對(duì)耳腫脹的抑制率。抑制率=(空白組耳腫程度-給藥組耳腫程度)/空白組耳腫程度× 100%。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 3.1 頭痛寧膠囊對(duì)小鼠鼠尾壓痛痛閾值的影響 結(jié)果見表1。給藥前：各給藥組與空白組相比，均無(wú)明顯差異(P>0.05)。給藥后：頭痛寧大、中劑量組小鼠痛閾明顯高于空白組，有非常顯著性差異(P<0.01)；正天丸組與空白組比較有顯著性差異(P<0.01)；小劑量組與空白組比較無(wú)顯著性差異(P>0.05)；頭痛寧大劑量組在提高小鼠痛閾方面優(yōu)于正天丸組(P<0.01)；頭痛寧中、小劑量組與正天丸組相比無(wú)顯著差異(P>0.05)。表明頭痛寧膠囊大劑量組鎮(zhèn)痛作用較正天丸強(qiáng)。

表1 頭痛寧膠囊對(duì)小鼠鼠尾壓痛痛閾值的影響

注: 與空白組相比，▲P<0.05,◇P<0.01；與正天丸組相比，◆P>0.05,△P<0.01

3.2 頭痛寧膠囊對(duì)二甲苯致昆明種小鼠耳腫脹的影響 結(jié)果見表2顯示，與空白對(duì)照組比較，正天丸組、頭痛寧組大劑量組、中劑量組對(duì)于小鼠耳腫脹均有顯著的抑制作用；并且大劑量組對(duì)于小鼠耳腫脹的抑制作用明顯，有非常顯著差異(P<0.01)。小劑量組與空白組比較無(wú)顯著性差異(P>0.05)，說(shuō)明頭痛寧膠囊具有抗炎的藥效作用。并且頭痛寧大劑量組與正天丸組相比，抗炎作用強(qiáng)于正天丸組。

表2 頭痛寧膠囊對(duì)二甲苯致小鼠

注：與空白組相比較，▲表示P<0.01；△表示P<0.05

4 討 論 中醫(yī)藥在鎮(zhèn)痛方面有其獨(dú)到之處,尤其對(duì)輕度到中等程度疼痛有較好的鎮(zhèn)痛作用[4]。偏頭痛是一種疼痛性疾病，通過(guò)對(duì)頭痛寧膠囊的鎮(zhèn)痛作用的實(shí)驗(yàn)可以說(shuō)明其治療偏頭痛的有效性，小鼠鼠尾壓痛實(shí)驗(yàn)是通過(guò)采用機(jī)械性施壓刺激壓迫小鼠鼠尾而產(chǎn)生疼痛，表現(xiàn)為四肢亂動(dòng)或足爪縮回，全身縮團(tuán)抖動(dòng)。研究結(jié)果表明頭痛寧膠囊大、中劑量和正天丸均可以提高小鼠鼠尾壓痛痛閾,并且以大劑量組較為顯著，而且隨著頭痛寧膠囊劑量的增加小鼠鼠尾壓痛的痛閾也在隨之增加。本實(shí)驗(yàn)在首次給藥后30min觀察藥物的鎮(zhèn)痛作用，可以反映藥物的速效止痛效果，通過(guò)本實(shí)驗(yàn)表明，頭痛寧膠囊具有明顯的鎮(zhèn)痛作用，為頭痛寧膠囊用于快速緩解偏頭痛發(fā)作奠定了基礎(chǔ)。

偏頭痛發(fā)病機(jī)制中的三叉神經(jīng)血管學(xué)說(shuō)認(rèn)為誘發(fā)偏頭痛發(fā)作的各種因素可以引起血管的擴(kuò)張，當(dāng)血管擴(kuò)張時(shí)可以促使三叉神經(jīng)末梢釋出血管活性肽類物質(zhì)，如P物質(zhì)、降鈣素基因相關(guān)肽等，這些因素會(huì)引起神經(jīng)源性炎癥。因此研究頭痛寧膠囊的抗炎作用也可以說(shuō)明其治療偏頭痛的有效性。成功的藥物抗炎動(dòng)物模型，是研究抗炎藥物的關(guān)鍵。致炎劑的選擇需要滿足能精確定量測(cè)定、所致炎癥穩(wěn)定可靠和持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)等要求?，F(xiàn)有的動(dòng)物炎癥模型，根據(jù)炎癥不同進(jìn)程設(shè)計(jì)，包括以腫脹、滲出等為主要指標(biāo)的急性炎癥模型，以肉芽組織增生為主要指標(biāo)的慢性炎癥模型及免疫性炎癥模型[5]。二甲苯為無(wú)色澄清液體，涂抹于小鼠耳廓兩面后，由于其刺激作用，可引起鼠耳局部毛細(xì)血管充血，通透性增加，滲出增多，發(fā)生水腫，表現(xiàn)出紅、腫、熱、痛等癥狀。二甲苯的致炎作用又快又強(qiáng)，小鼠耳廓腫脹法不需特殊的設(shè)備，簡(jiǎn)便易行，實(shí)驗(yàn)時(shí)間短，模型復(fù)制成功率高，是應(yīng)用最多的研究藥物抗炎作用的模型之一。研究結(jié)果表明，頭痛寧膠囊大、中、小劑量及正天丸均有顯著的抑制小鼠耳腫脹的作用；并且大、中劑量對(duì)小鼠耳腫脹的抑制作用明顯并且三個(gè)劑量組具有明顯的劑量相關(guān)性，且大、中劑量比中成藥正天丸抗炎作用強(qiáng)，表明頭痛寧膠囊對(duì)急性炎癥有很好抑制作用,具有一定的抗炎作用。通過(guò)以上實(shí)驗(yàn)可見，頭痛寧膠囊具有較好的鎮(zhèn)痛及抗炎作用，這為其治療偏頭痛提供了一定的藥理學(xué)基礎(chǔ)。關(guān)于頭痛寧膠囊鎮(zhèn)痛抗炎作用的其他分子機(jī)制及對(duì)神經(jīng)遞質(zhì)的影響仍需進(jìn)一步研究。

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(收稿2015-06-29；修回2015-08-04)

偏頭痛/中醫(yī)藥療法 鎮(zhèn)痛 動(dòng)物實(shí)驗(yàn) 小鼠 @頭痛寧膠囊

R747.2

A

10.3969/j.issn.1000-7369.2015.11.052

△山西中醫(yī)學(xué)院第三中醫(yī)院(太原 030000)

▲延安大學(xué)咸陽(yáng)醫(yī)院(咸陽(yáng) 712000)

◇陜西省中醫(yī)醫(yī)院(西安 710000)