李成林 江會鎮(zhèn) 陳博靈 湖北中醫(yī)藥大學(xué) (武漢 430065)

扶芳藤益心方、益心方及扶芳藤對小鼠急性毒性影響試驗*

李成林 江會鎮(zhèn)△陳博靈▲湖北中醫(yī)藥大學(xué) (武漢 430065)

目的：觀察扶芳藤益心方、益心方及扶芳藤灌胃的急性毒性反應(yīng)。方法：將80只小鼠分為扶芳藤益心方組、益心方組、扶芳藤組、正常對照組，每組20只，雌雄各半。扶芳藤益心方組給予2.78g/mL扶芳藤益心方醇提物藥液；益心方給予1.79g/mL益心方醇提物藥液；扶芳藤組給予3.07g/mL扶芳藤醇提物藥液；正常對照組給予蒸餾水。依40mL/kg的給藥量(最大給藥量)灌胃給藥，對小鼠進行一次性灌胃給藥的急性毒性試驗。觀察小鼠異?；虿涣挤磻?yīng)、死亡及主要臟器異常病變。結(jié)果：扶芳藤益心方組及扶芳藤組小鼠給藥后出現(xiàn)靜伏少動、腹式呼吸癥狀，給藥5h后上述癥狀消失。余2組未見其他異?；虿涣挤磻?yīng)。各組均無小鼠死亡，14d后處死解剖未見主要臟器異常病變。結(jié)論：扶芳藤益心方醇提物小鼠一次性灌胃的最大給藥量為111.2g/kg，相當(dāng)于擬臨床人用藥的115倍，急性毒性小，使用較安全；益心方醇提物小鼠一次性灌胃的最大給藥量為71.6g/kg，相當(dāng)于擬臨床日用劑量153倍，急性毒性小，使用較安全；扶芳藤醇提物小鼠一次性灌胃的最大給藥量為122.8g/kg，相當(dāng)于擬臨床人用藥的246倍，急性毒性小，使用較安全。

扶芳藤益心方是筆者多年臨床運用的中藥復(fù)方，該方由扶芳藤、紅參、三七、石菖蒲等組成，在治療冠心病心絞痛方面療效顯著[1]。參照《藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范》(GLP)，對扶芳藤益心方及其拆方扶芳藤和益心方的藥品安全性進行小鼠急性毒性試驗，現(xiàn)報道如下。

1 材料和方法 1.1動 物 昆明小鼠，18～22g，雌、雄各半，SPF級，購于廣西醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)實驗動物中心，許可證號：SCXKG桂2009-0002。

1.2 供試藥物 扶芳藤益心方醇提物稠膏，每克膏含總藥材3.54g；益心方醇提物稠膏，每克膏含總藥材1.92g；扶芳藤醇提物稠膏，每克膏含總藥材4.52g。以上藥物均于廣西中醫(yī)藥大學(xué)制藥廠制劑室提純，原藥材由南寧市景昌中藥飲片有限公司提供，許可證號：桂20110150。試驗時用蒸餾水配制成能通過12號小鼠灌胃針的最大給藥量供小鼠灌胃。得到扶芳藤益心方醇提物藥液濃度為2.78g/mL；益心方醇提物藥液濃度為1.79g/mL；扶芳藤醇提物藥液濃度為3.07g/mL。

1.3 試驗方法 1.3.1預(yù)實驗：取禁食不禁水14h以上的小鼠雌雄各20只。分為扶芳藤益心方預(yù)實驗組、益心方預(yù)實驗組、扶芳藤預(yù)實驗組、正常對照預(yù)實驗組，每組雌雄各5只。扶芳藤益心方預(yù)實驗組給予扶芳藤益心方醇提物藥液；益心方預(yù)實驗組給予益心方醇提物藥液；扶芳藤預(yù)實驗組給予扶芳藤醇提物藥液；正常對照預(yù)實驗組給予蒸餾水。依40mL/kg的給藥量灌胃給藥，觀察1周，小鼠無一死亡，無法按照常規(guī)測定LD50，故進行最大給藥量測定。

1.3.2 最大給藥量測定：選取健康小鼠80只，雌雄各半，隨機分為扶芳藤益心方組、益心方組、扶芳藤組、正常對照組，共4組，每組20只，雌、雄各半。各組小鼠平均體重，差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。小鼠禁食不禁水14h后，給予扶芳藤益心方組2.78g/mL扶芳藤益心方醇提物藥液；益心方組1.79g/mL益心方醇提物藥液；扶芳藤組3.07g/mL扶芳藤醇提物藥液；正常對照組蒸餾水。按40mL/Kg的最大給藥量灌胃給藥，給藥后小鼠正常飼養(yǎng)。觀察小鼠的活動、飲食、皮毛、糞便等有無異常改變。觀察有無中毒癥狀及死亡，連續(xù)觀察2周。與給藥后1周和給藥后2周各復(fù)稱重一次，給藥2周稱重后，處死小鼠進行解剖，觀察主要臟器有無異常變化。

2 結(jié) 果 扶芳藤益心方組及扶芳藤組小鼠給藥后出現(xiàn)靜伏少動、腹式呼吸癥狀，給藥5h后上述癥狀消失。余2組活動、飲食、皮毛、二便等未見其他異常或不良反應(yīng)。各組均無小鼠死亡，觀察14d中各組體重增長情況見表1。14d后處死解剖未見主要臟器異常病變。扶芳藤益心方醇提物小鼠一次性灌胃的最大給藥量為111.2g/Kg，相當(dāng)于擬臨床人用藥的115倍；益心方醇提物小鼠一次性灌胃的最大給藥量為71.6g/Kg，相當(dāng)于擬臨床日用劑量153倍；扶芳藤醇提物小鼠一次性灌胃的最大給藥量為122.8g/Kg，相當(dāng)于擬臨床人用藥的246倍。

表1 各組小鼠體重增長率表

組 別劑量(kg)動物數(shù)(只)給藥后7d體重增長率(%)給藥后14d體重增長率(%)空白對照組等體積蒸餾水2040.667.1扶芳藤益心方組111.22043.374.1益心方組71.62042.268.2扶芳藤組122.82043.270.1

扶芳藤益心方醇提物小鼠一次性灌胃的最大給藥量為111.2g/Kg；益心方醇提物小鼠一次性灌胃的最大給藥量為71.6g/Kg，；扶芳藤醇提物小鼠一次性灌胃的最大給藥量為122.8g/Kg。除扶芳藤益心方及扶芳藤給藥后小鼠有一過性的靜伏少動，腹式呼吸外，無明顯其它不適。表明扶芳藤益心方、扶芳藤小鼠最大給藥量下急性毒性小，使用較安全；益心方小鼠最大給藥量下急性毒性小，使用安全。

3 討 論 扶芳藤益心方中，扶芳藤、人參、三七、石菖蒲均為公藥，其中君藥扶芳藤是特色壯藥，《中國壯醫(yī)學(xué)》載：“扶芳藤，辛、平，能通火路、龍路，舒筋脈，止出血，散瘀血，補虛。”《中藥大辭典》記載:扶芳藤能“補腎強筋，安胎，止血消瘀”。謝金鮮等研究單味扶芳藤對心血管時發(fā)現(xiàn)，扶芳藤可延長小鼠心肌缺血的存活時間，抑制血栓形成，改善去甲腎上腺素(NA)所致的腸系膜微循環(huán)障礙，并可擴張耳廓微血管[2]。臣藥人參，味甘、微苦,性平,入肺、脾、心經(jīng)，《神農(nóng)本草經(jīng)》指出：“人參有‘補五臟、安精神、定魂魄、止驚悸、除邪氣、明目開心益智’的功效。付雙全歸納了人參對心血管系統(tǒng)作用的藥理學(xué)機制有：改善血流動力學(xué)、抗氧化抑制心肌細胞凋亡、抑制心肌肥大、改善心室重構(gòu)、降壓、改善血管內(nèi)皮功能、抗心律失常、改善高脂血癥、保護心源性休克等[3]。三七總皂苷是三七主要生理活性成分，能有效地有利于血液流變學(xué)的正常功能，保證正常血黏度，防止血栓形成，改善微循環(huán)[4]。石菖蒲可降低血黏度、抑制血小板活性；可降血脂、抗血小板聚集、抗血栓形成[4,5]。實驗為以上三種制劑的安全性提供可靠依據(jù)，亦為下一步含藥血清制備提供了參考。

[1] 李成林,陳博靈,潘朝鋅,等.扶芳藤益心湯對氣虛血瘀型胸痹的臨床研究[J].廣西中醫(yī)藥，2013，37(4)：19-21.

[2] 謝金鮮,林啟云,班步陽.扶芳藤對心血管作用的實驗研究[J].廣西中醫(yī)藥,1999, 22(5): 51-53.

[3] 付雙全.人參的心血管作用藥理學(xué)研究進展[J].長春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2012,28(2):357-359.

[4] 方永奇,李 翎,吳啟端,等.β-細辛醚和冰片對大鼠缺血再灌注 腦損傷的保護作用[J].現(xiàn)代老年醫(yī)學(xué)與保健,2002,11(2):15- 81.

[5] PoplawskiJ,LozowickaB,DubisAT,et al.Synthesis and hypolipidemic and antiplatelet activities of alpha-asarone isomers in humans (in vitro),mice(invivo),andrats(invivo)[J].JMedChem,2000,43(20):3671-3674.

(收稿2014- 10-13；修回2014-11-12)

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@扶芳藤益心方 扶芳藤 動物，實驗 小鼠

R271.11

A

10.3969/j.issn.1000-7369.2015.02.059

*廣西衛(wèi)生廳壯瑤藥醫(yī)藥研究與開發(fā)(GZZY13-18)

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▲廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院(南寧 530023)