虢紅梅

陜西新藥技術(shù)開(kāi)發(fā)中心(西安710075)

梗舒膠囊活血化瘀實(shí)驗(yàn)研究*

虢紅梅

陜西新藥技術(shù)開(kāi)發(fā)中心(西安710075)

目的：通過(guò)不同的試驗(yàn)方法和動(dòng)物模型對(duì)梗舒膠囊的功能主治進(jìn)行驗(yàn)證，為臨床合理用藥提供依據(jù)。方法：采用測(cè)定血瘀大鼠血小板聚集率和粘附率的方法，觀察梗舒膠囊抗血小板聚集性和粘附性作用；采用大鼠頸總動(dòng)脈—頸外靜脈血流旁路血栓形成的方法，觀察了其體內(nèi)抗血栓作用；采用大鼠體外血栓形成試驗(yàn)的方法，觀察了其體外抗血栓作用。結(jié)果：梗舒膠囊可顯著降低實(shí)驗(yàn)性急性血瘀證大鼠血小板的聚集性和粘附性(P<0.05)；可明顯抑制大鼠頸總動(dòng)脈—頸外靜脈血流旁路血栓形成(P<0.01)；可明顯抑制大鼠體外血栓形成(P<0.01)。結(jié)論：梗舒膠囊具有抗血小板聚集及抗血栓作用。

中風(fēng)，又名卒中，包括現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中的腦梗塞(腦血栓形成，腦栓塞)，短暫性腦缺血發(fā)作等，與癌癥、心血管病同為目前人類(lèi)的三大最常見(jiàn)的死亡原因。隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的進(jìn)步，搶救存活率顯著提高，但有后遺癥和功能障礙的病人亦隨之增多，2/3的人中風(fēng)后致殘，生活不能自理，需要人照顧。因此，研究如何降低及減輕中風(fēng)后遺癥的發(fā)生，最大程度的降低及減輕后遺癥患者的致殘，具有一定的臨床意義。梗舒膠囊是選用經(jīng)典驗(yàn)方研制而成的新藥，對(duì)治療腦血栓所致的半身不遂，口眼歪斜等有獨(dú)到之處。

1 材 料 1.1 樣 品 梗舒膠囊(0.45g/粒)內(nèi)容物呈棕色粉末狀，1g約相當(dāng)于生藥5.1g，本單位自研，批號(hào)101125，實(shí)驗(yàn)時(shí)以蒸餾水配制各劑量濃度； 維腦路通片，山東兗州市大禹制藥有限責(zé)任公司產(chǎn)品，批號(hào) 110120；鹽酸川芎嗪注射液，北京第四制藥廠出品，批號(hào)：1106012；鹽酸腎上腺素注射液，武漢制藥(集團(tuán))股份有限公司產(chǎn)品，批號(hào)：1107681，普利生ADP誘導(dǎo)劑，批號(hào)20110507D；戊巴比妥鈉，中國(guó)醫(yī)藥(集團(tuán))上海化學(xué)試劑公司，批號(hào)F20110215。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SD大鼠(體重200～240g)，由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號(hào)：SCXK(陜)2007-001。

1.3 實(shí)驗(yàn)儀器 玻球型血小板粘附儀，無(wú)錫分析儀器廠生產(chǎn)； LBY—NJ2全自動(dòng)四通道血小板凝聚儀、LBY-S5血栓形成儀，北京普利生集團(tuán)生產(chǎn)。

2 方 法 2.1 對(duì)實(shí)驗(yàn)性血瘀大鼠血小板聚集性、粘附性的影響 取大鼠60只，雌雄各半，隨機(jī)分為6組，每組10只。分組為：溶劑對(duì)照組；血瘀模型組；模型+川芎嗪組(0.15g/kg)；模型+梗舒膠囊組(2、4、8g生藥/kg)。各組大鼠每天灌胃給藥1次，容量2mL/100g，連續(xù)7d。第7天末次給藥1h后，除溶劑組外各組大鼠均皮下注射0.001%鹽酸腎上腺素8μg/kg二次，二次間隔4h。其間，在第一次注射腎上腺素后2h，將大鼠浸入4℃冰水內(nèi)5min。試驗(yàn)當(dāng)日下午，各組大鼠再次灌胃給藥1次。隨后，各組大鼠統(tǒng)一停食(不禁水)。次日清晨，股動(dòng)脈采血，3.8%枸櫞酸鈉抗凝后，玻球型血小板粘附儀旋轉(zhuǎn)玻球瓶法測(cè)定血小板粘附率[1]；同時(shí)以ADP為聚集誘導(dǎo)劑(富含血小板血漿PRP中ADP的終濃度為0.4μmol/L),LBY—NJ2全自動(dòng)血小板聚集儀比濁法測(cè)定各組大鼠血小板最大聚集率[2]。試驗(yàn)時(shí)，室溫度控制在25±0.5℃。

2.2 梗舒膠囊對(duì)血栓的影響

2.2.1 對(duì)大鼠頸總動(dòng)脈——頸外靜脈血流旁路血栓形成的影響[3]:取大鼠50只，雄性，隨機(jī)分為5組，每組10只。分組為：溶劑對(duì)照組蒸餾水；維腦路通組0.15g/kg；梗舒膠囊組分別為2、4、8g生藥/kg。各組大鼠每天灌胃給藥1次，容量2mL/100g，連給7d。第7天末次給藥30min后，各組大鼠腹腔注射4%戊巴比妥鈉40mg/kg麻醉，背位固定后，分離氣管并插管，同時(shí)分離右側(cè)頸總動(dòng)脈及左側(cè)頸外靜脈。取一長(zhǎng)約7cm、由三段聚乙烯塑料管組成的套管(套管兩端塑料管的內(nèi)徑為1mm，中段內(nèi)徑為2mm)，內(nèi)置一條5cm長(zhǎng)的4號(hào)手術(shù)絲線(xiàn)(預(yù)先稱(chēng)其干重)。給套管內(nèi)充滿(mǎn)50u/mL肝素生理鹽水后，將其一端插入大鼠左頸外靜脈并結(jié)扎固定，從套管的另一端注入濃度為50u/mL的肝素生理鹽水50u/kg，然后將套管的此端插入右頸總動(dòng)脈并結(jié)扎固定。手術(shù)完成后松開(kāi)夾閉大鼠右頸總動(dòng)脈的動(dòng)脈夾開(kāi)放血流，使血液從右頸總動(dòng)脈流經(jīng)聚乙烯套管后進(jìn)入左頸外靜脈。15min后中斷血流，迅速取出手術(shù)絲線(xiàn)稱(chēng)重。以此時(shí)手術(shù)絲線(xiàn)的濕重減去其干重作為血栓重量，并求出血栓形成抑制率。

2.2.2 對(duì)大鼠體外血栓形成的影響[4]:取大鼠50只，雌雄各半，分組和給藥同2.2.1。第7天末次給藥1h后，將大鼠用4%戊巴比妥鈉40mg/kg腹腔注射麻醉后，每只大鼠從下腔靜脈取血1.8mL，立即注入內(nèi)徑4mm未加抗凝劑的血栓硅膠管內(nèi)，置于已恒溫37℃體外血栓儀中旋轉(zhuǎn)15min，取出血栓，濾紙吸去余血，測(cè)量血栓長(zhǎng)度。稱(chēng)濕重后，將血栓置于60℃烘箱中干燥30min后，稱(chēng)干重。

2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)。

3 結(jié) 果 3.1 對(duì)實(shí)驗(yàn)性血瘀大鼠血小板聚集性、粘附性的影響 見(jiàn)表1。

表1 梗舒膠囊對(duì)實(shí)驗(yàn)性血瘀大鼠血小板聚集性和粘附性的影響

注：與血瘀模型組比較,△P<0.05,▲P<0.01

結(jié)果表明，模型+梗舒膠囊各劑量組大鼠血小板粘附率、聚集率均低于血瘀模型組，與血瘀模型組比較，4g、8g/kg模型+梗舒膠囊劑量組血小板粘附率和聚集率均有顯著性差異(P<0.05或P<0.01)。說(shuō)明，梗舒膠囊可抑制其血小板聚集性和粘附性。

3.2 梗舒膠囊對(duì)血栓的影響

3.2.1 對(duì)大鼠頸總動(dòng)脈——頸外靜脈血流旁路血栓形成的影響,見(jiàn)表2。

表2 梗舒膠囊對(duì)大鼠頸總動(dòng)脈—頸外靜脈血流旁路血栓形成的影響

注：與溶劑對(duì)照組比較,▲P<0.01

結(jié)果表明，梗舒膠囊各劑量組大鼠血栓重量均低于溶劑對(duì)照組，且分別與溶劑對(duì)照組比較均有顯著性差異(P<0.01)。梗舒膠囊2、4、8g/kg三個(gè)劑量組大鼠血栓形成抑制率分別為36.50、47.93和53.60%。提示：梗舒膠囊具有體內(nèi)抗血栓作用。

3.2.2 對(duì)大鼠體外血栓形成的影響,見(jiàn)表3。

組 別劑量g/kgn血栓長(zhǎng)度cm濕重mg干重mg溶劑對(duì)照組108.52±3.06301.26±104.8992.55±28.29維腦路通組0.15104.53±2.30▲163.37±104.12▲53.47±26.20▲小劑量組2104.71±3.01▲167.43±100.99▲56.32±27.44▲中劑量組4104.38±2.39▲156.65±102.46▲50.32±26.65▲大劑量組8104.01±2.57▲149.37±102.14▲45.93±27.34▲

注：與溶劑對(duì)照組比較,▲P<0.01

結(jié)果表明，梗舒膠囊各劑量組能明顯抑制大鼠體外血栓的形成，與溶劑對(duì)照組相比有顯著性差異 (P<0.01)。提示：梗舒膠囊具有體外抗血栓作用。

4 討 論 試驗(yàn)分別觀察了梗舒膠囊對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血小板功能、血栓形成的影響。結(jié)果顯示，梗舒膠囊可降低實(shí)驗(yàn)性急性血瘀證大鼠血小板聚集性和粘附性；可抑制大鼠頸總動(dòng)脈—頸外靜脈血流旁路血栓形成；可抑制大鼠體外血栓的形成。提示，梗舒膠囊對(duì)腦血栓、腦栓塞等所致缺血性腦血管疾病具有防治作用。建議，可進(jìn)一步進(jìn)行抗腦缺血實(shí)驗(yàn)的研究。

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[4] 岳海濤，李金成，呂銘洋，等.紅花注射液對(duì)大鼠血栓形成的影響及其作用機(jī)制[J].中草藥，2011，42(8)：1585-1587.

(收稿2015-06-17；修回2015-07-08)

*國(guó)家科技型中小企業(yè)創(chuàng)新基金創(chuàng)新項(xiàng)目(10C26226113297)

梗舒膠囊 活血化瘀 大鼠 動(dòng)物 實(shí)驗(yàn)

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10.3969/j.issn.1000-7369.2015.10.093