(大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院 消化科，遼寧 大連116011)

徐夢(mèng)杳，劉麗娜，李春艷

大腸癌是最常見(jiàn)的消化道腫瘤之一，嚴(yán)重影響人類健康。近年來(lái)，隨著人們生活水平的提高及飲食習(xí)慣的改變，大腸癌在中國(guó)的發(fā)病率正在逐年攀升。大腸癌早期多無(wú)明顯癥狀，許多患者在確診時(shí)已是晚期，而大腸癌患者的生存和預(yù)后取決于腫瘤的檢出時(shí)間，早期診斷對(duì)于改善預(yù)后有重要作用。

目前大腸癌篩查的方法主要有糞便隱血試驗(yàn)和結(jié)腸鏡檢查。糞便隱血試驗(yàn)盡管減少了結(jié)腸癌相關(guān)的死亡率，卻缺乏相應(yīng)的敏感性和特異性［1］。結(jié)腸鏡檢查是大腸癌診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，但因結(jié)腸鏡為有創(chuàng)檢查，病人不適反應(yīng)多，依從性差，且費(fèi)用高，故不能用作大范圍篩查。尋找新的具有高敏感性和高特異性的腫瘤標(biāo)記物對(duì)結(jié)腸癌的早期診斷和病情監(jiān)測(cè)具有極其重要的意義。

大腸癌的發(fā)生是一個(gè)多因素、多階段和多基因的改變協(xié)同作用的過(guò)程，癌基因和抑癌基因的表達(dá)失調(diào)是結(jié)腸癌發(fā)生的分子基礎(chǔ)。微小RNAs (microRNAs 或miRNAs)是一類內(nèi)源性小片段非編碼的RNA 調(diào)控因子，可作為腫瘤抑制基因或癌基因參與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程。近年來(lái)的研究顯示，miRNA是有潛力的生物標(biāo)志物［2］。越來(lái)越多的研究表明，miRNA 與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、診斷、轉(zhuǎn)移有很大關(guān)系，miRNA 有望成為新的生物學(xué)標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)。近年來(lái)，miRNA 與大腸癌的關(guān)系引起越來(lái)越多學(xué)者的關(guān)注，成為當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。

1 miRNA 在大腸癌中的表達(dá)

研究發(fā)現(xiàn)，多種miRNAs 在大腸癌中表達(dá)。早在2003年，Michael 等［3］首先發(fā)現(xiàn)，miRNA 在大腸癌組織與正常結(jié)腸黏膜組織中的表達(dá)存在差異性，并明確miR-143 和miR -145 在大腸癌及癌前病變組織中的表達(dá)下調(diào)，表明它們或許是抑癌miRNA，抑癌miRNA 的缺失可能導(dǎo)致癌基因過(guò)度活躍，從而引起大腸癌的發(fā)生。Arndt 等［4］研究表明，與正常結(jié)腸黏膜組織相比，大腸癌有37 種miRNAs 具有差異性，其中一些miRNAs 的表達(dá)改變(包括miR-133a 表達(dá)缺失和miR-224 表達(dá)增加)與大腸癌的進(jìn)展相關(guān)。另一研究發(fā)現(xiàn)，與正常對(duì)照組相比，大腸癌患者血清中有6 種miRNA(miR-18a、miR-19、miR -19b、miR -15b、miR -29a、miR -335)顯著升高［5］。Bandrés 等［6］通過(guò)RT - PCR 技術(shù)對(duì)大腸癌和癌旁組織的156 個(gè)miRNA 的表達(dá)量進(jìn)行了檢測(cè)，確定了13 個(gè)異常表達(dá)的miRNA，其中最顯著的包括miR -31、miR -96、miR -135b、miR -183、miR-133b、miR-145，前三者的表達(dá)無(wú)論在組織水平還是細(xì)胞水平均上調(diào)，后兩者的表達(dá)下調(diào)。其中，miR-31 的表達(dá)水平還跟大腸癌的臨床分期密切相關(guān)。后來(lái)的學(xué)者應(yīng)用新的篩選工具發(fā)現(xiàn)了更多的miRNA，目前已發(fā)現(xiàn)有超過(guò)100 個(gè)miRNA 和大腸癌有關(guān)［7］。

2 miRNA 在大腸癌發(fā)生、發(fā)展中的作用

大腸癌的發(fā)生受到遺傳和環(huán)境因素的作用，涉及癌基因的上調(diào)與抑癌基因的下調(diào)或失活，整個(gè)過(guò)程表現(xiàn)為多基因、多步驟的協(xié)同累積作用。鑒于miRNA 對(duì)基因表達(dá)的廣泛影響，miRNA 與大腸癌的發(fā)生密切相關(guān)。大量研究表明，在癌組織中失調(diào)的miRNA 通過(guò)多種機(jī)制，包括染色體畸變，如擴(kuò)增、缺失、易位［8］、表觀遺傳因素如DNA 甲基轉(zhuǎn)移酶［9］、有缺陷的miRNA 加工機(jī)制［10］等，促成癌細(xì)胞異常的生物學(xué)行為，根據(jù)它們?cè)趷盒阅[瘤發(fā)展中的角色，miRNA 在大腸癌中可能起著癌基因或抑癌基因的作用。

2.1 miRNA 參與大腸癌細(xì)胞的生長(zhǎng)、凋亡

許多癌基因通過(guò)促進(jìn)細(xì)胞增殖及G1期向S 期過(guò)渡、逃避凋亡等方式發(fā)揮作用。以這類基因?yàn)榘袠?biāo)的miRNA 在癌組織中通常上調(diào)，從而促進(jìn)腫瘤的形成。如miRNA 家族miR-221/222 已經(jīng)被證實(shí)為促癌基因，在大腸癌組織中表達(dá)明顯上調(diào)，其靶標(biāo)是細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白p27kip1［11］。而許多抑癌基因如miR-34 家族在結(jié)腸癌組織細(xì)胞中調(diào)控著下游靶標(biāo)抗凋亡家族蛋白Bcl-2 的表達(dá)，Bcl-2 家族通過(guò)阻止線粒體細(xì)胞色素C 的釋放而發(fā)揮抗凋亡作用。抑癌基因miR -34 下調(diào)引起抗凋亡Bcl -2 蛋白的過(guò)度表達(dá)，參與大腸癌的發(fā)生［12］。

2.2 miRNA 參與大腸癌侵襲與轉(zhuǎn)移

侵襲與轉(zhuǎn)移是腫瘤最顯著的特點(diǎn)，同時(shí)也是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程，涉及多種癌基因、抑癌基因、黏附相關(guān)分子、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)基因、蛋白水解酶、細(xì)胞因子與調(diào)節(jié)因子等。目前研究發(fā)現(xiàn)，miRNA 通過(guò)以下機(jī)制參與大腸癌的侵襲與轉(zhuǎn)移:(1)調(diào)節(jié)大腸癌細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)及黏附力。Kong 等［13］證實(shí)miR -155 的表達(dá)上調(diào)可增加腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移力，其機(jī)制可能是miR-155 在TGF-13/Smad4 信號(hào)通路中通過(guò)下調(diào)其靶基因RhoA 的表達(dá)，誘導(dǎo)EMT 的發(fā)生，促進(jìn)大腸癌侵襲轉(zhuǎn)移。(2)調(diào)控癌基因、抑癌基因及大腸癌轉(zhuǎn)移基因的表達(dá)。研究發(fā)現(xiàn)，miR -21 與程序性死亡因子4 蛋白(PDCD4)基因在結(jié)腸癌組織中的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，其中PDCD4 蛋白的表達(dá)水平顯著低于正常結(jié)腸黏膜組織［14］。這說(shuō)明miR -21 可負(fù)向調(diào)控PDCD4 表達(dá)，從而導(dǎo)致大腸癌細(xì)胞侵襲、血管浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移的發(fā)生。(3)調(diào)節(jié)大腸癌細(xì)胞DNA甲基化模式。如miR-342 靶向抑制DNA 甲基轉(zhuǎn)移酶(DNMTl)的表達(dá)，抑制細(xì)胞增殖［15］。(4)調(diào)節(jié)大腸癌血管的生成。如miR -107 簇基因族可通過(guò)抑制低氧誘導(dǎo)因子的表達(dá)，間接促進(jìn)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)，從而促進(jìn)腫瘤血管的生成，導(dǎo)致大腸癌細(xì)胞發(fā)生侵襲與轉(zhuǎn)移［16］。

3 miRNA 在大腸癌診斷中的作用

研究表明，除了在大腸癌組織中可檢測(cè)到miRNA 表達(dá)外，患者的血漿或血清中也可檢測(cè)到miRNA，miRNA 有可能成為新的腫瘤診斷候選分子標(biāo)記物。源于腫瘤的miRNA 在血液中避開(kāi)了內(nèi)源性核糖核酸酶的活性，具有相當(dāng)穩(wěn)定的存在形式，這些腫瘤miRNA 可在福爾馬林固定標(biāo)本和患者的血液、體液標(biāo)本中穩(wěn)定表達(dá)，且目前包括熒光定量qRT -PCR 在內(nèi)的檢測(cè)手段使得miRNA 的檢測(cè)方便易行。因此，miRNA 作為新的腫瘤標(biāo)記物，對(duì)腫瘤的診斷將起到十分重要的作用［17］。

健康人血液中的100 多種miRNA 已得到確認(rèn)，其表達(dá)譜與大腸癌患者的幾種腫瘤特異性miRNA表達(dá)譜有明顯的差異。有學(xué)者通過(guò)與健康對(duì)照組比較，發(fā)現(xiàn)大腸癌患者血漿miRNA17 -3p 和miRNA-92a 的表達(dá)水平顯著升高，且這兩種miRNAs 的水平在手術(shù)切除腫瘤組織后顯著下降［18］，故其有望作為大腸癌患者診斷及術(shù)后監(jiān)測(cè)指標(biāo)。miR -29a 是大腸癌的另一診斷標(biāo)志物，它被證實(shí)可以區(qū)別出正常對(duì)照組與大腸癌及腺瘤，敏感性分別為69% 和62.25%，特異性分別為89.1%和84.7%，進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)表明，與腺瘤組相比較，miR -29a 在大腸癌患者血漿中的水平顯著提高，其表達(dá)與TNM 分期相關(guān)［19］。隨著對(duì)miRNA 的深入研究，根據(jù)血液中檢測(cè)的這種獨(dú)特的miRNA 表達(dá)譜，可對(duì)具有中等或高風(fēng)險(xiǎn)的腸息肉患者進(jìn)行監(jiān)測(cè)，從而減少對(duì)高危患者行腸鏡檢查的頻率。

有研究發(fā)現(xiàn)，大腸癌患者血清中存在69 種特異性miRNA;同時(shí)發(fā)現(xiàn)一組由14 種血清miRNA 組成的獨(dú)特表達(dá)譜在大腸癌中表達(dá)，而在肺癌中未發(fā)現(xiàn)其表達(dá)［20］。每種腫瘤都有特異的miRNA 的表達(dá)譜，進(jìn)一步說(shuō)明其與腫瘤分類和復(fù)發(fā)預(yù)測(cè)的關(guān)系，但miRNA 仍具有多種腫瘤重疊表達(dá)的特點(diǎn)，故只依據(jù)單一的miRNA 還不足以做出精確診斷，仍需在血液方面建立與健康人年齡相匹配的miRNA 表達(dá)譜，根據(jù)這些特異的miRNA 表達(dá)譜，對(duì)大腸癌高風(fēng)險(xiǎn)患者進(jìn)行監(jiān)測(cè)與診斷。

4 miRNA 與大腸癌治療反應(yīng)的關(guān)系

miRNA 是內(nèi)源性產(chǎn)生且具有對(duì)機(jī)體毒性小的特點(diǎn)，在臨床治療上有較好的應(yīng)用前景。由于目前發(fā)現(xiàn)的miRNA 在腫瘤中表達(dá)存在上調(diào)與下調(diào)，應(yīng)用miRNA 治療腫瘤主要有兩種策略:一類是針對(duì)于miRNA 表達(dá)上調(diào)的疾病，在治療中需要目標(biāo)miRNA與注射的互補(bǔ)RNA 序列相結(jié)合而失去活性、保持沉默，使疾病相關(guān)miRNA 下調(diào);另一類是包括許多腫瘤在內(nèi)的與miRNA 下調(diào)相關(guān)的疾病，在miRNA 類似物作用下使miRNA 上調(diào)，從而達(dá)到治療的目的。

在大腸癌患者治療中，對(duì)于那些上調(diào)的miRNA，目前公認(rèn)的治療方法是使miRNA 沉默，主要是應(yīng)用miRNA 寡核苷酸(AMO)。在生理?xiàng)l件下，AMO 可以利用所具有的miRNA 的互補(bǔ)序列與miRNA 緊密結(jié)合，這種結(jié)合較穩(wěn)定，不容易解離，從而可以有效地降低miRNA 的活性。

針對(duì)在腫瘤中下調(diào)的miRNA，轉(zhuǎn)染pre -miRNA 以糾正miRNA 的表達(dá)下調(diào)，從而抑制腫瘤細(xì)胞的增殖或誘導(dǎo)凋亡。Vidic 等［21］通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)，電轉(zhuǎn)染特異的miRNA，靶向作用于K -ras 突變體，可以降低腫瘤細(xì)胞的存活率，未見(jiàn)不良反應(yīng)。Liu等［22］對(duì)81 個(gè)大腸癌組織及配對(duì)正常組織中的miR-195 進(jìn)行測(cè)定，顯示其在癌組織中的水平顯著下調(diào)，進(jìn)一步將miR -195 體外轉(zhuǎn)染大腸癌細(xì)胞系HT29 后，結(jié)果顯示促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡。Ruzzo 等［23］用定量RT - PCR 技術(shù)在結(jié)腸癌組織和細(xì)胞系DLD-1、SW480、COLO -201 中均檢測(cè)到let -7 表達(dá)水平明顯降低，將let -7a -1 前體轉(zhuǎn)染入結(jié)腸癌細(xì)胞系DLD-1 和SW480，可觀察到劑量依賴性生長(zhǎng)抑制作用。

miRNA 也同樣影響著化療藥物的抗腫瘤作用。體外和體內(nèi)試驗(yàn)研究表明miR -129 可增加5 -Fu的細(xì)胞毒性效應(yīng)，從而提高腫瘤對(duì)5 - Fu 的敏感性［24］。miR-143 在結(jié)腸癌中表達(dá)下調(diào)，有研究發(fā)現(xiàn)，通過(guò)在結(jié)腸癌細(xì)胞中上調(diào)miR -143 的表達(dá)，間接通過(guò)Bcl-2 等蛋白的下調(diào)而增加了5 -Fu 的細(xì)胞毒性，從而達(dá)到更好的化療效果［25］。盡管有這些研究成果，還需要更多的研究去發(fā)現(xiàn)對(duì)大腸癌的治療更有幫助的miRNAs。

5 miRNA 在大腸癌預(yù)后判斷中的作用

越來(lái)越多的證據(jù)顯示對(duì)某些特殊的腫瘤來(lái)說(shuō)，miRNA 的表達(dá)方式是獨(dú)一無(wú)二的，故被認(rèn)為是一種潛在的癌癥預(yù)后評(píng)估標(biāo)志物。不同miRNA 的表達(dá)，有助于大腸癌的預(yù)后判斷。一項(xiàng)對(duì)按國(guó)際抗癌聯(lián)盟(UICC)標(biāo)準(zhǔn)治療的大腸癌患者的研究發(fā)現(xiàn)，miR -152 和miR-148 的表達(dá)水平與大腸癌患者的預(yù)后相關(guān)，二者表達(dá)水平越低，腫瘤病灶越大且分化程度較低［26］。Schetter 等［27］的研究中比較了兩組Ⅱ期結(jié)腸癌及毗鄰正常組織的miRNA 表達(dá)譜，發(fā)現(xiàn)37個(gè)miRNA 存在表達(dá)差異，其中miR -20、miR -21、miR -106、miR -181 和miR -203 可能與預(yù)后相關(guān)，并隨著其在腫瘤組織中的高表達(dá)，患者存活率降低。另有研究顯示，miR -320 和miR -498 表達(dá)水平高的Ⅱ期結(jié)腸癌患者比那些低表達(dá)的患者無(wú)復(fù)發(fā)生存期要短［28］。

此外，還有許多研究顯示miRNA 表達(dá)異常與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，如miR-129 和miR -137 在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的結(jié)腸癌患者中表達(dá)不同，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者的表達(dá)量高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者［29］。Alina 等［30］對(duì)110 例有復(fù)發(fā)和無(wú)復(fù)發(fā)的I 期和Ⅱ期大腸癌患者研究發(fā)現(xiàn)，在大腸癌I 期，所檢測(cè)的903 種miRNA 在大腸癌組織中的表達(dá)無(wú)論是在有復(fù)發(fā)組還是無(wú)復(fù)發(fā)組均沒(méi)有差異;而在大腸癌Ⅱ期，miRNA-29a 在大腸癌組織中表達(dá)下調(diào)者預(yù)后更好，生存時(shí)間更長(zhǎng)。上述研究表明，多種miRNA在大腸癌組織的表達(dá)與腫瘤的生長(zhǎng)、淋巴結(jié)和器官的轉(zhuǎn)移及病人的生存期有關(guān)，miRNA 有望成為大腸癌預(yù)后判斷的標(biāo)志物。

6 小 結(jié)

miRNA 在大腸癌的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移等過(guò)程中均起重要作用，進(jìn)一步明確miRNA 的作用機(jī)制將有助于了解大腸癌發(fā)生的分子生物學(xué)過(guò)程，為大腸癌的診斷、治療及預(yù)后提供新的思路。血清miRNA 作為分子標(biāo)志物，與腫瘤的生物學(xué)機(jī)制密切相關(guān)，具有無(wú)創(chuàng)、簡(jiǎn)單、便捷、易于普查等特點(diǎn)，可能有助于改進(jìn)疾病診斷，增加對(duì)預(yù)后估計(jì)的準(zhǔn)確性，因而擁有廣闊的發(fā)展前景。然而，miRNA 與其靶基因的相互作用是一個(gè)復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，既往研究結(jié)果亦顯示，一個(gè)miRNA 可以調(diào)節(jié)多個(gè)靶基因，一個(gè)靶基因又可以受多個(gè)miRNA 調(diào)節(jié)，二者關(guān)系錯(cuò)綜復(fù)雜，全面研究miRNA 的功能及構(gòu)建miRNA 的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)十分困難，有待于進(jìn)一步深入研究。

［1］ Flitcroft KL，Irwig LM，Carter SM，et al. Colorectal cancer screening:why immunochemical fecal occult blood tests may be the best option ［J］. BMC Gastroenterol，2012，12:Article 183.

［2］ Turchinovich A，Weiz L，Langheinz A，et al. Characterization of extracellular circulating microRNA［J］. Nucleic Acids Res，2011，39(16):7223 -7233.

［3］ Michael MZ，O＇Connor SM，VanHolst Pellekaan NG，et al. Reduced accumulation of specific microRNAs in colorectal neoplasia［J］. Mol Cancer Res，2003，(12):882 -891.

［4］ Arndt GM，Dossey L，Cullen LM，et al. Characterization of global microRNA expression reveals oncogenic potential of miR - 145 in metastatic colorectal cancer ［J］. BMC Cancer，2009，9:Article 374.

［5］ Giráldez MD，Lozano JJ，Ramírez G，et al. Circulating microRNAs as biomarkers of colorectal cancer:results from a genome- wide profiling and validation study［J］. Clin Gastroenterol Hepatol，2013，11(6):681 -688.

［6］ Bandrés E，Cubedo E，Agirre X，et al. Identification by Real-time PCR of 13 mature microRNAs differentially expressed in colorectal cancer and non-tumoral tissues［J］.Mol Cancer，2006，5:Article 29.

［7］ Wu WK，Law PT，Lee CW，et al. MicroRNA in colorectal cancer:from benchtop to bedside ［J］. Carcinogenesis，2011，32(3):247 -253.

［8］ Chim CS，Wong KY，Qi Y，et al. Epigenetic inactivation of the miR-34a in hematological malignancies［J］. Carcinogenesis，2010，31(4):745 -750.

［9］ Marquardt JU，F(xiàn)ischer K，Baus K，et al. Sirtuin -6 -dependent genetic and epigenetic alterations are associated with poor clinical outcome in hepatocellular carcinoma patients［J］. Hepatology，2013，58(3):1054 -1064.

［10］ 楊建軍，馬延磊，秦環(huán)龍. microRNAs 調(diào)控網(wǎng)絡(luò)在大腸癌發(fā)病機(jī)制中的研究進(jìn)展［J］. 世界華人消化雜志，2010，18(14):1478 -1484.

［11］ Tsunoda T，Takashima Y，Yoshida Y，et al. Oncogenic KRAS regulates miR - 200c and miR - 221/222 in a 3D-specific manner in colorectal cancer cells［J］. Anticancer Res，2011，31(7):2453 -2459.

［12］ Borralho PM，Kren BT，Castro RE，et al. MicroRNA-143 reduces viability and increases sensitivity to 5 -fluorouracil in HCT116 human colorectal cancer cells［J］. FEBS J，2009，276(22):6689 -6700.

［13］ Kong W，Yang H，He L，et al. MicroRNA-155 is regulated by the transforming growth factor β/Smad pathway and contributes to epithelial cell plasticity by targeting RhoA［J］. Mol Cell Biol，2008，28 (22):6773 -6784.

［14］ Chang K，Miller N，Kheirelseid EA，et al. MicroRNA-21 and PDCD4 expression in colorectal cancer［J］. Eur J Surg Oncol，2011，37(7):597 -603.

［15］ Wang H，Wu J，Meng X，et al. MicroRNA-342 inhibits colorectal cancer cell proliferation and invasion by directly targeting DNA methyltransferase 1［J］. Carcinogenesis，2011，32 (7):1033 -1042.

［16］ Yamakuchi M，Lotterman CD，Bao C，et al. P53 - induced microRNA-107 inhibits HIF-1 and tumor angiogenesis［J］. Proc Natl Acad Sci USA，2010，107(14):6334 -6339.

［17］ Mitchell PS，Parkin RK，Kroh EM，et al. Circulating microRNAs as stable blood-based markers for cancer detection［J］. Proc Natl Acad Sci USA，2008，105(30):10513 -10518.

［18］ Ng EK，chong WW，Jin H，et al. Differential expression of microRNAs in plasma of patients with colorectal cancer apotential marker for colorectal cancer screening ［J］.Gut，2009，58 (10):1375 -1381.

［19］ Huang ZH，Huang D，Ni SJ，et al. Plasma microRNAs are promising novel biomarkers for early detection of colorectal cancer ［J］. Int J Cancer，2010，127(1):118 -126.

［20］ Chen X，Ba Y，Ma LG，et al. Characterization of microRNAs in serum:a novel class of biomarkers for diagnosis of cancer and other diseases［J］. Cell Res，2008，18(10):997 -1006.

［21］ Vidic S，Markelc B，Sersa G，et al. MicroRNAs targeting mutant K -ras by electrotransfer inhibit human colorectal adenocarcinoma cell growth in vitro and in vivo ［J］.Cancer Gene Ther，2010，17(6):409 -419.

［22］ Liu L，Chen L，Xu Y，et al. microRNA -195 promotes apoptosis and suppresses tumorigenicity of human colorectal cancer cells ［J］. Biochem Biophys Res Commun，2010，400(2):236 -240.

［23］ Ruzzo A，Graziano F，Vincenzi B，et al. High let -7a microRNA levels in KRAS - mutated colorectal carcinomas may resue anti - EGFR therapy effects in patients with chemotherapy - refractory metastatic disease ［J］.Oncologist，2012，17(6):823 -829.

［24］ Karaayvaz M，Zhai H，Ju J. miR-129 promotes apoptosis and enhances chemosensitivity to 5 - fluorouracil in colorectal cancer ［J］. Cell Death Dis，2013，4(6):e659.

［25］ Borralho PM，Kren BT，Castro RE，et al. MicroRNA -143 reduces viability and increases sensitivity to 5 -fluorouracil in HCT116 human colorectal cancer cells［J］.FEBS J，2009，276(22):6689 -6700.

［26］ Chen Y，Song Y，Wang Z，et al. Altered expression of MiR-148a and MiR-152 in gastrointestinal cancers and its clinical significance［J］. J Gastrointest Surg，2010，14(7):1170 -1179.

［27］ Schetter AJ，Leung SY，Sohn JJ，et al. MicroRNA expression profiles associated with prognosis and therapeutic outcome in colon adenocarcinoma ［J］. JAMA，2008，299(4):425 -436.

［28］ Schepeler T，Reinert JT，Ostenfeld MS，et al. Diagnostic and prognostic microRNAs in stage II colon cancer［J］.Cancer Res，2008，68(15):6416 -6424.

［29］ Huang ZM，Yang J，Shen XY，et al. MicroRNA expression profile in non - cancerous colonic tissue associated with lymph node metastasis of colon cancer ［J］. J Dig Dis，2009，10(3):188 -194.

［30］ Alina WB，Michal K，Gila LY，et al. Tumor microRNA-29a expression and the risk of recurrence in stage II colon cancer［J］. Int J Oncol，2012，40(6):2097 -2103.