楊曉波，周璐坤，張方瓊

（1.中國(guó)人民解放軍第二五三醫(yī)院檢驗(yàn)科，內(nèi)蒙古呼和浩特 010051；2.湖北秭歸縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖北秭歸 443600）

呼吸道感染苛養(yǎng)菌的分布及耐藥特點(diǎn)

楊曉波1，周璐坤1，張方瓊2

（1.中國(guó)人民解放軍第二五三醫(yī)院檢驗(yàn)科，內(nèi)蒙古呼和浩特 010051；2.湖北秭歸縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖北秭歸 443600）

目的了解該院呼吸道感染苛養(yǎng)菌的分布及耐藥性分析，更好地服務(wù)臨床，為臨床診療提供參考依據(jù)。方法該院2012年1月至2014年11月從呼吸道感染患者痰共分離培養(yǎng)得到173株病原菌，選用法國(guó)梅里埃公司的API鑒定系統(tǒng)進(jìn)行鑒定；藥敏試驗(yàn)使用K-B法，選用英國(guó)Oxoid公司的MH瓊脂、血瓊脂平板和藥敏紙片進(jìn)行。結(jié)果在1 374株呼吸道感染患者痰培養(yǎng)中分離出苛養(yǎng)菌173株，其中未發(fā)現(xiàn)對(duì)青霉素中介或耐藥的肺炎鏈球菌。卡他莫拉菌、流感嗜血桿菌對(duì)四環(huán)素的敏感率達(dá)80%以上，然而對(duì)肺炎鏈球菌的耐藥率則高達(dá)80%；肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌對(duì)環(huán)丙沙星和左氧氟沙星的敏感率為100%；流感嗜血桿菌對(duì)第三代頭孢菌素的敏感率為100%。結(jié)論對(duì)于苛養(yǎng)菌的感染，臨床治療應(yīng)根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果，合理選用抗菌藥物，以有效提高治愈率。

呼吸道感染； 苛養(yǎng)菌； 卡他莫拉菌； 肺炎鏈球菌； 流感嗜血桿菌； 耐藥性分析

苛養(yǎng)性菌是一類生長(zhǎng)需要特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的細(xì)菌，與許多感染性疾病有關(guān)，其分離培養(yǎng)較為困難，又稱為“難培養(yǎng)的細(xì)菌”。卡他莫拉菌、流感嗜血桿菌和肺炎鏈球菌都是臨床上較為常見的呼吸道感染的苛養(yǎng)菌，當(dāng)機(jī)體免疫力低下時(shí)，可引起呼吸道相關(guān)性疾病，如肺炎、支氣管炎、急性中耳炎等，另外這些苛養(yǎng)菌還可以隨著血液循環(huán)侵入到組織內(nèi)部，引發(fā)腦膜炎、菌血癥和心內(nèi)膜炎等［1］。因此，對(duì)苛養(yǎng)性細(xì)菌的分離鑒定和藥敏試驗(yàn)不僅是臨床迫切的需要，也是衡量臨床微生物實(shí)驗(yàn)室技術(shù)水平的重要標(biāo)志。筆者對(duì)本院2012年1月至2014年11月分離得到的173株苛養(yǎng)菌的臨床特點(diǎn)及耐藥性進(jìn)行分析，旨在為臨床合理選用抗菌藥物提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2012年1月至2014年11月，本院臨床共對(duì)門診和住院的呼吸道感染患者的痰標(biāo)本共1 374例進(jìn)行分離培養(yǎng)，苛養(yǎng)菌共計(jì)173株，卡他莫拉菌53株，肺炎鏈球菌89株，流感嗜血桿菌31株。其中門診患者66例（4.8%），住院患者1 308例（95.2%）；男性共145例，女性共28例，平均年齡為76.8歲。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 門診患者在采集痰標(biāo)本前先用清水或雙氧水（30.0 mL/L）漱口，住院患者需在晨起后先用清水和雙氧水（30.0 mL/L）漱口，然后進(jìn)行深咳，棄用第一口痰，保留第二口痰，進(jìn)行痰涂片鏡檢，合格標(biāo)本的要求：白細(xì)胞大于25個(gè)/低倍鏡視野、鱗狀上皮細(xì)胞小于10個(gè)/低倍鏡視野或者鱗狀上皮細(xì)胞/白細(xì)胞小于0.4，或者是經(jīng)過(guò)無(wú)菌毛刷刷取的痰標(biāo)本。采集的標(biāo)本應(yīng)迅速接種到血瓊脂平板和巧克力瓊脂平板，放入35℃、5%CO2的培養(yǎng)箱孵育18～24 h，再進(jìn)行常規(guī)分離培養(yǎng)。

1.2.2 細(xì)菌鑒定和藥敏試驗(yàn) 按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第三版對(duì)所有標(biāo)本進(jìn)行分離、培養(yǎng)，嚴(yán)格按照無(wú)菌操作技術(shù)規(guī)范，同時(shí)接種血瓊脂平板和巧克力平板。采用上海新苗 WJ-160A-Ⅲ型CO2培養(yǎng)箱，力康HFsafe-1200生物安全柜。將分純的菌株選用法國(guó)梅里埃公司的API鑒定系統(tǒng)進(jìn)行鑒定；選用英國(guó)Oxoid公司的MH瓊脂、血瓊脂平板和藥敏紙片進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌的藥敏結(jié)果按照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（CLSI）2013年版標(biāo)準(zhǔn)判斷結(jié)果，卡他莫拉菌的藥敏結(jié)果按照CLSI的2010年M45-A2版標(biāo)準(zhǔn)判定結(jié)果。

1.2.3 質(zhì)控菌株 采用流感嗜血桿菌ATCC49247，肺炎鏈球菌ATCC49619標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行質(zhì)控，質(zhì)控合格方可進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。

1.2.4 β-內(nèi)酰胺酶檢測(cè) 采用頭孢硝噻吩紙片定性檢測(cè)流感嗜血桿菌和卡他莫拉菌的β-內(nèi)酰胺酶。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用Whonet5.6系統(tǒng)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

2 結(jié) 果

2.1 細(xì)菌分布 2012年1月至2014年11本院痰標(biāo)本中共分離173株苛養(yǎng)菌，其中卡他莫拉菌53株，肺炎鏈球菌89株，流感嗜血桿菌31株。各年度苛養(yǎng)菌的分布情況詳見表1。

2.2 藥敏試驗(yàn) 卡他莫拉菌、肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌對(duì)15種抗菌藥物的藥敏試驗(yàn)結(jié)果見表2。檢測(cè)出產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶的卡他莫拉菌41株，流感嗜血桿菌9株。

3 討 論

呼吸道感染（RTI）是一種常見多發(fā)病，高居門診就診患者人數(shù)的首位［2］?？琉B(yǎng)菌主要引起RTI，通常以冬季帶菌率較高，發(fā)病也增多。據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國(guó)每年有近5億人感染呼吸系統(tǒng)疾病，7歲以下兒童平均每人每年患急性呼吸道感染3～4次［3］。呼吸道感染是抗菌藥物使用頻率最高、用量最多的疾病。對(duì)于肺部重癥感染的患者，至關(guān)重要的是從痰培養(yǎng)中及時(shí)找出病原菌，使臨床快速準(zhǔn)確地選擇抗菌藥物，能夠?qū)颊哌M(jìn)行有效的治療。

本次分析結(jié)果如表2所示，在1 374株呼吸道感染患者痰培養(yǎng)中分離出苛養(yǎng)菌173株，其中肺炎鏈球菌對(duì)萬(wàn)古霉素的敏感率100%，并且未發(fā)現(xiàn)對(duì)青霉素中介或耐藥?？ㄋ⒘鞲惺妊獥U菌對(duì)四環(huán)素的敏感率達(dá)80%以上，然而對(duì)肺炎鏈球菌的耐藥率則高達(dá)80%；肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌對(duì)環(huán)丙沙星和左氧氟沙星的敏感率為100%，喹諾酮類藥物適合成人使用，但由于其腎毒性作用不適合用于兒童；流感嗜血桿菌對(duì)第三代頭孢菌素和利福平的敏感率為100%。對(duì)阿莫西林/克拉維酸的敏感率為90.0%，較之氨芐西林的敏感率（68.5%）提高了21.5%左右，這與國(guó)內(nèi)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道基本相近［4-6］。另外，卡他莫拉菌對(duì)紅霉素和阿奇霉素的敏感率為100.0%?？ㄋa(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶率高達(dá)77.3%，β-內(nèi)酰胺酶的產(chǎn)酶率不斷增高，在1976年前，世界上并無(wú)產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶流行菌株的報(bào)道，然而20世紀(jì)80年代后期，英國(guó)報(bào)道90.0%的卡他莫拉菌產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶。在中國(guó)臺(tái)灣有97.8%的產(chǎn)酶菌株的報(bào)道［7］。RTI疾病治療的關(guān)鍵在于及時(shí)地明確致病菌和合理使用抗菌藥物。然而，由于濫用抗菌藥物，導(dǎo)致患者菌群失調(diào)，耐藥菌株逐年增多，耐藥菌感染逐漸成為除癌癥、心腦血管疾病和AIDS外威脅人類生命健康的第四大醫(yī)學(xué)問(wèn)題［8］。

目前，本院仍然存在以下問(wèn)題：由于臨床對(duì)微生物學(xué)檢驗(yàn)的重要性認(rèn)識(shí)不足，導(dǎo)致留取標(biāo)本的合格率低；對(duì)于回報(bào)的檢驗(yàn)結(jié)果，臨床總以個(gè)人的“標(biāo)準(zhǔn)”加以衡量，受控于經(jīng)驗(yàn)性用藥的理念，致使耐藥菌株不斷增多的問(wèn)題更加棘手，還時(shí)常被能夠選擇的抗菌藥物較少而困擾；相應(yīng)的檢驗(yàn)設(shè)備和科研條件不足等，以上都是限制本院病原學(xué)診斷發(fā)展的重要影響因素。綜上所述，苛養(yǎng)菌引起的呼吸道感染，臨床治療應(yīng)按照《抗菌藥物臨床應(yīng)用管理辦法》，根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果，合理使用抗菌藥物，以有效提高治愈率［9-12］。

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10.3969/j.issn.1673-4130.2015.17.049

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1673-4130（2015）17-2566-02

2015-04-08）