劉翠盈

雞腿菇菌種簡易制作技術

劉翠盈

為適應我縣“調整農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)結構，大力發(fā)展食用菌生產(chǎn)”的需要，我縣農(nóng)業(yè)局于2009年12月創(chuàng)建食用菌菌種廠，我們利用簡單的設備低成本進行了雞腿菇、雙孢菇、姬菇等食用菌的母鐘、原種、栽培種制作，摸索出了一套成功的菌種制作技術，現(xiàn)以雞腿菇為例介紹如下：

一、母種組織分離與培養(yǎng)

1、母種培養(yǎng)基配制。培養(yǎng)基配方：馬鈴薯200克、葡萄糖20克、瓊脂20克、硫酸鎂0.5克、磷酸二氫鉀3克、VB110毫克、水1000毫升、pH值自然，馬鈴薯去皮去芽后切塊，文火煮沸30分鐘，用2—4層紗布過濾，取濾液，將稱好剪碎的瓊脂放入其中，文火加熱不斷攪拌到瓊脂全部溶化。加入稱好的葡萄糖、硫酸鎂、磷酸二氫鉀、VB1等藥品，補足水分到1000毫升，趁熱分裝試管，裝量為試管長度的1/5—1/4。塞好棉塞，每5支試管用一張牛皮紙包扎棉塞部分，然后套上膠皮套成一把。

2、母種培養(yǎng)基滅菌。把上述捆成一把的試管培養(yǎng)基立放于手提式滅菌鍋內加熱，徹底排除冷空氣后，在不超過120℃、0.0964兆帕的壓力下維持30分鐘，切斷火源，壓力自然降到零時，微開蓋15分鐘，取出試管擺成斜面，并注意抽樣檢查滅菌是否徹底。

3、接種箱消毒。選擇商品性狀優(yōu)良、生長旺盛、菇體發(fā)育正常、無病蟲害的幼嫩菇體作為種菇。種菇去腳連同0.1%升汞水溶液、無菌水、酒精燈、接種針、上述滅過菌的斜面培養(yǎng)基、75%的酒精及棉球一同放入接種箱內。爾后點燃保菇王氣霧消毒劑3—4克/立方米，密閉半小時，雜菌殺滅率可達99.99%。

4、母種組織分離與培養(yǎng)。用75%的酒精棉球擦手消毒后，即可進入上述已消毒的接種箱操作：再次用75%的酒精棉球擦手，擦接種針，點燃酒精燈，接種針火燃滅菌。種菇浸入0.1%升汞水溶液中一分鐘，無菌水沖洗三次，將種菇縱向切開，用灼燒、冷卻以后的接種針挑取蓋與柄交界處綠豆粒大小的一塊組織移接到斜面培養(yǎng)基表面，塞好棉塞，放到24—26℃恒溫箱或培養(yǎng)室培養(yǎng)，7—8天菌絲即可長滿管。

轉管純化。將接種必備用具如酒精燈、接種針、待接試管等放于接種箱內，密閉氣霧消毒30分鐘，再將上述長滿菌絲的試管用75%的酒精經(jīng)表面消毒后帶入接種箱，用灼燒、冷卻以后的接種針挑取一小塊菌絲（連同培養(yǎng)基）移接到待接斜面上。一只試管可移接20—30支母管，放24—26℃恒溫箱或培養(yǎng)室培養(yǎng)，7—8天潔白濃密的菌絲即長滿管而得母鐘。

二、原種制作與培養(yǎng)

1、原種培養(yǎng)基配制。配方：麥粒10千克，輕質碳酸鈣30克,石膏120克。麥粒預浸4—6小時，爾后煮沸到麥粒熟透無白心而不開花，撈出控水，拌入稱好的輕質碳酸鈣和石膏，裝瓶（輸液用500毫升玻璃瓶）到瓶肩處，擦凈瓶口內外，塞好棉塞，牛皮紙包扎棉塞部分，套上膠皮帶套。

2、原種培養(yǎng)基滅菌。把瓶裝培養(yǎng)基放入手提式滅菌鍋內，每鍋可裝13—14瓶。徹底排除冷空氣后，在128℃、0.147兆帕的壓力下維持2小時，切斷火源，壓力自然降到零，微開蓋烤干棉塞后取出瓶，放清潔處防治污染，并注意抽樣檢查滅菌是否徹底。

3、接種箱消毒。將已滅過菌的原種培養(yǎng)基、接種必備工具如酒精燈、接種針、75%的酒精及棉球一同放入接種箱，點燃保菇王氣霧消毒劑3-4克/立方米，密閉半小時后即可接種。

4、原種接種及培養(yǎng)。將母種試管表面用75%酒精棉球消毒后帶入接種箱，點燃酒精燈，接種針火燃滅菌，待接種針冷卻后，挑取母種試管內1—2塊菌絲（連同培養(yǎng)基）放入原種培養(yǎng)基表面，塞好棉塞。一支母種可接4—8瓶原種，放適宜條件下培養(yǎng)，15—20天菌絲即長滿瓶。

三、栽培種制作與培養(yǎng)

1、栽培種培養(yǎng)料配制。配方：棉皮50千克、麥麩5千克、石灰1千克、水75千克。雞腿菇適宜在發(fā)酵培養(yǎng)料上生長，發(fā)酵方法：將原料稱足，石灰溶于水拌入料中，充分拌勻，調整含水量在70%。料拌好后建高、寬各1.5米，長不限的料堆，為方便通氣，堆要松且腰間扎孔，待堆內溫度上升到65℃以上，等36個小時翻堆，上下內外翻動，使料換位，堆成原來堆形。料溫又升到65℃以上，再等36個小時發(fā)酵結束。調整含水量在65%。采用直經(jīng)15厘米、長30厘米、厚5—6um的聚丙烯塑料袋裝料，兩頭扎口后等待滅菌。

2、栽培種培養(yǎng)料滅菌。栽培種用種量大可在自制的常壓滅菌鍋內滅菌。栽培種袋分層置于常壓滅菌鍋內，鍋內加水煮沸，灶門中部溫度達到100℃時計時，保持100℃10—12個小時后封火，維持6—8小時，然后取出袋放到接種室內。

3、接種室及緩沖間消毒。工作服、鞋、帽、口罩、75%酒精及棉球置于緩沖間，已滅菌的栽培種袋，75%的酒精及棉球、接種鋤等置于接種室火爐旁。緩沖間、接種室分別按每立方米空間用甲醛10毫克和高錳酸鉀5克進行熏蒸消毒，方法：將高錳酸鉀放入容器內，然后注入甲醛溶液。密閉熏蒸24小時。

驅除室內殘余甲醛氣體：密閉熏蒸24小時后，室內殘余甲醛氣體對人眼睛有刺激作用，可用下列方法驅除：取濃度為25—28%的氨水，用量是甲醛用量的一半，或用碳酸氫銨5克/立方米空間進行熏蒸中和，半小時后，即可進入室內工作。

4、栽培種接種及培養(yǎng)。將原種瓶帶入緩沖間，用75%的酒精擦手及原種瓶表面，換上工作服，戴上口罩，將原種瓶帶入接種室接種。接種可以3—4人圍坐火爐旁，一人持原種瓶，用接種鋤去掉原種表層的培養(yǎng)料及菌絲后向栽培種袋內倒麥粒原種，另外2—3人解口、扎口。兩頭接種，一瓶原種接栽培種30—40袋。注意操作前應再次用75%酒精棉球擦手、擦瓶口、擦接種鋤，鋤頭在爐火內燒紅滅菌，冷卻，并且接種工作嚴格在爐火上方形成的無菌區(qū)內進行，嚴防人員過頻走動。接種后放適宜條件下培養(yǎng)，20—30天菌絲即可長滿袋。經(jīng)出菇試驗即可用于生產(chǎn)。

四、菌種培養(yǎng)期間的管理

1、創(chuàng)造合適的生育條件。原種和栽培種接種后都要置于24—26℃、空氣相對濕度60%、光線較弱的培養(yǎng)室內培養(yǎng)，并根據(jù)室內溫度和空氣濕度通風換氣。

2、培養(yǎng)室消毒。培養(yǎng)室在放入菌種之前首先進行甲醛、高錳酸鉀熏蒸消毒，方法同接種室消毒。之后，應隔6—10天室內噴灑一次5%石碳酸，每隔2—4天于瓶（袋）口噴一次石碳酸或其他消毒液，防止雜菌發(fā)生與污染。

3、隨時和定期檢查有無雜菌發(fā)生。一般在接種培養(yǎng)后的第三天開始檢查有無雜菌發(fā)生，第六到第七天進行一次全面檢查，之后隨時檢查，及時剔出污染的瓶（袋）。菌絲吃料后，結合查雜菌，同時改瓶(袋)立放為臥放，并經(jīng)常改變位置，以便使培養(yǎng)料內水份均勻一致，有利于菌絲生長。

（作者單位：新河縣農(nóng)業(yè)局蔬菜站）