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        小細(xì)胞和非小細(xì)胞肺癌晚期患者CD3 + CD4 + 及CD3 + CD8 + T 淋巴細(xì)胞亞群的差異

        2015-03-18 11:43:28吳姍姍鄧玉玲于臘梅遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院臨床檢驗中心沈陽110032
        中國免疫學(xué)雜志 2015年1期
        關(guān)鍵詞:亞群外周血機體

        吳姍姍 嚴(yán) 峰 鄧玉玲 于臘梅 (遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院臨床檢驗中心,沈陽 110032)

        肺癌是當(dāng)今惡性腫瘤所致死亡的高風(fēng)險因素之一,因為早期階段并無顯著的臨床特點和癥狀,也沒有特異性強的檢查手段[1]。所以大多數(shù)肺癌患者在確定診斷時已處于進(jìn)展階段,進(jìn)而嚴(yán)重影響了患者治療的效果和預(yù)后。機體抗腫瘤以細(xì)胞免疫為主,T 細(xì)胞是機體抗腫瘤免疫的重要效應(yīng)細(xì)胞,并通過功能各異的淋巴細(xì)胞亞群來完成免疫調(diào)控機能。成熟的T 淋巴細(xì)胞根據(jù)其表面表達(dá)不同的CD 分子分為CD3+CD4+T 細(xì)胞和的CD3+CD8+T 細(xì)胞。T細(xì)胞亞群可反映機體細(xì)胞免疫的水平[2]。肺癌根據(jù)病理類型不同分為小細(xì)胞肺癌(Small cell lung cancer,SCLC)和非小細(xì)胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC),非小細(xì)胞肺癌包括鱗癌和腺癌。

        1 材料與方法

        1.1 材料

        1.1.1 研究對象 65 例患者為我院2013 年1 月至2013 年9 月收治的肺癌晚期患者,其中男性33 例,女性32 例;年齡45~82 歲,平均年齡為(56.2±3.6)歲,小細(xì)胞癌14 例,非小細(xì)胞癌51 例(鱗癌20 例,腺癌31 例);Ⅲ期49 例,Ⅳ期16 例。入選標(biāo)準(zhǔn):患者無其他腫瘤史;患者不伴發(fā)自身免疫性疾病,如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、風(fēng)濕性骨關(guān)節(jié)病等;患者未服用激素類藥物或接受免疫抑制劑的治療[3]。選擇與患者性別年齡相匹配的健康人20 例即健康對照組,其中男女各10 例;年齡38~70 歲,平均(55.3±2.9)歲。

        1.1.2 主要試劑和儀器 BD 公司的FACSCalibur流式細(xì)胞儀、Tritest CD4FITC/CD8PE/CD3PerCP 試劑、10 ×免洗溶血素。

        1.2 方法

        1.2.1 T 細(xì)胞亞群的檢測 具體步驟如下:患者清晨空腹抽取2 ml 外周靜脈全血選擇EDTA 抗凝,將5 μl CD4FITC/CD8PE/CD3PerCP 試劑加入流式管中,加入20 μl EDTA 抗凝血,渦旋振蕩混合均勻,室溫避光15 min,加入經(jīng)10 倍稀釋的免洗溶血素(BD公司)450 μl,室溫避光15 min,樣本溶血充分后流式細(xì)胞儀FACSCalibur(BD 公司)檢測,MULTISET軟件進(jìn)行分析。

        1.3 統(tǒng)計學(xué)分析 所有數(shù)據(jù)采用SPSS17.0 軟件包進(jìn)行分析,差異比較采用t 檢驗,以P <0.05 具有統(tǒng)計學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 肺癌晚期患者CD4+T 細(xì)胞的水平 應(yīng)用流式方法對健康對照組(NC 組)、小細(xì)胞肺癌組(SCLC組)和非小細(xì)胞肺癌組(NSCLC 組)進(jìn)行了CD3+CD4+T 細(xì)胞表達(dá)水平的測定,見圖1。與NC 組相比SCLC 組和NSCLC 組均顯著下降,P <0.01,詳細(xì)結(jié)果見表1 和圖2A。

        2.2 肺癌晚期患者CD8+T 細(xì)胞的水平及CD4+/CD8+比值 與NC 組相比SCLC 組和NSCLC組CD3+CD8+T細(xì)胞表達(dá)水平并無顯著差異。但是與NC 組相比SCLC 組CD4+/CD8+比值顯著下降,P <0.05,詳細(xì)結(jié)果見表1 和圖2B、C。

        圖1 NC 組、SCLC 組和NSCLC 組CD3 +CD4 +T 細(xì)胞和CD3 +CD8 +T 細(xì)胞表達(dá)的代表性流式細(xì)胞圖Fig.1 Representative flow cytometric graphs of CD3 +CD4 + T cells and CD3 + CD8 + T cells in NC group,SCLC group and NSCLC group

        表1 小細(xì)胞肺癌與非小細(xì)胞肺癌晚期患者外周血T 細(xì)胞亞群檢測結(jié)果比較(%,±s)Tab.1 Difference of peripheral blood T lymphocyte subset between patients with advanced small cell lung cancer and non-small cell lung cancer(%,±s)

        表1 小細(xì)胞肺癌與非小細(xì)胞肺癌晚期患者外周血T 細(xì)胞亞群檢測結(jié)果比較(%,±s)Tab.1 Difference of peripheral blood T lymphocyte subset between patients with advanced small cell lung cancer and non-small cell lung cancer(%,±s)

        Note:Compared with NC group,1)P <0.05,2)P <0.01.

        圖2 NC、NSCLC 和SCLC 三組CD3 +CD4 +、CD3 +CD8 +T 淋巴細(xì)胞及CD4 +/CD8 +比值的比較Fig.2 Comparison of percentage of CD3 +CD4 +T cells,CD3 +CD8 +T cells and CD4 +/CD8 + among NC,NSCLC and SCLC three groups

        表2 非小細(xì)胞肺癌晚期男女患者外周血T 細(xì)胞亞群檢測結(jié)果比較(%,±s)Tab.2 Difference of peripheral blood T lymphocyte subset between males and females with advanced nonsmall cell lung cancer(%,±s)

        表2 非小細(xì)胞肺癌晚期男女患者外周血T 細(xì)胞亞群檢測結(jié)果比較(%,±s)Tab.2 Difference of peripheral blood T lymphocyte subset between males and females with advanced nonsmall cell lung cancer(%,±s)

        Note:Female group compared with male group,1)P <0.05.

        表3 小細(xì)胞肺癌晚期男女患者外周血T 細(xì)胞亞群檢測結(jié)果比較(%,±s)Tab.3 Difference of peripheral blood T lymphocyte subset between males and females with advanced small cell lung cancer(%,±s)

        表3 小細(xì)胞肺癌晚期男女患者外周血T 細(xì)胞亞群檢測結(jié)果比較(%,±s)Tab.3 Difference of peripheral blood T lymphocyte subset between males and females with advanced small cell lung cancer(%,±s)

        2.3 不同性別肺癌晚期患者外周血CD3+CD4+T細(xì)胞和CD3+CD8+T 細(xì)胞水平以及CD4+T/CD8+T比值的比較 無論是NSCLC 還是SCLC 晚期患者,外周血CD3+CD4+T 細(xì)胞和CD3+CD8+T 細(xì)胞水平男女并無差異,見表2。CD4+T/CD8+T 比值SCLC晚期患者男女并無差異,而NSCLC 晚期患者女性顯著低于男性,見表3。

        3 討論

        隨著對腫瘤免疫機制的探索,我們發(fā)現(xiàn)惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展與機體的免疫功能密切相關(guān),抗腫瘤免疫尤以細(xì)胞免疫最為重要,T 細(xì)胞亞群之間的平衡是維持免疫系統(tǒng)內(nèi)部穩(wěn)定的重要環(huán)節(jié),目前T 細(xì)胞亞群的測定被廣泛應(yīng)用于監(jiān)測腫瘤的發(fā)展、判斷療效以及預(yù)后[4-6]。CD3+CD4+T 細(xì)胞能夠通過分泌細(xì)胞因子活化單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和NK 細(xì)胞,并誘導(dǎo)單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和NK 細(xì)胞發(fā)生免疫應(yīng)答進(jìn)而發(fā)揮抗腫瘤功能。CD4+T 細(xì)胞還可以分泌IL-2 作為第二信號活化CD8+T 細(xì)胞然后參與對抗腫瘤的免疫應(yīng)答[3,7]。CD3+CD8+T 細(xì)胞為抑制性T細(xì)胞發(fā)揮免疫抑制功能,二者處于平衡狀態(tài)機體才能發(fā)揮正常的免疫功能。有研究發(fā)現(xiàn)由于多重免疫抑制因素的作用肺癌患者通常處于免疫抑制狀態(tài)[8]。這些抑制因素能夠抑制CD3+CD4+T 細(xì)胞的成熟和分化,進(jìn)而減少了CD3+CD4+T 細(xì)胞的數(shù)量,并且削弱了對機體腫瘤細(xì)胞的免疫監(jiān)督功能。與此同時CD3+CD8+T 細(xì)胞顯著增多進(jìn)一步削弱識別殺傷腫瘤細(xì)胞的功能[3]。本次研究發(fā)現(xiàn)肺癌晚期患者無論是NSCLC 還是SCLC 較健康人其CD3+CD4+T 細(xì)胞的比例都顯著下降這與Da-Ping Yu等[3]的研究結(jié)果是一致的,而且NSCLC 和SCLC 晚期的患者其CD3+CD4+T 細(xì)胞的比例無顯著性差異,也不存在男女性別不同引起的差異這與Da-Ping Yu 等[3]的研究結(jié)果是一致的。說明肺癌晚期患者的細(xì)胞免疫功能嚴(yán)重受損,嚴(yán)重影響對腫瘤細(xì)胞的識別和殺傷,導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞在機體內(nèi)廣泛擴散。

        本次研究發(fā)現(xiàn)肺癌晚期患者無論是NSCLC 還是SCLC 較健康人其CD3+CD8+T 細(xì)胞的比例都無顯著差異這與Da-Ping Yu 等[3]的研究結(jié)果不同,Da-Ping Yu 等[3]的研究發(fā)現(xiàn)NSCLC 患者CD3+CD8+T 細(xì)胞的比例較健康人顯著升高,分析之所以結(jié)果會有差異與我們選擇的研究對象不同有關(guān),本研究選擇的患者是處于Ⅲ期和Ⅳ期的NSCLC 和SCLC 患者即肺癌晚期患者,而Da-Ping Yu 等人的研究選擇的研究對象為Ⅰ期-Ⅳ期的NSCLC 患者。本次研究發(fā)現(xiàn)肺癌晚期患者無論是NSCLC 還是SCLC 其CD3+CD8+T 細(xì)胞的比例不存在性別差異這與Da-Ping Yu 等人的得出的NSCLC 患者CD3+CD8+T 細(xì)胞的比例不存在性別差異的結(jié)論是一致的。本次研究還發(fā)現(xiàn)NSCLC 晚期女性患者較男性患者CD4+/CD8+比值顯著降低,而SCLC 患者則無性別引起的差異,具體原因尚不清楚有待深入研究。

        綜上所述,無論是小細(xì)胞還是非小細(xì)胞肺癌晚期患者機體的細(xì)胞免疫都遭受重創(chuàng)CD3+CD4+T 細(xì)胞的比例較健康人顯著降低,而CD3+CD8+T 細(xì)胞的比例較健康人并無顯著差異。簡言之肺癌晚期患者由于細(xì)胞免疫功能嚴(yán)重受損,削弱了識別和殺傷腫瘤細(xì)胞的功能,使腫瘤細(xì)胞進(jìn)一步廣泛擴散疾病進(jìn)展,據(jù)此情況我們在今后的臨床治療應(yīng)著重考慮采取針對提高機體細(xì)胞免疫功能的治療方案,并將檢測患者T 淋巴細(xì)胞亞群的變化作為評價療效和預(yù)后的參考指標(biāo)。

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