吳 鵬，謝世英，黃 茜，安 思

(武漢大學人民醫(yī)院檢驗科 430060)

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·論 著·

迪瑞尿沉渣流水線用于尿液有形成分鏡檢篩選標準的研究

吳 鵬，謝世英，黃 茜，安 思

(武漢大學人民醫(yī)院檢驗科 430060)

目的 制訂迪瑞尿沉渣流水線檢測尿液的鏡檢篩選規(guī)則，并驗證該規(guī)則在臨床中的應用。方法 采用流水線對1 161份收集于武漢大學人民醫(yī)院的尿液標本進行尿常規(guī)檢測，同時由2名主管檢驗師對上述標本進行手工計數(shù)。根據(jù)流水線檢測結果與鏡檢結果制訂復檢規(guī)則并對265份臨床尿液標本進行驗證。結果 本研究根據(jù)檢測結果統(tǒng)計分析共篩選出39條需要復檢的規(guī)則和25條無需復檢的規(guī)則。以鏡檢結果為標準，真陽性率為49.96%(580/1 161)，假陽性率為9.04%(105/1 161)，真陰性率為39.71%(461/1 161)，假陰性率(漏診率)為1.55%(18/1 161)，復檢率為16.19%(188/1 161)。根據(jù)制訂的復檢規(guī)則對臨床標本驗證結果為：真陽性率66.42%(176/265)，假陽性率4.15%(11/265)，真陰性率28.68%(76/265)，假陰性率0.75%(2/265)，復檢率16.86%(43/265)。結論 針對迪瑞尿沉渣流水線制訂的復檢規(guī)則能夠有效篩選出真正需要鏡檢確認的復檢標本，各實驗室應根據(jù)不同儀器制訂不同的篩選標準。

尿沉渣分析； 復檢規(guī)則； 漏診率； 復檢率

自動化尿液流水線已在臨床廣泛應用，提高了檢測效率，但是由于尿液自動化尿液分析儀仍存在方法學的局限性，顯微鏡鏡檢是必不可少的。如何在自動化設備的使用和人工鏡檢中找到最佳的結合點，使儀器發(fā)揮最大效率又不漏診、誤診，臨床標本就成了近年來的研究熱點。現(xiàn)階段復檢篩選標準以流式細胞和熒光核酸染色技術為原理的希森美康UF系列尿沉渣分析儀研究較多[1-2]。而另一類以尿液有形成分圖像自動識別技術的儀器少有報道，本研究使用迪瑞FUS-200全自動尿沉渣分析儀和H-800干化學分析儀組成的尿液流水線為該類儀器建立其篩選規(guī)則。

1 材料與方法

1.1 標本來源 收集2014年5～8月武漢大學人民醫(yī)院門診和住院患者的尿液常規(guī)標本共1 161份，其中男462份，女699份，平均年齡45歲。尿液留取標準依據(jù)《臨床檢驗操作規(guī)程》第3版[3]，所采集標本要在2 h內全部完成檢測。選擇2014年8月門診和住院患者尿液常規(guī)標本265份，以驗證所建立復檢規(guī)則的臨床有效性。

1.2 儀器與試劑 迪瑞尿沉渣流水線由長春迪瑞公司生產(chǎn)的FUS-200尿有形成分分析儀和H-800尿干化學分析儀組成。FUS-200尿有形成分分析儀使用原裝配套試劑、質控品、校準品；H-800尿干化學分析儀使用原裝配套試紙條和配套質控品，測試期間各儀器室內質控穩(wěn)定，未出現(xiàn)失控現(xiàn)象。光學顯微鏡CX-22(日本Olympus公司)、白洋低速臺式離心機B600A。

1.3 方法

1.3.1 自動化尿液常規(guī)檢測 每日隨機抽取50～70份中段尿液標本，連續(xù)收集20 d，在FUS-200尿有形成分分析儀和H-800尿干化學分析儀進行檢測，將原始檢測結果備份存檔。

1.3.2 尿沉渣顯微鏡鏡檢 每份標本經(jīng)儀器檢測后，將標本在2 000 r/min條件下離心，由選定的2名主管檢驗師吸取沉淀采用雙盲法進行鏡檢，對白細胞(WBC)、紅細胞(RBC)、管型(CAST)及其他有形成分進行定量計數(shù)，計算2名檢驗師檢測結果的均值作為鏡檢結果。鏡檢結果參考《全國臨床檢驗操作規(guī)程》[3]。

1.3.3 自動化尿液常規(guī)分析鏡檢篩選規(guī)則的建立 采用SPSS18.0對迪瑞尿沉渣流水線檢測RBC、WBC、CAST、隱血(BLD)、白細胞酯酶(LEU)、蛋白(PRO)共6個檢測項目的陰性、陽性兩種檢測結果作為篩選規(guī)則的篩選表達式。經(jīng)過對6項參數(shù)進行排列組合后得到64條篩選規(guī)則，1 161份標本檢測結果的64條篩選規(guī)則見表1。

1.3.4 復檢規(guī)則的制訂與評估 (1)利用交叉互檢原則建立復檢規(guī)則，當FUS-200尿有形成分分析儀和H-800尿液干化學分析儀檢測的RBC、WBC結果出現(xiàn)陽性與陰性差異作為需要鏡檢的規(guī)則。(2)由于H-800檢測的蛋白和FUS-200檢測的管型之間沒有必然的相關性，因此沒有對這2個項目進行交叉互檢，判斷是否需要鏡檢的基本原則是結合RBC與WBC結果綜合分析，并且管型為陽性蛋白陰性時設為鏡檢規(guī)則，如表1中的第18、20、24、34、36、40、41、42、44、48、49、50、52、56條，其原因是不能漏檢管型。(3)本研究出現(xiàn)概率為0的項目，雖然這幾種情況出現(xiàn)的概率極低，但是出現(xiàn)很有可能是檢測中存在干擾或分析誤差，所以把它們作為需要復檢的條件，表1中的第5、6、20、21、23、33、38、39、41、43、44、45、56條規(guī)則。(4) FUS-200的3項參數(shù)與H-800的3項參數(shù)的結果全部陽性時需要復檢，此時鏡檢需要確認的主要是管型，如表1中的第55條規(guī)則。

表1 根據(jù)迪瑞尿沉渣流水線6個檢測項目的陰、陽性檢測結果制訂的64條鏡檢復檢規(guī)則及各規(guī)則標本數(shù)

注：“+”為陽性；“-”為陰性。

1.4 統(tǒng)計學處理 采用SPSS17.0軟件對2名主管檢驗師所得鏡檢結果的一致性進行評估，使用Kappa值為一致率的評估標準。對迪瑞尿沉渣流水線檢測項目的陰性、陽性結果確定復檢規(guī)則的真陽性率、假陽性率、真陰性率、假陰性率(漏診率)及復檢率，并驗證規(guī)則的假陰性率。

2 結 果

2.1 顯微鏡鏡檢結果 對2名檢驗師檢測的RBC結果做Kappa檢驗，Kappa值為0.952表明2名檢驗師的鏡檢結果有較好的相關性。

2.2 復檢規(guī)則的建立與性能評估結果 見表2。通過對數(shù)據(jù)的分析和處理，此次研究設置了39條需要復檢的規(guī)則，25條無需復檢的規(guī)則。以鏡檢結果為標準，真陽性率為49.96%(580/1 161),假陽性率為9.04%(105/1 161),真陰性率為39.71%(461/1 161),假陰性率為1.55%(18/1 161)，復檢率為16.19%(188/1 161)。

2.3 復檢規(guī)則的臨床驗證 選取265份患者尿液標本用于復檢規(guī)則的驗證。以顯微鏡鏡檢結果為標準，其驗證結果真陽性率為66.42%(176/265)，假陽性率為4.15%(11/265)，真陰性率為28.68%(76/265)，假陰性率(漏診率)為0.75%(2/265)，復檢率為16.86%(43/265)。其假陰性率小于5.00%。

表2 迪瑞尿沉渣流水線自動化尿液分析39條需要復檢的規(guī)則及各規(guī)則標本數(shù)

注：“+”為陽性；“-”為陰性。

3 討 論

尿液常規(guī)檢查是臨床檢驗技術中一項經(jīng)典的檢驗項目，已有數(shù)百年的發(fā)展歷史。由于尿液標本留取方便，使用全自動尿沉渣分析儀和干化學分析儀組成的尿液流水線能夠快捷檢測尿液中的RBC、WBC、PRO和CAST等指標，所以尿常規(guī)分析是目前診斷和監(jiān)測腎臟疾病及其相關疾病的常規(guī)檢測手段[4-5]。但是醫(yī)院每天尿液分析標本數(shù)量大、干擾檢驗環(huán)節(jié)多、耗時且重復性差導致難于標準化。因此許多實驗室利用儀器及顯微鏡鏡檢的優(yōu)點，制訂相應的鏡檢篩選規(guī)則，篩選去掉無需鏡檢的標本，然后對異常標本進行規(guī)范化檢查，從而在盡可能不影響檢測質量的同時減輕工作人員的工作量。現(xiàn)階段復檢篩選標準以流式細胞和熒光核酸染色技術為原理的希森美康UF系列尿沉渣分析儀研究較多[1]。對于以利用動態(tài)攝像技術和計算機圖像軟件技術為主的設備則少有相關報道[6-7]。本文以迪瑞FUS-200全自動尿沉渣分析為代表進行該類儀器篩選規(guī)則的建立和驗證。

本研究對尿干化學中的BLD、LEU、PRO和尿液有形成分中的RBC、WBC、CAST等6項進行排列組合，得到64條規(guī)則，對1 161份標本進行分析，最終得出39條復檢規(guī)則及25條無需復檢規(guī)則。在39條復檢規(guī)則中，有188份標本需要復檢，占總標本數(shù)的16.19%，主要是BLD和RBC、PRO和CAST、LEU和WBC不相符。在25條無需復檢規(guī)則中包含標本975份，其中與鏡檢完全相符的有936份，不完全相符的有39份(假陽性29份，假陰性10份)。本篩選規(guī)則的驗證共選取了265份標本，其驗證結果真陽性率為66.42%(176/265)，假陽性率為4.15%(11/265)，真陰性率為28.68%(76/265)，假陰性率(漏診率)為0.75%(2/265)，復檢率為16.86%(43/265)。復檢規(guī)則驗證假陰性只有2份標本，可能是由于驗證標本數(shù)較少。

如表2所示，UF系列尿液分析儀復檢規(guī)則如馬駿龍等[1]制訂的篩選規(guī)則中的7、13、19、22、26、47、59、61與本次研究的5、16、24、29、33、36、42、49、52、53條不同，原因可能是由于篩選條件及儀器自身原理不同所致，其余大部分篩選規(guī)則相符，可見不同種類儀器的篩選規(guī)則較為相似。陳雨等[8]則根據(jù)尿液的不同檢測方法，設計了4種檢測方案，評估后找出最佳方案并建立復檢規(guī)則，是當聯(lián)合使用干化學和尿流式兩種檢測系統(tǒng)檢出的BLD和RBC、PRO和CAST、LEU和WBC不相符時建立的復檢方案，共56條規(guī)則。此類篩選規(guī)則基本包括了此次研究所指定的所有篩選規(guī)則，雖然最大限度防止了漏診事件發(fā)生，但是相比本研究所篩選的規(guī)則建立的規(guī)則復檢率更低，能夠使臨床復檢的工作量更小，更易為臨床接受。

另外，F(xiàn)US-200類的儀器均可以直觀看到各類細胞的形態(tài)，儀器本身能夠提供修正模式，但是修正模式本身會增加工作量[9]。因此本研究檢驗并未采取該模式，使用修正模式可能會減少相應的篩選條款，因為有報道指出修正模式更接近鏡檢，所以此類儀器可以將篩選標準結合修正模式進一步細化[10]。本研究只適合于迪瑞FUS-200尿有形成分分析儀和H-800尿液干化學分析儀，各實驗室應根據(jù)使用儀器來制訂相應的篩選規(guī)則。

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Study of the screening criteria for Dirui urinary sediment analyzer on the microscopic screening of the urine formed components

WUPeng,XIEShi-ying,HUANGQian,ANSi

(DepartmentofClinicalLaboratory,RenminHospitalofWuhanUniversity,Wuhan,HuBei430060,China)

Objective To establish the proper review rules for microscopic screening of urine analysis by Dirui urine sediment analysis work station,and to verify the rules by clinical samples.Methods 1 161 random urine samples were selected from Renmin Hospital of Wuhan University and analyzed by urinalysis work station.Each sample was examined by two technologists using microscopy.Review rules were determined according to the results of urinalysis work station and microscopy.Furthermore,review rules were validated by 265 randomly selected urine samples.Results 39 rules for microscopic review and 25 rules for no further microscopic examination were set up by analysis of results.The true positive rate was 49.96%(580/1 161),the false positive was 9.04%(105/1 161),the true negative rate was 39.71%(461/1 161),the false negative rate (rate of missed diagnosis) was 1.55%(18/1 161),the review rate was 16.19%(188/1 161),when the microscopic examination result was taken as the judging criterion.Clinical urine samples were analyzed to validate these review rules and the true positive rate was 66.42%(176/265),the false positive was 4.15%(11/265),the true negative rate was 28.68%(76/265),the false negative rate was 0.75%(2/265),the review rate was 16.86% (43/265).Conclusion The reviews rules established in this study for Dirui urine sediment analysis work station can effectively detect abnormal urine samples and improve the efficiency and the quality of urinalysis in routine clinical practice,and the laboratory should establish different review standards according to the different instruments.

urine sediment; review rules; rate of missed diagnosis; review rate

吳鵬，男，碩士，主管技師，主要從事臨床基礎檢驗研究。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.24.019

A

1672-9455(2015)24-3660-03

2015-06-24

2015-08-20)