宋小川，李凌波

(1.新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院輸血科，烏魯木齊 830011；2.長春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司，長春 130102)

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·臨床探討·

6例維吾爾族患者A3B亞型檢測與血清學(xué)分析

宋小川1，李凌波2△

(1.新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院輸血科，烏魯木齊 830011；2.長春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司，長春 130102)

目的 對新疆維吾爾族患者中A3B亞型進(jìn)行血清學(xué)檢測并分析，為臨床安全輸血提供借鑒。方法 采用微柱凝集技術(shù)對住院患者進(jìn)行常規(guī)血型檢測，對正定型為AB型，且紅細(xì)胞與抗-A出現(xiàn)“混合視野”凝集的血型進(jìn)一步結(jié)合血清學(xué)吸收放散試驗(yàn)等進(jìn)行鑒定。結(jié)果 在45 326例維吾爾族患者中檢出AB型8 450例，其中紅細(xì)胞與抗-A出現(xiàn)“混合視野”凝集6例，結(jié)合唾液ABH血型物質(zhì)檢測及吸收放散等試驗(yàn)最終判斷該6例為A3B亞型。結(jié)論 A3B亞型由于其A抗原性較弱，正定型容易誤定為“B型”，為避免誤判，血型鑒定一定要做正反定型，并注意觀察凝集強(qiáng)度，防止亞型漏檢給臨床輸血帶來隱患。

A3B亞型； 微柱凝集技術(shù)； 分析； 輸血

ABO血型亞型是表型，主要是經(jīng)血型血清學(xué)試驗(yàn)以抗原性弱為主要特征的多種表型，A1和A2是血型血清學(xué)方法確定的最重要的A型紅細(xì)胞亞型，其余還包括A的弱亞型A3、Ax、Am、Ael等，其A抗原表達(dá)逐漸減弱，A3型紅細(xì)胞的最大特征是混合視野凝集，即A3細(xì)胞與抗-A和大多數(shù)抗-AB孵育后出現(xiàn)一些由數(shù)個(gè)紅細(xì)胞形成的小凝集塊，并被絕大部分游離的非凝集紅細(xì)胞包圍，在微柱凝集技術(shù)則表現(xiàn)為離心后凝集的紅細(xì)胞位于凝膠頂部而陰性紅細(xì)胞沉于微柱凝膠的尖底部的雙群(混合凝集)形式，A3B即是AB血型的一種亞型[1-3]。ABO血型的表型，通常是由正反定型二者決定的，正定型檢測紅細(xì)胞抗原，反定型檢測人血清中抗體，由于部分ABO亞型由于其抗原性弱常表現(xiàn)為正定型凝集強(qiáng)度弱、混合視野凝集或正反定型不相符合，因此只有正反方向ABO血型抗原和抗體的同時(shí)檢測，才能正確完整地進(jìn)行ABO血型定型。本研究自2013年1月至2015年1月采用微柱凝集技術(shù)對45 326例維吾爾族患者血液標(biāo)本進(jìn)行ABO血型正反定型，共檢出AB型8 450例，并對其中6例紅細(xì)胞與抗-A出現(xiàn)“混合視野”的血型進(jìn)一步結(jié)合血清學(xué)吸收放散試驗(yàn)等進(jìn)行鑒定，最終判斷為A3B亞型，現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 45 326例血液標(biāo)本來自新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院2013年1月至2015年1月收治的維吾爾族住院患者，其中男24 672例，女20 654例，年齡0～87歲。AB型中發(fā)現(xiàn)6例其紅細(xì)胞與抗-A出現(xiàn)“混合視野”凝集，需進(jìn)一步結(jié)合血清學(xué)吸收放散試驗(yàn)等進(jìn)行鑒定。

1.2 試劑與儀器 ABODE血型檢測卡(微柱凝膠)，ABO血型反定型試劑盒(人血紅細(xì)胞)，由長春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司生產(chǎn)；抗-A、抗-B血型定型試劑(單克隆抗體)由北京金豪制藥股份有限公司生產(chǎn)；單克隆抗-AB、抗-H、抗-A1由德國Bio-Rad Medical Diagnostics GmbH公司生產(chǎn)，以上所有試劑均在效期內(nèi)使用。人血清抗-A、抗-B及A1B、A2B型紅細(xì)胞試劑由本科室自制。BYL型血型血清學(xué)多用離心機(jī)由長春博研醫(yī)學(xué)生物儀器公司生產(chǎn)；電熱恒溫水槽由上海申賢恒溫設(shè)備廠生產(chǎn)。

1.3 方法 樣本ABO血型鑒定，采用微柱凝膠卡式法及試管法，試管法分別在不同溫度條件下檢測，卡式法按廠家說明書操作，試管法按文獻(xiàn)[4]操作；紅細(xì)胞吸收放散試驗(yàn)、唾液中HAB血型物質(zhì)測定均按文獻(xiàn)[4]操作。

2 結(jié) 果

2.1 ABO血型鑒定(微柱凝集卡式法) 6例血樣經(jīng)卡式法檢測，正定型均顯示為AB型，且6例樣本紅細(xì)胞均與抗-A出現(xiàn)“雙群”(混合凝集)形式，反定型均為AB型。

2.2 ABO 血型鑒定及H 抗原檢查(試管法) 見表1。

表1 6例患者ABO血型鑒定及H抗原檢查(試管法)

注：“mf”為混合視野凝集。

2.3 紅細(xì)胞吸收放散試驗(yàn) 6例患者樣本均取洗滌3次后的紅細(xì)胞懸液(1 mL)分別與等量人血抗-A、抗-B血清混合，4 ℃吸收1 h，洗滌后經(jīng)56 ℃熱放散；取放散液與4% A1型及B型紅細(xì)胞懸液反應(yīng)發(fā)生凝集，證實(shí)患者紅細(xì)胞上存在A及B抗原。

2.4 唾液中H及AB血型物質(zhì)測定 6例患者唾液中，2例未測到A、B物質(zhì)，只含有H物質(zhì)，為非分泌型；4例唾液中有A、B及H物質(zhì)，為分泌型。

2.5 紅細(xì)胞H物質(zhì)活性強(qiáng)度測定 將6例患者紅細(xì)胞及正常成人A1、B、O、A1B、A2B型紅細(xì)胞分別與抗-H反應(yīng)，結(jié)果凝集強(qiáng)度分別為+++、-、++、++++、-、+。

3 討 論

血型是人類的一種遺傳性狀，當(dāng)前已發(fā)現(xiàn)的人類血型系統(tǒng)達(dá)到33個(gè)、血型抗原集合7個(gè)[5-6]。ABO血型系統(tǒng)是與人類關(guān)系最密切的一個(gè)，ABO血型的遺傳規(guī)律和分布能夠很好地反映出種族的延續(xù)和早期人類的遷徙情況，對不同地區(qū)人群血型的研究，在科學(xué)地解釋某些疾病高發(fā)的相關(guān)問題及對疾病的預(yù)防和研究等有著重要的意義。維吾爾族是新疆地區(qū)最主要的少數(shù)民族，關(guān)于維吾爾族ABO血型分布的狀況已有諸多研究，有研究顯示，烏魯木齊地區(qū)健康維吾爾族體檢者ABO血型表型分布是A>B>O>AB，其中AB型最少，占16.46%[7]。本研究檢測了維吾爾族患者45 326例，檢出AB型8 450例，占18.64%，與上述報(bào)道類似。但在檢出的AB型中，經(jīng)卡式法檢測發(fā)現(xiàn)有6例正定型紅細(xì)胞與抗-A出現(xiàn)“混合視野”的格局，反定型正常，排除人為及疾病因素后，懷疑為ABO亞型，遂通過試管法定型并結(jié)合血清學(xué)吸收放散試驗(yàn)等進(jìn)行了驗(yàn)證。

在ABO血型亞型的鑒定中，一般可根據(jù)受檢者紅細(xì)胞抗原與相應(yīng)血清抗體反應(yīng)的強(qiáng)弱、血清中抗體的特異性及分泌型人血型物質(zhì)的性質(zhì)及量來判斷。在本試驗(yàn)，6例樣本紅細(xì)胞與試管法中單克隆抗-A在4 ℃、室溫、37 ℃均發(fā)生弱凝集(混合凝集)，說明其紅細(xì)胞上存在A抗原(吸收放散試驗(yàn)亦證實(shí))，唾液型物質(zhì)測定中也有4例分泌型證實(shí)含有A、B及H物質(zhì)，可見6例樣本均應(yīng)為AB型而不是B型，這也與反定型結(jié)果一致。A3(或A3B)型最重要特征就是混合視野凝集外觀，即A3(或A3B)紅細(xì)胞與抗-A混合后出現(xiàn)一些由數(shù)個(gè)紅細(xì)胞形成的小凝塊，并被絕大部分游離的非凝集紅細(xì)胞包圍，少部分A3(或A3B)型人的血清中含有抗-A1。本試驗(yàn)研究顯示，發(fā)現(xiàn)的6例患者均是紅細(xì)胞與抗-A混合后出現(xiàn)混合視野(或卡式法的雙群)，但血清中均含有抗-A1，只要能分辨弱凝集與混合視野凝集，在正反定型中已可初步定為A3B亞型。

A2B是AB型的一個(gè)最常見的亞型，其與A3B亞型血清學(xué)特征一致的是紅細(xì)胞上均不含A1抗原，僅含A抗原，血清中可能含有抗-A1抗體。二者主要區(qū)別即在于紅細(xì)胞與抗-A反應(yīng)的強(qiáng)度及是否存在混合凝集視野，有研究認(rèn)為這應(yīng)與不同亞型紅細(xì)胞上的A抗原表達(dá)有關(guān)[8]。紅細(xì)胞H物質(zhì)活性強(qiáng)度測定可以幫助部分鑒別ABO亞型，常見的ABO血型成人紅細(xì)胞H抗原性從強(qiáng)到弱依次順序?yàn)镺>A2>B>A2B>A1>A1B，而A3≥A2。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，6例患者紅細(xì)胞及健康成人A1、B、O、A1B、A2B型紅細(xì)胞分別與抗-H反應(yīng)，H抗原性從強(qiáng)到弱依次為O>患者紅細(xì)胞>B>A2B>A1=A1B，由此也可判斷樣本非A2B，而為A3B亞型。

A3B亞型由于其A抗原性較弱，正定型容易誤定為“B型”，引起ABO血型的誤判[9]。尤其需注意的是，A3B亞型血型定型更容易被定為AB型，在不做反定型情況下，如血清中出現(xiàn)了抗-A1抗體，輸血輸入正常AB型血液也會(huì)引起溶血性輸血反應(yīng)，威脅患者健康[10]。研究認(rèn)為，對于諸如此類抗原減弱的患者必須認(rèn)真咨詢其血型，并進(jìn)行吸收放散試驗(yàn)、唾液型物質(zhì)檢測，監(jiān)測紅細(xì)胞表面H抗原強(qiáng)度、紅細(xì)胞與抗-A、抗-B、抗-AB的反應(yīng)情況，甚至做ABO血型基因鑒定確定血型，并保證同型輸血或輸入O型紅細(xì)胞，以保障患者輸血安全[11-12]。

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A

1672-9455(2015)15-2245-03

2015-02-25

2015-04-15)

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